Caratterizzazione delle Vescicole Extracellulari del Sangue del Cordone Ombelicale dei Neonati Estremamente Prematuri e la Loro Correlazione con Morbilità e Mortalità Grave (VEEP)

Neonati con età gestazionale estremamente bassa senza morbilità o mortalità grave

Neonati con età gestazionale estremamente bassa (ELGAN) nati all'Ospedale di Montpellier prima delle 28 settimane di gestazione, che sono stati ricoverati nell'unità neonatale, a cui è stato prelevato sangue cordonale alla nascita e che non hanno presentato grave morbilità (shock precoce, emorragia intraventricolare o emorragia polmonare) o morte prima della dimissione.

Biologico: Campione di sangue cordonale venoso

Il campione di sangue cordonale venoso sarà prelevato alla nascita (10 mL; se non possibile, un minimo di 3 mL) dalla vena ombelicale in una provetta con EDTA. Il plasma è stato isolato dalle cellule sanguigne mediante due passaggi di centrifugazione. I vescicoli extracellulari (EV) sono stati quindi isolati dal plasma utilizzando ulteriori passaggi di centrifugazione e ultracentrifugazione. Le dimensioni e il conteggio degli EV sono stati determinati utilizzando uno Zetasizer, e la loro origine cellulare è stata caratterizzata mediante nanocitometria.

Altri nomi:

• Estrazione e caratterizzazione di EV
• Centrifugazione del sangue

Biologico: Campione di sangue del cordone arterioso

Il campione di sangue cordonale arterioso sarà prelevato alla nascita (10 mL; se non possibile, un minimo di 3 mL) dalla vena ombelicale in una provetta con EDTA per le prime cinque inclusioni (successive). Il plasma è stato isolato dalle cellule del sangue mediante due passaggi di centrifugazione. Le vescicole extracellulari (EV) sono state quindi isolate dal plasma utilizzando ulteriori passaggi di centrifugazione e ultracentrifugazione. Le dimensioni e il numero delle EV sono stati determinati utilizzando uno Zetasizer e la loro origine cellulare è stata caratterizzata mediante nanocitometria.

Altri nomi:

• Estrazione e caratterizzazione di EV
• Centrifugazione del sangue

Neonati con età gestazionale estremamente bassa con grave morbilità o mortalità

Neonati di età gestazionale estremamente bassa (ELGAN) nati all'Ospedale di Montpellier prima delle 28 settimane di gestazione, che sono stati ricoverati nell'unità neonatale, hanno avuto il sangue del cordone raccolto alla nascita e hanno sperimentato grave morbilità (shock precoce, emorragia intraventricolare o emorragia polmonare) o decesso prima della dimissione.

Biologico: Campione di sangue cordonale venoso

Il campione di sangue cordonale venoso sarà prelevato alla nascita (10 mL; se non possibile, un minimo di 3 mL) dalla vena ombelicale in una provetta con EDTA. Il plasma è stato isolato dalle cellule sanguigne mediante due passaggi di centrifugazione. I vescicoli extracellulari (EV) sono stati quindi isolati dal plasma utilizzando ulteriori passaggi di centrifugazione e ultracentrifugazione. Le dimensioni e il conteggio degli EV sono stati determinati utilizzando uno Zetasizer, e la loro origine cellulare è stata caratterizzata mediante nanocitometria.

Altri nomi:

• Estrazione e caratterizzazione di EV
• Centrifugazione del sangue

Biologico: Campione di sangue del cordone arterioso

Il campione di sangue cordonale arterioso sarà prelevato alla nascita (10 mL; se non possibile, un minimo di 3 mL) dalla vena ombelicale in una provetta con EDTA per le prime cinque inclusioni (successive). Il plasma è stato isolato dalle cellule del sangue mediante due passaggi di centrifugazione. Le vescicole extracellulari (EV) sono state quindi isolate dal plasma utilizzando ulteriori passaggi di centrifugazione e ultracentrifugazione. Le dimensioni e il numero delle EV sono stati determinati utilizzando uno Zetasizer e la loro origine cellulare è stata caratterizzata mediante nanocitometria.

Altri nomi:

• Estrazione e caratterizzazione di EV
• Centrifugazione del sangue

Correlazione tra occorrenza di morbilità e mortalità grave precoce e caratterizzazione delle vescicole extracellulari (EV)

L'esito primario è la correlazione tra l'insorgenza di morbidità/mortalità grave precoce e la caratterizzazione delle vescicole extracellulari (EV) del plasma del sangue venoso del cordone ombelicale:

1. Le EV sono state isolate dal plasma del sangue venoso del cordone ombelicale mediante centrifugazione sequenziale e ultracentrifugazione. Le EV sono state poi caratterizzate per dimensioni (nm) e concentrazione (EV/µL) utilizzando uno Zetasizer, e la loro origine cellulare è stata determinata mediante nanocitometria.

2. La morbidità grave precoce o la mortalità durante il ricovero ospedaliero è definita come il verificarsi di almeno uno dei seguenti eventi:

   • Shock refrattario (che richiede rianimazione con fluidi o supporto vasopressore)
   • Emorragia polmonare
   • Grave emorragia intraventricolare (grado 3 o 4, classificazione di Papille)
   • Morte prima della dimissione

Correlazione tra l'occorrenza di altre morbidità prima della dimissione e la caratterizzazione degli EV

Questo esito secondario esplorerà la correlazione tra la caratterizzazione delle vescicole extracellulari (EV) del sangue cordonale venoso, come definito nell'esito primario, e l'insorgenza di altre morbidità prima della dimissione, definite come:

• Enterocolite necrotizzante
• Displasia broncopolmonare
• Altre condizioni significative

Correlazione tra caratteristiche ostetriche e cause di prematurità e caratterizzazione di EV del sangue cordonale venoso.

Questo outcome secondario esplorerà la correlazione tra la caratterizzazione delle vescicole extracellulari (EV) del sangue cordonale venoso, come definito nell'outcome primario, e le caratteristiche ostetriche e le cause di prematurità

Confronto delle vescicole extracellulari arteriose e venose

Per le prime cinque inclusioni, verrà inoltre prelevato un campione di sangue arterioso. Le vescicole extracellulari (EV) del sangue arterioso e venoso del cordone ombelicale verranno caratterizzate per dimensioni, concentrazione e origine cellulare utilizzando gli stessi metodi descritti per l'esito primario.

Le caratteristiche delle EV arteriose e venose verranno quindi confrontate.