Autologisen MSC-infuusion turvallisuus epilepsian hoidossa (AMSCDRSE)

Tämän vaiheen 1 kliinisen tutkimuksen päätavoitteena oli arvioida autologisen mesenkymaalisen kantasolun (MSC) turvallisuutta lääkeresistentin oireenmukaisen epilepsian hoitona yhden keskuksen tutkimuksessa. On hyvin tunnettua, että lääkeresistentti oireenmukainen epilepsia on dramaattisesti invalidisoiva sairaus, johon sovelletuilla paikallaan olevilla ja avohoitohoidoilla ei ole todellista kliinistä vaikutusta. Siksi tarvitaan uusia lähestymistapoja remission saavuttamiseksi, taudin etenemisen pysäyttämiseksi ja potilaiden elämänlaadun parantamiseksi. Tätä tutkimusta varten tutkimukseen otettiin mukaan molempien sukupuolten aikuiset (18-60-vuotiaat) potilaat (pts), jotka kärsivät lääkeresistentistä oireenmukaisesta epilepsiasta, jossa esiintyi usein (> 5 tapahtumaa kuukaudessa) kohtauksia. Lääkeresistenssi määriteltiin ilmeisen kliinisen vasteen puuttumisena (eli kohtausten esiintymistiheyden väheneminen tai taudin etenemisen vähentyminen) potilailla, joilla oli oireinen epilepsia karbamatsepiinille, valproiinihapolle, topiramaatille, lamotrigiinille tai fenobarbitaalille (eli anti- epilepsialääkkeet [AED]) monoterapiana ja eri yhdistelminä edellisen kalenterivuoden aikana. Poissulkemiskriteereinä olivat potilaan kieltäytyminen osallistumasta, epäsuotuisat reaktiot hoitoon, keskushermoston tulehdustilat, krooniset psykoosit, keskushermoston kasvaimet, kroonisten somaattisten tai neurologisten sairauksien uusiutuminen sekä veren B- tai C-hepatiitti tai HIV-positiivisuus. Suunnitelmaan sisältyi 30 pisteen sisällyttäminen tutkimusryhmään ja 30 pistettä kontrolliryhmään 5 vuoden aikana. Potilaat satunnaistettiin standardihoitoon AED:illä (kontrolliryhmä) tai AED:illä plus autologisilla mesenkymaalisilla kantasoluilla (MSC:t, tutkimusryhmä). MSC:t saatiin saman potilaan luuydinnäytteistä ja puhdistettiin ja laajennettiin ex vivo erikoistuneessa solubioteknologian laboratoriossa. MSC:t karakterisoitiin immunofenotyypityksen avulla CD90+CD105+CD45-CD34-soluina. Kolmen viikon in vitro -viljelyn jälkeen osaa MSC:stä viljeltiin lisäksi 7 päivää Neurocult-XF-proliferaatioelatusaineessa neuroindusoitujen MSC:iden saamiseksi. Neuroinduktio todistettiin geneettisten markkerien nestin ja hermosoluspesifisen enolaasin läsnäololla. Lopuksi 40-101 x 106 autologista viljeltyä MSC:tä ja 2,7-8,0 x 106 autologista neuroindusoitua MSC:tä kerättiin, suspendoitiin uudelleen suolaliuokseen, joka sisälsi 5 % autologista veriseerumia injektiota varten, ja siirrettiin elinkelpoisuuden mittauksen jälkeen (98 % soluja). kliiniseen keskukseen.

Tutkimusryhmän potilaat saivat yhden hitaasti (yli 5-10 minuutin) suonensisäisen injektion ex vivo -laajentuneita autologisia MSC:itä 20 ml:n tilavuudessa, ja 5-7 päivää myöhemmin jokainen tutkimusryhmän potilas sai lisää hitaasti annosteltua neuroindusoitujen MSC:iden endolumbal-injektio 5 ml:n tilavuudessa. Arvioitiin sekä epäsuotuisat reaktiot MSC-injektioihin (yli päivän kuluttua toimenpiteiden suorittamisesta) että varhaiset (enintään yksi kuukausi) ja myöhäiset (enintään 6 kuukautta) kliiniset vaikutukset, mukaan lukien komplikaatiot. MSC-injektioiden epäsuotuisia reaktioita olivat paikallinen kipu tai verenvuoto injektiokohdassa ja keskushermoston systeemiset reaktiot (CNS, eli hypertermia, väsymys ja lihaskipu). Myöhemmin tutkittiin keskushermoston ja verisuonijärjestelmän mahdollisia epäsuotuisia systeemisiä reaktioita, mukaan lukien kontrolloitavan taudin etenemisen tarttuvia ja ei-tarttuvia komplikaatioita. Kaikki tapahtumat dokumentoitiin lääketieteellisiin kortteihin. Tapauksissa, joissa näissä tapahtumissa oli vaarallisia piirteitä, ne ilmoitettiin seurantalautakunnan (keskuksen eettisen toimikunnan) jäsenille potilaiden tutkimuksen ulkopuolelle jättämisen tai kliinisen tutkimuksen lopettamisen arvioimiseksi.

