Az autológ MSC infúzió biztonsága az epilepszia kezelésére (AMSCDRSE)

Ennek az 1. fázisú klinikai vizsgálatnak a fő célja az autológ mezenchimális őssejt (MSC) alkalmazás biztonságosságának értékelése volt a gyógyszerrezisztens tüneti epilepszia terápiájaként egy egyközpontos vizsgálatban. Köztudott, hogy a gyógyszerrezisztens tüneti epilepszia drámaian érvénytelenítő betegség, amelyre az alkalmazott stacioner és ambuláns terápiáknak nincs valódi klinikai hatása. Ezért új megközelítésekre van szükség a remisszió eléréséhez, a betegség progressziójának megállításához és a betegek életminőségének javításához. Ebben a vizsgálatban olyan felnőtt (18-60 éves) betegeket vontunk be a vizsgálatba, akik mindkét nemben gyógyszerrezisztens tüneti epilepsziában szenvedtek gyakori (havi 5 esemény) görcsrohamokkal. A gyógyszerrezisztenciát a karbamazepin, a valproinsav, a topiramát, a lamotrigin vagy a fenobarbitál (azaz anti-barbitál) nyilvánvaló klinikai válasz hiányában határozták meg (azaz nem csökkent a rohamok gyakorisága vagy a betegség progressziójának csökkenése). epilepsziás szerek [AED]) monoterápiaként és különböző kombinációkban az előző naptári év során. A kizárás kritériumai a betegek részvételének megtagadása, a terápiára adott kedvezőtlen reakciók, központi idegrendszeri gyulladásos állapotok, krónikus pszichózisok, központi idegrendszeri daganatok, krónikus szomatikus vagy neurológiai betegségek visszaesése, valamint a hepatitis B vagy C, illetve HIV vírus pozitivitása volt. A terv tartalmazta 30 pont felvételét a vizsgálati csoportba és 30 pont a kontrollcsoportba 5 év alatt. A betegeket randomizáltuk a standard kezelésre AED-kkel (kontrollcsoport) vagy AED-kkel plusz autológ mezenchimális őssejtekkel (MSC-k, vizsgálati csoport). Az MSC-ket ugyanannak a páciensnek a csontvelő-mintáiból nyertük, és ex vivo tisztítottuk és szaporítottuk egy speciális sejtbiotechnológiai laboratóriumban. Az MSC-ket immunfenotipizálással jellemeztük CD90+CD105+CD45-CD34-sejtekként. 3 hetes in vitro tenyésztés után az MSC egy részét 7 napig Neurocult-XF proliferációs tápközegben tenyésztettük, hogy neuroindukált MSC-ket kapjunk. A neuroindukciót a nestin és a neuronspecifikus enoláz genetikai markerek jelenléte igazolta. Végül 40-101 x 106 autológ tenyésztett MSC-t és 2,7-8,0 x 106 autológ neuroindukált MSC-t gyűjtöttünk össze, 5% autológ vérszérumot tartalmazó sóoldatban reszuszpendáltuk, majd az életképesség mérését követően (98% sejtek) átvittük. a klinikai központba.

A vizsgálati csoportba tartozó betegek egy lassan (5-10 perc alatt) intravénás injekciót kaptak ex vivo expandált autológ MSC-ből 20 ml térfogatban, majd 5-7 nappal később a vizsgálati csoport minden betege további lassan beadott injekciót kapott. A neuroindukált MSC-k endolumbalális injekciója 5 ml térfogatban. Mind az MSC-injekciókra adott kedvezőtlen reakciókat (az eljárások elvégzését követő egy napon túl), mind a korai (legfeljebb egy hónapig) és a késői (legfeljebb 6 hónapig) klinikai hatásokat, beleértve a szövődményeket, értékelték. Az MSC-injekciókra adott kedvezőtlen reakciók közé tartozott a helyi fájdalom vagy vérzés az injekció beadásának helyén, valamint a központi idegrendszer szisztémás reakciói (CNS, azaz hipertermia, fáradtság és izomfájdalom). A későbbiekben megvizsgálták a központi idegrendszer és az érrendszer esetleges kedvezőtlen szisztémás reakcióit, beleértve a kontrollálandó betegség progressziójának fertőző és nem fertőző szövődményeit is. Minden eseményt orvosi kártyán dokumentáltak. Azokban az esetekben, amikor ezek az események veszélyes jellemzőket mutattak, a megfigyelőbizottság (a központ etikai bizottsága) tagjainak bejelentették a betegek vizsgálatból való kizárásának vagy a klinikai vizsgálat befejezésének értékelése céljából.

