CYP2C9-aktiivisuus arvioitu yksinkertaisella sormenpistolla

Sytokromi P450 -entsyymit (CYP) ovat tärkein lääkettä metaboloiva entsyymijärjestelmä ihmisillä. Näiden entsyymien aktiivisuuteen ja siten plasman lääkepitoisuuksiin vaikuttaa suuri yksilöiden välinen vaihtelu, mikä johtaa erilaisiin farmakodynaamisiin vaikutuksiin ja vaikutuspuolien esiintymiseen. Ympäristötekijät, ruokavalio, lääkkeet tai genetiikka ovat vastuussa tästä vaihtelusta. Geneettiset tekijät ovat erittäin tärkeitä, koska suurin osa näistä entsyymeistä on erittäin polymorfisia. Esimerkiksi yli 80 CYP2D6-alleelista muunnelmaa on löydetty tähän mennessä ja ne liittyvät entsyymiaktiivisuuden puuttumiseen, vähenemiseen tai lisääntymiseen. Suurin osa polymorfismista havaittiin haittavaikutusten perusteella, jotka ilmenivät ryhmässä tavanomaisten lääkeannosten jälkeen. Niillä potilailla, joilla oli haittavaikutuksia, oli usein heikentynyt kyky metaboloida tiettyjä lääkkeitä. Kliinisessä terapiassa tällä vaihtelulla on merkittäviä seurauksia, mukaan lukien vasteen puute hoitoon ja/tai haittavaikutuksiin. Näiden potentiaalisesti ei-toivottujen tapahtumien vähentämiseksi, jotka mahdollisesti johtavat vakaviin haittavaikutuksiin tai kuolemaan, saattaa siksi olla ratkaisevan tärkeää pystyä arvioimaan näiden entsyymien aktiivisuus yksilötasolla. CYPs-aktiivisuuden arvioimiseen voidaan käyttää kahta lähestymistapaa, genotyyppiä ja fenotyyppiä. Genotyyppi perustuu DNA-analyysiin ja polymorfismin havaitsemiseen. Fenotyyppi koostuu "mallilääkkeen" tai koetinlääkkeen antamisesta, joka metaboloituu spesifisen CYP:n avulla, ja lääkkeen ja sen metaboliitin välisen suhteen määrittämisestä plasmassa tai virtsassa. Fenotyypitysmenetelmien pääasiallinen haittapuoli on virtsan kerääminen yön yli tai vähintään 8 tuntia koetintestin antamisen jälkeen. Tämä toimenpide on erittäin työläs ja aikaa vievä sekä potilaalle että hoitohenkilökunnalle. Testi voidaan tehdä plasmassa tai veressä 1-2 tuntia koettimen annon jälkeen. Tämä toimenpide on kuitenkin invasiivinen ja vaatii suuren määrän verta (6 ml). Äskettäin on kehitetty uusi lähestymistapa kiertävien lääkeainepitoisuuksien kvantitatiiviseen määrittämiseen käyttämällä kuivattuja veripisteitä (DBS) suodatinpaperille, joka on saatu yksinkertaisella sormenpistolla. Koska vaadittava veritilavuus on pieni (noin 10 µL) verrattuna tavanomaiseen näytteenottoon, tämä minimaalisesti invasiivinen menetelmä tarjoaa potilasystävällisen vaihtoehdon verenkeräykselle potilaspopulaatiossa, jossa laskimonäytteenotto on epäeettistä tai mahdotonta (lastenhoito).

Lisäksi DBS-näytteenotto ei vaadi antikoagulanttien käyttöä, plasmaerotusta ja vähentää kosketusta tarttuvan materiaalin kanssa. Lisäksi kuivatut veripisteet voidaan helposti varastoida ja toimittaa analyyttisiin laboratorioihin ilman kylmälaitteita.

Analyyttisten tekniikoiden (massaspektrometrian) uusien kehitysten ansiosta, jotka mahdollistavat kvantitatiivisen analyysin erittäin pienestä veritilavuudesta. DBS-näytteenotto on tehokas työkalu biolääketieteellisiin analyyseihin, erityisesti farmakokineettisissä tutkimuksissa, joissa tarvitaan useita verinäytteitä, ja fenotyyppien määrittämiseen.