Arvioitiin myös MSC-pohjaisen hoidon mahdolliset hyödylliset vaikutukset tutkimusryhmän pts. Nämä vaikutukset havaittiin kliinisillä havainnoilla valituissa hoidon aikapisteissä (eli 3 ja 12 kuukautta MSC-pohjaisen hoidon soveltamisen jälkeen) ja sähköenkefalografiamittauksilla ennen hoitoa ja vuoden kuluttua hoidon jälkeen. Taudin etenemisen mahdollisten muutosten määrittämiseksi arvioitiin kognitiivisen heikentymisen merkkejä, käyttäytymishäiriöitä sekä muutoksia kohtausten ominaisuuksissa ja esiintymistiheydessä. Kognitiivisen vajaatoiminnan arvioimiseen käytimme mielentilatutkimusta. Sairauden vammauttava vaikutus jokapäiväiseen elämään oli pisteytys käyttäen Subjective Handicap of Epilepsy Scalea. Tilaahdistusta ja masennusta arvioitiin sairaalan ahdistus- ja masennusasteikolla. Muutokset kohtausten ominaisuuksissa ja esiintymistiheydessä arvioitiin käyttämällä National Hospital Scale of Seziure Severity -asteikkoa. Vapaaehtoisen huomion ja suorituskyvyn prosesseja tutkittiin Schulte-pöydillä Kraepelinin menetelmien mukaisesti. Sensomotoristen reaktioaikojen sekä huomion jakautumisen ja pysyvyyden tutkimiseen käytettiin Schulte-taulukoita. "Kraepelinin tili" -menetelmällä tutkittiin terveyttä, väsymystä ja huomion pysyvyyttä. Lyhytaikaisen muistin arviointi suoritettiin 10 sanan ulkoamismenetelmällä; Tällä menetelmällä pyritään määrittämään suu-äänen muistin määrä ja nopeus.

Tärkeimmät sairauden seurannassa käytetyt kliiniset ominaisuudet olivat "kyllä" tai "ei" vasteet (koskee hoitoa), kohtausten esiintymistiheys (kuukaudessa) ja taudin remissio aikaisin (3 kuukautta) ja myöhään (12 kuukautta ja enemmän) pisteitä hoidon jälkeen. Osittaisten hoitovasteiden arvioimiseksi arvioitiin niiden potilaiden lukumäärä, joiden kohtausten esiintymistiheys väheni 50 %. Kohtaustyyppi (eli yleistynyt toonis-klooninen, osittainen kompleksi, yksinkertainen osittainen ja usean tyyppiset kohtaukset) arvioitiin myös kohtaustyypin muutosten kanssa hoitojakson aikana.

Elektroenkefalografiatallenteet suoritettiin sisäänpääsyn yhteydessä ja koko tarkkailujakson ajan käyttämällä Mizar EEG 201 -enkefalografiajärjestelmää biopotentiaalin rekisteröinnillä 16 kehon pisteestä "10-20" -kaavion mukaisesti. Havaitut sähköiset alfa-, beeta-, theta- ja delta-aallot analysoitiin 3 minuutin osissa (jokainen 1 minuutin segmentti laskettiin edelleen) ennen (saapumisen yhteydessä) ja 1 vuosi MSC-sovelluksen jälkeen. Myös alfa-aaltojen huipputaajuus laskettiin. Sekä spontaani tila että tila latauskoettimen jälkeinen (hyperventilaatio ja fotostimulaatio) arvioitiin jokaiselle potilaalle. Elektroenkefalografioiden (EEG) ominaisuudet johtuivat paikallisista ja diffuuseista aivokuoren muutoksista. Arvioimme paroksysmaalisuusindeksin, epileptiformisten aaltojen paikallisten ja yleistyneiden piikkien määrän minuutissa, EEG-aktiivisuuden huipputaajuuden, hitaan aktiivisuuden indeksin ja EEG-patologian merkkien yhteenvetopisteet. EEG:t, joissa oli epileptiformista aktiivisuutta, sisälsivät piikit, piikkihitaat aallot ja korkean amplitudin piikit. EEG - tallennukset tehtiin standardien ja lisäehdotusten mukaisesti . Kaikki arvioinnit suoritettiin verrokki- ja tutkimusryhmien pt:ille, ja saatuja tietoja verrattiin lisäsuoritetun MSC-pohjaisen terapian aiheuttamien mahdollisten erojen määrittämiseksi. Potilaan hoito lopetettiin milloin tahansa, jos havaittiin välittömiä epäsuotuisia reaktioita MSC-injektioihin. Potilaiden viimeiset havainnot sisälsivät kliiniset ja EEG-arvioinnit 12 kuukauden kuluttua (tai enemmän) MSC-pohjaisen hoidon soveltamisen jälkeen. Vertailu- ja tutkimusryhmien pisteiden yhteenvetotiedot kerättiin sähköiseen tietokantaan jatkoanalyysiä ja tulkintaa varten.