Aktivita CYP2C9 vyhodnocena jednoduchým píchnutím prstu

Enzymy cytochromu P450 (CYP) jsou hlavním enzymovým systémem metabolizujícím léky u lidí. Velká interindividuální variabilita ovlivňuje aktivitu těchto enzymů a následně i plazmatické koncentrace léčiva, což má za následek různé farmakodynamické účinky a výskyt vedlejších účinků. Za tuto variabilitu jsou zodpovědné faktory prostředí, strava, léky nebo genetika. Genetické faktory jsou velmi důležité, protože většina těchto enzymů je vysoce polymorfních. Například bylo dosud objeveno přes 80 alelických variant CYP2D6, které jsou spojeny s absencí, snížením nebo zvýšením enzymové aktivity. Většina polymorfismů byla detekována nežádoucími reakcemi vyskytujícími se ve skupině v rámci populace po podání normálních dávek léků. Pacienti, u kterých se vyskytly nežádoucí reakce, měli často sníženou schopnost metabolizovat určité léky. V klinické terapii má tato variabilita důležité důsledky včetně nedostatečné odezvy na léčbu a/nebo nežádoucích reakcí na léky. Pro snížení těchto potenciálně nežádoucích jevů, které mohou vést k závažným nežádoucím reakcím nebo smrti, by proto mohlo být rozhodující, aby bylo možné posoudit aktivitu těchto enzymů na individuální úrovni. K hodnocení aktivit CYP lze použít dva přístupy, genotyp a fenotyp. Genotyp je založen na analýze DNA a detekci polymorfismu. Fenotyp spočívá v podání „modelového“ léku nebo sondového léku metabolizovaného specifickým CYP a stanovení poměru mezi lékem a jeho metabolitem v plazmě nebo moči. Hlavní nevýhodou fenotypizačních metod je sběr moči přes noc nebo alespoň 8 hodin po podání sondového testu. Tento postup je velmi zdlouhavý a časově náročný pro pacienta i pro zdravotnický personál. Test lze provést v plazmě nebo krvi 1-2 hodiny po podání sondy. Tento postup je však invazivní a vyžaduje důležitý objem krve (6 ml). Nedávno byl vyvinut nový přístup pro kvantitativní stanovení koncentrací cirkulujícího léčiva pomocí suchých krevních skvrn (DBS) na filtračním papíru získaném jednoduchým píchnutím prstu. Vzhledem k malému požadovanému objemu krve (asi 10 µl) ve srovnání s konvenčním odběrem poskytuje tato minimálně invazivní metoda pro pacienta vhodnou alternativu odběru krve v populaci pacientů, kde je odběr z žil neetický nebo nemožný (pediatrie).

Kromě toho odběr vzorků DBS nevyžaduje použití antikoagulantu, separaci plazmy a snižuje kontakt s infekčním materiálem. Kromě toho mohou být vysušené krevní skvrny snadno skladovány a odeslány do analytických laboratoří bez použití chlazených zařízení.

Díky novému vývoji v analytických technikách (hmotnostní spektrometrie), které umožňují kvantitativní analýzu z velmi malého objemu krve. Odběr vzorků DBS představuje výkonný nástroj pro biomedicínské analýzy, zejména ve farmakokinetických studiích, kde je potřeba několik vzorků krve, a pro fenotypizační postupy.