Sikkerhet ved autolog MSC-infusjon for å behandle epilepsi (AMSCDRSE)

Hovedmålet med denne fase 1 kliniske studien var å evaluere sikkerheten til en autolog mesenkymal stamcelle (MSC)-applikasjon som terapi for medikamentresistent symptomatisk epilepsi i en ettsenterstudie. Det er velkjent at medikamentresistent symptomatisk epilepsi er en dramatisk invaliderende lidelse der anvendt stasjonær og poliklinisk behandling ikke har noen reell klinisk effekt. Derfor er det nødvendig med nye tilnærminger for å nå remisjon, stoppe sykdomsprogresjon og øke pasientens livskvalitet. For denne studien ble voksne (18-60 år gamle) pasienter (pts) av begge kjønn som led av medikamentresistent symptomatisk epilepsi med hyppige (>5 hendelser per måned) anfall inkludert i studien. Medikamentresistens ble definert av mangel på noen tydelig klinisk respons (dvs. ingen reduksjon i anfallsfrekvens eller reduksjon i sykdomsprogresjon) av pts med symptomatisk epilepsi overfor karbamazepin, valproinsyre, topiramat, lamotrigin eller fenobarbital (dvs. anti- epileptiske legemidler[AED]) som monoterapi og i forskjellige kombinasjoner i løpet av det foregående kalenderåret. Kriteriene for eksklusjon var pasientnektelse, ugunstige reaksjoner på terapi, CNS-inflammatoriske tilstander, kroniske psykoser, CNS-svulster, tilbakefall av kroniske somatiske eller nevrologiske sykdommer og blodpositivitet for hepatitt B eller C eller HIV. Planen inkluderte inkludering av 30 poeng i studiegruppen og 30 poeng i kontrollgruppen over en periode på 5 år. Pktene ble randomisert til standardbehandling med AED (kontrollgruppe) eller AED pluss autologe mesenkymale stamceller (MSC, studiegruppe). MSC-ene ble hentet fra benmargsprøver fra samme pasient og ble renset og utvidet ex vivo i et spesialisert cellulært bioteknologilaboratorium. MSC-ene ble karakterisert ved immunfenotyping som CD90+CD105+CD45-CD34-celler. Etter 3 ukers dyrking in vitro ble en del av MSC i tillegg dyrket i 7 dager i Neurocult-XF-proliferasjonsmedium for å oppnå nevroinduserte MSC-er. Nevroinduksjon ble bevist ved tilstedeværelsen av de genetiske markørene nestin og nevronspesifikk enolase. Til slutt ble 40-101 x 106 autologe dyrkede MSC-er og 2,7 - 8,0 x 106 autologe nevroinduserte MSC-er høstet, resuspendert i saltvannsoppløsning inneholdende 5 % autologt blodserum for injeksjon, og etter en måling av levedyktigheten (98 % celler), overført til det kliniske senteret.

Pktene i studiegruppen fikk en sakte levert (over 5-10 minutter) intravenøs injeksjon av ex vivo utvidede autologe MSC-er i et volum på 20 ml, og 5-7 dager senere fikk hver pasient i studiegruppen ytterligere en sakte levert endolumbal injeksjon av de nevroinduserte MSC-ene i et volum på 5 ml. Både ugunstige reaksjoner på MSC-injeksjonene (over én dag etter utførelse av prosedyrene) og de tidlige (opptil én måned) og sene (opptil 6 måneder) kliniske effektene, inkludert komplikasjoner, ble evaluert. Ugunstige reaksjoner på MSC-injeksjonene inkluderte lokal smerte eller blødning på injeksjonsstedet og systemiske reaksjoner i sentralnervesystemet (CNS, dvs. hypertermi, tretthet og myalgi). Senere ble potensielle ugunstige systemiske reaksjoner av CNS og vaskulært system, inkludert infeksiøse og ikke-infeksiøse komplikasjoner av utviklingen av sykdommen som skulle kontrolleres, undersøkt. Alle hendelsene ble dokumentert i medisinske kort. I tilfeller hvor disse hendelsene viste farlige egenskaper, ble de erklært for medlemmer av overvåkingsstyret (senterets etiske komité) for evaluering av ekskludering av pasienter fra studien eller avslutning av den kliniske studien.

