Caracterización de Vesículas Extracelulares de la Sangre del Cordón Umbilical de Recién Nacidos Extremadamente Prematuros y su Correlación con la Morbilidad y Mortalidad Severas (VEEP)

Recién Nacidos de Edad Gestacional Extremadamente Baja sin morbilidad o mortalidad severa

Recién nacidos con Edad Gestacional Extremadamente Baja (ELGAN) nacidos en el Hospital Montpellier antes de las 28 semanas de gestación, que fueron ingresados en la unidad neonatal, a quienes se les recolectó sangre del cordón umbilical al nacer y que no experimentaron morbilidad grave (shock temprano, hemorragia intraventricular o hemorragia pulmonar) ni fallecieron antes del alta.

Biológico: Muestra de sangre del cordón umbilical venosa

Se recogerá una muestra de sangre venosa del cordón umbilical en el momento del nacimiento (10 mL; si no es posible, un mínimo de 3 mL) de la vena umbilical en un tubo EDTA. El plasma se aisló de las células sanguíneas mediante dos pasos de centrifugación. Posteriormente, se aislaron vesículas extracelulares (VE) del plasma utilizando pasos adicionales de centrifugación y ultracentrifugación. Las VE se dimensionaron y contaron utilizando un Zetasizer, y su origen celular se caracterizó mediante nanocitometría.

Otros nombres:

• Extracción y caracterización de EVs
• Centrifugación de sangre

Biológico: Muestra de sangre arterial del cordón umbilical

Se recogerá una muestra de sangre arterial del cordón umbilical al nacer (10 mL; si no es posible, un mínimo de 3 mL) de la vena umbilical en un tubo de EDTA para las cinco primeras inclusiones (éxito). El plasma se aisló de las células sanguíneas mediante dos pasos de centrifugación. Los vesículas extracelulares (VE) se aislaron luego del plasma utilizando pasos adicionales de centrifugación y ultracentrifugación. Las VE se dimensionaron y contaron utilizando un Zetasizer, y su origen celular se caracterizó mediante nanocitometría.

Otros nombres:

• Extracción y caracterización de EVs
• Centrifugación de sangre

Recién nacidos de Edad Gestacional Extremadamente Baja con morbilidad grave o mortalidad

Recién nacidos de Edad Gestacional Extremadamente Baja (ELGAN) nacidos en el Hospital de Montpellier antes de las 28 semanas de gestación, que fueron ingresados en la unidad neonatal, a quienes se les recogió sangre del cordón umbilical al nacer y que experimentaron morbilidad grave (shock temprano, hemorragia intraventricular o hemorragia pulmonar) o muerte antes del alta.

Biológico: Muestra de sangre del cordón umbilical venosa

Se recogerá una muestra de sangre venosa del cordón umbilical en el momento del nacimiento (10 mL; si no es posible, un mínimo de 3 mL) de la vena umbilical en un tubo EDTA. El plasma se aisló de las células sanguíneas mediante dos pasos de centrifugación. Posteriormente, se aislaron vesículas extracelulares (VE) del plasma utilizando pasos adicionales de centrifugación y ultracentrifugación. Las VE se dimensionaron y contaron utilizando un Zetasizer, y su origen celular se caracterizó mediante nanocitometría.

Otros nombres:

• Extracción y caracterización de EVs
• Centrifugación de sangre

Biológico: Muestra de sangre arterial del cordón umbilical

Se recogerá una muestra de sangre arterial del cordón umbilical al nacer (10 mL; si no es posible, un mínimo de 3 mL) de la vena umbilical en un tubo de EDTA para las cinco primeras inclusiones (éxito). El plasma se aisló de las células sanguíneas mediante dos pasos de centrifugación. Los vesículas extracelulares (VE) se aislaron luego del plasma utilizando pasos adicionales de centrifugación y ultracentrifugación. Las VE se dimensionaron y contaron utilizando un Zetasizer, y su origen celular se caracterizó mediante nanocitometría.

Otros nombres:

• Extracción y caracterización de EVs
• Centrifugación de sangre

Correlación entre la aparición de morbilidad/mortalidad grave temprana y la caracterización de vesículas extracelulares (VE)

El resultado principal es la correlación entre la aparición de morbilidad mortalidad severa temprana y la caracterización de vesículas extracelulares (EVs) para el plasma de sangre venosa del cordón umbilical:

1. Las vesículas extracelulares se aislaron del plasma de sangre venosa del cordón umbilical mediante centrifugación secuencial y ultracentrifugación. Luego se caracterizaron por tamaño (nm) y concentración (EVs/µL) usando un Zetasizer, y su origen celular se determinó mediante nanocitometría.

2. La morbilidad severa temprana o mortalidad durante la estancia hospitalaria se define como la aparición de al menos uno de los siguientes eventos:

   • Shock refractario (que requiere reanimación con fluidos o soporte vasopresor)
   • Hemorragia pulmonar
   • Hemorragia intraventricular severa (grado 3 o 4, clasificación de Papille)
   • Muerte antes del alta

Correlación entre la aparición de otras morbilidades antes del alta y la caracterización de los VE

Este resultado secundario explorará la correlación entre la caracterización de vesículas extracelulares (VE) del cordón umbilical venoso, tal como se define en el resultado principal, y la aparición de otras morbilidades antes del alta, definidas como:

• Enterocolitis necrotizante
• Displasia broncopulmonar
• Otras condiciones significativas

Correlación entre características obstétricas y causas de prematuridad y caracterización de vesículas extracelulares del cordón umbilical venoso.

Este resultado secundario explorará la correlación entre la caracterización de las vesículas extracelulares (VE) del cordón umbilical venoso, tal como se define en el resultado principal, y las características obstétricas y las causas de la prematuridad

Comparación de Vesículas Extracelulares Arteriales y Venosas

Para las primeras cinco inclusiones, también se recogerá una muestra de sangre arterial. Las vesículas extracelulares (VE) de la sangre arterial y venosa del cordón umbilical se caracterizarán en cuanto a tamaño, concentración y origen celular utilizando los mismos métodos descritos para el resultado principal.

A continuación, se compararán las características de las VE arteriales y venosas.