Sécurité de la perfusion autologue de MSC pour traiter l'épilepsie (AMSCDRSE)

L'objectif principal de cet essai clinique de phase 1 était d'évaluer l'innocuité d'une application de cellules souches mésenchymateuses (CSM) autologues comme traitement de l'épilepsie symptomatique résistante aux médicaments dans une étude monocentrique. Il est bien connu que l'épilepsie symptomatique résistante aux médicaments est un trouble dramatiquement invalidant pour lequel les thérapies stationnaires et ambulatoires appliquées n'ont aucun effet clinique réel. Par conséquent, de nouvelles approches sont nécessaires pour atteindre la rémission, arrêter la progression de la maladie et améliorer la qualité de vie des patients. Pour cette étude, des patients adultes (18-60 ans) (pts) des deux sexes souffrant d'épilepsie symptomatique résistante aux médicaments avec des crises fréquentes (> 5 événements par mois) ont été inclus dans l'étude. La pharmacorésistance a été définie par l'absence de toute réponse clinique évidente (c'est-à-dire aucune diminution de la fréquence des crises ou réduction de la progression de la maladie) des patients atteints d'épilepsie symptomatique à la carbamazépine, à l'acide valproïque, au topiramate, à la lamotrigine ou au phénobarbital (c'est-à-dire anti- épileptiques [DEA]) en monothérapie et dans différentes combinaisons au cours de l'année civile précédente. Les critères d'exclusion étaient le refus du patient de participer, les réactions défavorables au traitement, les états inflammatoires du SNC, les psychoses chroniques, les tumeurs du SNC, les rechutes de maladies somatiques ou neurologiques chroniques et la positivité sanguine pour l'hépatite B ou C ou le VIH. Le plan comprenait l'inclusion de 30 pts dans le groupe d'étude et 30 pts dans le groupe témoin sur une période de 5 ans. Les patients ont été randomisés pour recevoir un traitement standard avec des DEA (groupe témoin) ou des DEA plus des cellules souches mésenchymateuses autologues (CSM, groupe d'étude). Les CSM ont été obtenues à partir d'échantillons de moelle osseuse du même patient et ont été purifiées et expansées ex vivo dans un laboratoire spécialisé en biotechnologie cellulaire. Les MSC ont été caractérisées par immunophénotypage en tant que cellules CD90 + CD105 + CD45-CD34. Après 3 semaines de culture in vitro, une partie des MSC ont été en outre cultivées pendant 7 jours dans du milieu de prolifération Neurocult-XF pour obtenir des MSC neuro-induites. La neuroinduction a été prouvée par la présence des marqueurs génétiques nestine et énolase spécifique des neurones. Enfin, 40-101 x 106 MSC cultivées autologues et 2,7 - 8,0 x 106 MSC autologues neuroinduites ont été récoltées, remises en suspension dans une solution saline contenant 5 % de sérum sanguin autologue pour injection et, après une mesure de la viabilité (98 % de cellules), transférées au centre clinique.

Les patients du groupe d'étude ont reçu une injection intraveineuse lente (sur 5 à 10 minutes) de CSM autologues expansés ex vivo dans un volume de 20 ml, et 5 à 7 jours plus tard, chaque patient du groupe d'étude a reçu une autre injection lente injection endolombale des CSM neuroinduites dans un volume de 5 ml. Les réactions défavorables aux injections de MSC (plus d'un jour après la réalisation des procédures) et les effets cliniques précoces (jusqu'à un mois) et tardifs (jusqu'à 6 mois), y compris les complications, ont été évalués. Les réactions défavorables aux injections de MSC comprenaient une douleur locale ou une hémorragie au site d'injection et des réactions systémiques du système nerveux central (SNC, c'est-à-dire hyperthermie, fatigue et myalgie). Plus tard, les réactions systémiques défavorables potentielles du SNC et du système vasculaire, y compris les complications infectieuses et non infectieuses de la progression de la maladie à contrôler, ont été examinées. Tous les événements ont été documentés dans des fiches médicales. Dans les cas où ces événements présentaient des caractéristiques dangereuses, ils étaient déclarés aux membres du comité de surveillance (comité d'éthique du centre) pour l'évaluation de l'exclusion des patients de l'étude ou l'arrêt de l'étude clinique.

