Activité CYP2C9 évaluée avec une simple piqûre au doigt

Les enzymes du cytochrome P450 (CYP) sont le principal système enzymatique métabolisant les médicaments chez l'homme. Une grande variabilité inter-individuelle affecte l'activité de ces enzymes et, par conséquent, les concentrations plasmatiques de médicament entraînant différents effets pharmacodynamiques et la survenue d'effets secondaires. Des facteurs environnementaux, alimentaires, médicamenteux ou génétiques sont responsables de cette variabilité. Les facteurs génétiques sont très importants puisque la majorité de ces enzymes sont hautement polymorphes. Par exemple, plus de 80 variants alléliques du CYP2D6 ont été découverts à ce jour et sont associés à l'absence, à une diminution ou à une augmentation de l'activité enzymatique. La plupart des polymorphismes ont été détectés par des effets indésirables survenant dans un groupe au sein de la population après l'administration de doses normales de médicaments. Les patients présentant des effets indésirables avaient souvent une capacité réduite à métaboliser certains médicaments. En thérapeutique clinique, cette variabilité a des conséquences importantes dont l'absence de réponse à un traitement et/ou des effets indésirables médicamenteux. Afin de réduire ces événements potentiellement indésirables pouvant entraîner des réactions indésirables sévères ou la mort, il pourrait donc être d'un intérêt décisif de pouvoir évaluer l'activité de ces enzymes au niveau individuel. Deux approches peuvent être utilisées pour évaluer les activités des CYP, le génotype et le phénotype. Le génotype est basé sur l'analyse de l'ADN et la détection du polymorphisme. Le phénotype consiste en l'administration d'un médicament "modèle" ou d'un médicament sonde métabolisé par un CYP spécifique et en la détermination d'un rapport entre le médicament et son métabolite dans le plasma ou l'urine. Le principal inconvénient des méthodes de phénotypage est la collecte d'urine pendant la nuit ou au moins 8 heures après l'administration du test à la sonde. Cette procédure est très fastidieuse et prend du temps pour le patient ainsi que pour le personnel médical. Le test peut être effectué dans le plasma ou le sang 1 à 2 heures après l'administration de la sonde. Cependant, cette procédure est invasive et nécessite un volume de sang important (6 ml). Récemment, une nouvelle approche a été développée pour la détermination quantitative des concentrations de médicaments circulants à l'aide de gouttes de sang séché (DBS) sur du papier filtre obtenu avec une simple piqûre au doigt. En raison du faible volume de sang requis (environ 10 µL) par rapport à l'échantillonnage conventionnel, cette méthode peu invasive offre une alternative conviviale pour le prélèvement sanguin dans la population de patients où l'échantillonnage veineux est contraire à l'éthique ou impossible (pédiatrie).

De plus, l'échantillonnage DBS ne nécessite pas l'utilisation d'anticoagulant, la séparation du plasma et diminue le contact avec du matériel infectieux. De plus, les gouttes de sang séché peuvent être facilement stockées et expédiées vers des laboratoires d'analyse sans utiliser d'appareils réfrigérés.

Grâce aux nouveaux développements des techniques analytiques (spectrométrie de masse), qui permettent une analyse quantitative à partir de très petits volumes de sang. L'échantillonnage DBS représente un outil puissant pour les analyses biomédicales, en particulier dans les études pharmacocinétiques où plusieurs échantillons de sang sont nécessaires et pour les procédures de phénotypage.