Actividad de CYP2C9 evaluada con un simple pinchazo en el dedo

Las enzimas del citocromo P450 (CYP) son el principal sistema enzimático metabolizador de fármacos en humanos. Una gran variabilidad interindividual afecta la actividad de estas enzimas y, en consecuencia, las concentraciones plasmáticas del fármaco, lo que da como resultado diferentes efectos farmacodinámicos y la aparición de efectos secundarios. Los factores ambientales, la dieta, los fármacos o la genética son los responsables de esta variabilidad. Los factores genéticos son muy importantes ya que la mayoría de estas enzimas son altamente polimórficas. Por ejemplo, hasta el momento se han descubierto más de 80 variantes alélicas de CYP2D6 y están asociadas a la ausencia, disminución o aumento de la actividad enzimática. La mayoría de los polimorfismos fueron detectados por reacciones adversas que ocurrieron en un grupo dentro de la población después de haber administrado dosis normales de medicamentos. Aquellos pacientes que experimentaron reacciones adversas a menudo tenían una capacidad reducida para metabolizar ciertos medicamentos. En la terapia clínica, esta variabilidad tiene consecuencias importantes que incluyen la falta de respuesta a un tratamiento y/o reacciones adversas a medicamentos. Con el fin de reducir estos eventos potencialmente no deseados que posiblemente provoquen reacciones adversas graves o la muerte, podría ser de gran interés poder evaluar la actividad de estas enzimas a nivel individual. Se pueden utilizar dos enfoques para evaluar las actividades de los CYP, el genotipo y el fenotipo. El genotipo se basa en el análisis de ADN y la detección de polimorfismos. El fenotipo consiste en la administración de un fármaco "modelo" o fármaco de prueba metabolizado por un CYP específico y la determinación de una relación entre el fármaco y su metabolito en plasma u orina. El principal inconveniente de los métodos de fenotipado es la recolección de orina durante la noche o al menos 8 horas después de la administración de la prueba de sonda. Este procedimiento es muy tedioso y consume mucho tiempo tanto para el paciente como para el personal médico. La prueba se puede realizar en plasma o sangre 1-2 horas después de la administración de la sonda. Sin embargo, este procedimiento es invasivo y necesita un volumen importante de sangre (6 ml). Recientemente, se ha desarrollado un enfoque novedoso para la determinación cuantitativa de las concentraciones de fármacos circulantes utilizando gotas de sangre seca (DBS) en papel de filtro obtenido con un simple pinchazo en el dedo. Debido al pequeño volumen de sangre requerido (alrededor de 10 µL) en comparación con el muestreo convencional, este método mínimamente invasivo proporciona una alternativa amigable para el paciente para la recolección de sangre en la población de pacientes donde el muestreo venoso es poco ético o imposible (pediatría).

Además, el muestreo de DBS no requiere el uso de anticoagulantes, separación de plasma y disminuye el contacto con material infeccioso. Además, las gotas de sangre seca se pueden almacenar y enviar fácilmente a los laboratorios analíticos sin utilizar dispositivos refrigerados.

Gracias a los nuevos desarrollos en técnicas analíticas (espectrometría de masas), que permiten realizar análisis cuantitativos a partir de volúmenes muy pequeños de sangre. El muestreo de DBS representa una poderosa herramienta para los análisis biomédicos, particularmente en estudios farmacocinéticos donde se necesitan varias muestras de sangre y para procedimientos de fenotipado.