Les effets bénéfiques possibles de la thérapie à base de CSM chez les patients du groupe d'étude ont également été évalués. Ces effets ont été détectés par des observations cliniques à des moments de thérapie sélectionnés (c'est-à-dire 3 et 12 mois après l'application de la thérapie à base de MSC) et des mesures d'électroencéphalographie avant et un an après la thérapie. Pour déterminer les changements possibles dans la progression de la maladie, les signes de déficience cognitive, les troubles du comportement et les changements dans les caractéristiques et la fréquence des crises ont été évalués. Pour l'évaluation des troubles cognitifs, nous avons utilisé le Mini-Mental State Examination. L'effet handicapant de la maladie sur la vie quotidienne a été évalué à l'aide de l'échelle de handicap subjectif de l'épilepsie. L'état d'anxiété et de dépression a été évalué à l'aide de l'échelle d'anxiété et de dépression de l'hôpital. Les changements dans les caractéristiques et la fréquence des crises ont été évalués à l'aide de l'échelle nationale hospitalière de gravité des crises. Les processus d'attention volontaire et de performance ont été étudiés avec des tables de Schulte selon les méthodes de Kraepelin. Des tables de Schulte ont été utilisées pour étudier les temps de réaction sensorimotrice ainsi que la distribution et la stabilité de l'attention. La méthode "Account of Kraepelin" a été utilisée pour étudier la santé, la fatigue et la stabilité de l'attention. L'évaluation de la mémoire à court terme a été réalisée via la méthode de mémorisation de 10 mots ; cette méthode vise à déterminer le volume et la vitesse de la mémoire orale-auriculaire.

Les principales caractéristiques cliniques utilisées pour le suivi de la maladie étaient les réponses « oui » ou « non » (concernant le traitement), la fréquence des crises (par mois) et la rémission de la maladie au début (3 mois) et à la fin (12 mois et plus). points après la thérapie. Pour évaluer les réponses partielles au traitement, le nombre de pts qui présentaient des réductions de 50 % de la fréquence des crises a été évalué. Le type de crise (c'est-à-dire les crises généralisées tonico-cloniques, complexes partielles, partielles simples et multiples) a également été évalué ainsi que les changements de type de crise au cours du traitement.

Des enregistrements d'électroencéphalographie ont été effectués à l'admission et tout au long de la période de surveillance à l'aide d'un système d'encéphalographie Mizar EEG 201 avec enregistrement du biopotentiel à partir de 16 points corporels selon le schéma "10-20". Les ondes électriques alpha, bêta, thêta et delta observées ont été analysées en segments de 3 minutes (avec un recalcul supplémentaire pour chaque segment de 1 minute) avant (à l'admission) et 1 an après l'application du MSC. La fréquence maximale des ondes alpha a également été calculée. L'état spontané et l'état après la sonde de chargement (hyperventilation et photostimulation) ont été évalués pour chaque patient. Les caractéristiques des électroencéphalographies (EEG) ont été attribuées à des altérations corticales locales et diffuses. Nous avons évalué l'indice de paroxysmalité, les quantités de pics locaux et généralisés d'ondes épileptiformes par minute, la fréquence maximale d'activité EEG, l'indice d'activité lente et les points résumés des signes de pathologie EEG. Les EEG à activité épileptiforme comprenaient des pointes, des ondes lentes à pointes et des pointes de grande amplitude. Les enregistrements EEG ont été effectués sur la base de critères standard et proposés en plus. Toutes les évaluations ont été effectuées pour les patients des groupes de contrôle et d'étude, et les données obtenues ont été comparées pour déterminer les différences potentielles dues à la thérapie à base de MSC effectuée en plus. Le traitement d'un patient était interrompu à tout moment si des réactions défavorables immédiates aux injections de MSC étaient observées. Les observations finales des patients comprenaient des évaluations cliniques et EEG à 12 mois (ou plus) après l'application de la thérapie à base de MSC. Les données résumées pour les pts dans les groupes de contrôle et d'étude ont été collectées dans une base de données électronique pour une analyse et des interprétations plus poussées.