Szintén értékelték az MSC-alapú terápia lehetséges jótékony hatásait a vizsgált csoportban. Ezeket a hatásokat a kiválasztott terápiás időpontokban (azaz 3 és 12 hónappal az MSC-alapú terápia alkalmazása után) végzett klinikai megfigyelésekkel, valamint a terápia előtt és egy évvel azután végzett elektroencefalográfiás mérésekkel mutatták ki. A betegség progressziójában bekövetkező lehetséges változások meghatározásához a kognitív károsodás jeleit, a viselkedési zavarokat, valamint a rohamok jellemzőiben és gyakoriságában bekövetkezett változásokat értékelték. A kognitív károsodás értékelésére a Mini mentális állapotvizsgálatot alkalmaztuk. A betegségek mindennapi életre gyakorolt ​​akadályozó hatását az epilepsziás szubjektív fogyatékosság skála segítségével értékelték. Az állapotszorongást és a depressziót a Kórházi szorongás és depresszió skála segítségével értékelték. A rohamok jellemzőiben és gyakoriságában bekövetkezett változásokat az Országos Kórházi rohamok súlyossági skála segítségével értékelték. Az akaratlagos figyelem és teljesítmény folyamatait Schulte-táblázatokkal tanulmányozták Kraepelin módszerei szerint. Schulte táblázatokat használtunk a szenzomotoros reakcióidők, valamint a figyelem eloszlásának és stabilitásának tanulmányozására. Az "Account of Kraepelin" módszert az egészség, a fáradtság és a figyelem stabilitásának vizsgálatára használták. A rövid távú memória értékelése 10 szó memorizálásának módszerével történt; ennek a módszernek az a célja, hogy meghatározza az orális-aurális memória mennyiségét és sebességét.

A betegség monitorozására használt fő klinikai jellemzők az „igen” vagy „nem” válaszok voltak (a terápiát illetően), a rohamok gyakorisága (havonta) és a betegség korai (3 hónapos) és késői (12 hónapos vagy több) időpontjában bekövetkezett remissziója. pontok a terápia után. A terápiára adott részleges válaszok értékeléséhez azon betegek számát értékelték, akiknél a rohamok gyakorisága 50%-kal csökkent. A roham típusát (azaz generalizált tónusos-klónusos, részleges komplex, egyszerű részleges és többféle roham) is értékelték, valamint a rohamtípus változásait a kezelés során.

Az elektroenkefalográfiás felvételeket a felvételkor és a megfigyelési időszak alatt Mizar EEG 201 encephalográfiai rendszerrel végeztük, biopotenciál regisztrálással 16 testpontról a „10-20” séma szerint. A megfigyelt elektromos alfa-, béta-, théta- és delta-hullámokat 3 perces szegmensekben elemezték (további újraszámítással minden 1 perces szegmensre) az MSC alkalmazása előtt (bevételkor) és 1 évvel az MSC alkalmazása után. Kiszámoltuk az alfa hullámok csúcsfrekvenciáját is. Mind a spontán, mind a terhelési szonda utáni állapotot (hiperventiláció és fotostimuláció) minden betegnél értékeltük. Az elektroencefalográfiák (EEG) jellemzőit lokális és diffúz kérgi elváltozásoknak tulajdonították. Értékeltük a paroxizmalitási indexet, az epileptiform hullámok percenkénti lokális és generalizált tüskéinek mennyiségét, az EEG-aktivitás csúcsfrekvenciáját, a lassú aktivitás indexét és az EEG-patológiai jelek összesített pontjait. Az epileptiform aktivitású EEG-k tüskéket, tüskés-lassú hullámokat és nagy amplitúdójú tüskéket tartalmaztak. Az EEG felvételeket standard és kiegészítõleg javasolt kritériumok alapján végeztük. Valamennyi értékelést a kontroll és a vizsgálati csoportok pt-jeire végeztük, és a kapott adatokat összehasonlítva meghatároztuk a kiegészítőleg elvégzett MSC-alapú terápia miatti potenciális különbségeket. A beteg terápiáját bármikor megszakították, ha az MSC-injekciókra azonnali kedvezőtlen reakciókat észleltek. A betegek végső megfigyelései közé tartozott az MSC-alapú terápia alkalmazását követő 12 (vagy több) hónapos klinikai és EEG-értékelés. A kontroll- és vizsgálati csoportban lévő pt-k összesített adatait egy elektronikus adatbázisban gyűjtöttük össze további elemzések és értelmezések céljából.