De mulige fordelaktige effektene av MSC-basert terapi ble også evaluert i studiegruppens pt. Disse effektene ble oppdaget via kliniske observasjoner ved utvalgte behandlingstidspunkter (dvs. 3 og 12 måneder etter påføring av den MSC-baserte behandlingen) og elektroencefalografimålinger før og ett år etter behandlingen. For å bestemme mulige endringer i sykdomsprogresjon, ble tegn på kognitiv svikt, atferdsforstyrrelser og endringer i anfallskarakteristikker og -frekvens evaluert. For evaluering av kognitiv svikt brukte vi Mini-Mental State Examination. Sykdommens funksjonshemmende effekt på dagliglivet var å skåre ved å bruke Subjective Handicap of Epilepsy Scale. Tilstandsangst og depresjon ble evaluert ved hjelp av sykehusangst- og depresjonsskalaen. Endringer i anfallskarakteristikker og frekvens ble evaluert ved hjelp av National Hospital Scale of Seizure Severity. Prosessene med frivillig oppmerksomhet og ytelse ble studert med Schulte-tabeller i henhold til metodene til Kraepelin. Schulte-tabeller ble brukt til å studere sensorimotoriske reaksjonstider og fordelingen og stabiliteten av oppmerksomhet. "Account of Kraepelin"-metoden ble brukt for å studere helse, tretthet og stabiliteten til oppmerksomhet. Vurderingen av korttidshukommelsen ble utført via metoden med å memorere 10 ord; denne metoden tar sikte på å bestemme volumet og hastigheten til oral-aural minne.

De viktigste kliniske egenskapene som brukes til sykdomsovervåking var "ja" eller "nei"-svar (angående terapi), anfallsfrekvens (per måned) og remisjon av sykdom på tidlig (3 måneder) og sent (12 måneder og mer) tidspunkt poeng etter terapi. For å evaluere partielle responser på terapi, ble antallet pkt som viste 50 % reduksjon i anfallsfrekvens vurdert. Anfallstype (dvs. generalisert tonisk-klonisk, delvis kompleks, enkle delvise og flere typer anfall) ble også evaluert sammen med endringer i anfallstype under behandlingsforløpet.

Elektroencefalografiregistreringer ble utført ved innleggelse og over overvåkingsperioden ved bruk av et Mizar EEG 201 encefalografisystem med biopotensialregistrering fra 16 kroppspunkter i henhold til "10-20"-skjemaet. De observerte elektriske alfa-, beta-, theta- og deltabølgene ble analysert i 3-minutters segmenter (med ytterligere omberegning for hvert 1-minutters segment) før (ved innleggelse) og 1 år etter MSC-applikasjon. Toppfrekvensen til alfabølgene ble også beregnet. Både den spontane tilstanden og tilstanden etter belastningssonden (hyperventilasjon og fotostimulering) ble evaluert for hver pasient. Egenskapene til elektroencefalografiene (EEG) ble tilskrevet lokale og diffuse kortikale endringer. Vi evaluerte paroksysmalitetsindeksen, mengder lokale og generaliserte pigger av epileptiforme bølger per minutt, toppfrekvens for EEG-aktivitet, indeks for langsom aktivitet og oppsummerte punkter av EEG-patologitegn. EEG med epileptiform aktivitet inkluderte pigger, pigg-langsomme bølger og høyamplitude pigger. EEG-registreringene ble utført basert på standard og i tillegg foreslåtte kriterier. Alle vurderingene ble utført for punktene i kontroll- og studiegruppene, og de oppnådde dataene ble sammenlignet for å bestemme potensielle forskjeller på grunn av den i tillegg utførte MSC-baserte behandlingen. En pasients behandling ble avsluttet når som helst hvis umiddelbare ugunstige reaksjoner på MSC-injeksjonene ble observert. De siste observasjonene av pasientene inkluderte kliniske og EEG-vurderinger 12 måneder (eller mer) etter påføring av den MSC-baserte behandlingen. De oppsummerte dataene for pktene i kontroll- og studiegruppene ble samlet i en elektronisk database for videre analyse og tolkninger.