Caracterização de Vesículas Extracelulares do Sangue do Cordão Umbilical de Recém-Nascidos Extremamente Pré-Termo e sua Correlação com Morbilidade e Mortalidade Severas (VEEP)

Recém-nascidos de Idade Gestacional Extremamente Baixa sem morbidade ou mortalidade graves

Recém-nascidos de Idade Gestacional Extremamente Baixa (ELGANs) nascidos no Hospital Montpellier antes das 28 semanas de gestação, que foram internados na unidade neonatal, tiveram sangue do cordão umbilical recolhido no nascimento e não sofreram de morbilidade grave (choque precoce, hemorragia intraventricular ou hemorragia pulmonar) ou morte antes da alta.

Biológico: Amostra de sangue do cordão venoso

A amostra de sangue venoso do cordão umbilical será recolhida no momento do nascimento (10 mL; se não for possível, um mínimo de 3 mL) da veia umbilical para um tubo de EDTA. O plasma foi isolado das células sanguíneas através de duas etapas de centrifugação. As vesículas extracelulares (VE) foram então isoladas do plasma utilizando etapas adicionais de centrifugação e ultracentrifugação. As VE foram dimensionadas e contadas usando um Zetasizer, e a sua origem celular foi caracterizada por nanocitometria.

Outros nomes:

• Extração e caracterização de EVs
• Centrifugação de sangue

Biológico: Amostra de sangue arterial do cordão umbilical

Será recolhida uma amostra de sangue arterial do cordão umbilical no momento do nascimento (10 mL; se não for possível, um mínimo de 3 mL) da veia umbilical para um tubo EDTA para as primeiras cinco inclusões (bem-sucedidas). O plasma foi isolado das células sanguíneas através de duas etapas de centrifugação. As vesículas extracelulares (EVs) foram então isoladas do plasma utilizando etapas adicionais de centrifugação e ultracentrifugação. As EVs foram dimensionadas e contadas utilizando um Zetasizer, e a sua origem celular foi caracterizada por nanocitometria.

Outros nomes:

• Extração e caracterização de EVs
• Centrifugação de sangue

Recém-nascidos de Idade Gestacional Extremamente Baixa com morbidade grave ou mortalidade

Recém-nascidos de Idade Gestacional Extremamente Baixa (ELGANs) nascidos no Hospital de Montpellier antes das 28 semanas de gestação, que foram admitidos na unidade neonatal, tiveram sangue do cordão umbilical recolhido ao nascimento e sofreram de morbidade grave (choque precoce, hemorragia intraventricular ou hemorragia pulmonar) ou morreram antes da alta.

Biológico: Amostra de sangue do cordão venoso

A amostra de sangue venoso do cordão umbilical será recolhida no momento do nascimento (10 mL; se não for possível, um mínimo de 3 mL) da veia umbilical para um tubo de EDTA. O plasma foi isolado das células sanguíneas através de duas etapas de centrifugação. As vesículas extracelulares (VE) foram então isoladas do plasma utilizando etapas adicionais de centrifugação e ultracentrifugação. As VE foram dimensionadas e contadas usando um Zetasizer, e a sua origem celular foi caracterizada por nanocitometria.

Outros nomes:

• Extração e caracterização de EVs
• Centrifugação de sangue

Biológico: Amostra de sangue arterial do cordão umbilical

Será recolhida uma amostra de sangue arterial do cordão umbilical no momento do nascimento (10 mL; se não for possível, um mínimo de 3 mL) da veia umbilical para um tubo EDTA para as primeiras cinco inclusões (bem-sucedidas). O plasma foi isolado das células sanguíneas através de duas etapas de centrifugação. As vesículas extracelulares (EVs) foram então isoladas do plasma utilizando etapas adicionais de centrifugação e ultracentrifugação. As EVs foram dimensionadas e contadas utilizando um Zetasizer, e a sua origem celular foi caracterizada por nanocitometria.

Outros nomes:

• Extração e caracterização de EVs
• Centrifugação de sangue

Correlação entre a ocorrência de morbilidade e mortalidade grave precoce e a caracterização de Vesículas Extracelulares (EVs)

O principal resultado é a correlação entre a ocorrência de morbidade severa precoce ou mortalidade e a caracterização de Vesículas Extracelulares (VEs) do plasma de sangue venoso do cordão umbilical:

1. As VEs foram isoladas do plasma de sangue venoso do cordão umbilical utilizando passos de centrifugação sequencial e ultracentrifugação. As VEs foram então caracterizadas quanto ao tamanho (nm) e concentração (VEs/µL) utilizando um Zetasizer, e a sua origem celular foi determinada por nanocitometria.

2. A morbidade severa precoce ou mortalidade durante a estadia hospitalar é definida como a ocorrência de pelo menos um dos seguintes eventos:

   • Choque refractário (que requer ressuscitação com fluidos ou suporte com vasopressores)
   • Hemorragia Pulmonar
   • Hemorragia Intraventricular Severa (grau 3 ou 4, classificação de Papille)
   • Morte antes da alta

Correlação entre a ocorrência de outras morbilidades antes da alta e a caracterização dos EVs

Este resultado secundário irá explorar a correlação entre a caracterização das vesículas extracelulares (VE) do sangue do cordão umbilical venoso, conforme definido no resultado primário, e a ocorrência de outras morbilidades antes da alta, definidas como:

• Enterocolite necrosante
• Displasia broncopulmonar
• Outras condições significativas

Correlação entre características obstétricas e causas da prematuridade e caracterização de EVs do sangue venoso do cordão umbilical.

Este resultado secundário explorará a correlação entre a caracterização das vesículas extracelulares (VEs) do sangue do cordão venoso, conforme definido no resultado primário, e as características obstétricas e as causas da prematuridade

Comparação de Vesículas Extracelulares Arteriais e Venosas

Para as primeiras cinco inclusões, será também recolhida uma amostra de sangue arterial. As vesículas extracelulares (VE) do sangue arterial e venoso do cordão serão caracterizadas quanto ao tamanho, concentração e origem celular utilizando os mesmos métodos descritos para o desfecho primário.

As características das VE arteriais e venosas serão então comparadas.