Atividade CYP2C9 avaliada com uma simples picada no dedo

As enzimas do citocromo P450 (CYP) são o principal sistema enzimático metabolizador de drogas em humanos. Uma grande variabilidade interindividual afeta a atividade dessas enzimas e, consequentemente, as concentrações plasmáticas do fármaco, resultando em diferentes efeitos farmacodinâmicos e ocorrência de efeitos colaterais. Fatores ambientais, dieta, drogas ou genética são responsáveis ​​por essa variabilidade. Os fatores genéticos são muito importantes, pois a maioria dessas enzimas é altamente polimórfica. Por exemplo, mais de 80 variantes alélicas de CYP2D6 foram descobertas até agora e estão associadas à ausência, diminuição ou aumento da atividade enzimática. A maioria dos polimorfismos foi detectada por reações adversas que ocorreram em um grupo dentro da população após a administração de doses normais de drogas. Os pacientes que apresentaram reações adversas geralmente tinham uma capacidade reduzida de metabolizar certos medicamentos. Na terapia clínica, essa variabilidade tem consequências importantes, incluindo a falta de resposta a um tratamento e/ou reações adversas a medicamentos. A fim de reduzir esses eventos potencialmente indesejados que podem levar a reações adversas graves ou morte, pode ser de interesse decisivo poder avaliar a atividade dessas enzimas em nível individual. Duas abordagens podem ser usadas para avaliar as atividades dos CYPs, genótipo e fenótipo. O genótipo é baseado na análise de DNA e detecção de polimorfismo. O fenótipo consiste na administração do fármaco "modelo" ou fármaco sonda metabolizado por um CYP específico e na determinação de uma relação entre o fármaco e seu metabólito no plasma ou na urina. A principal desvantagem dos métodos de fenotipagem é a coleta de urina durante a noite ou pelo menos 8 horas após a administração do teste de sonda. Este procedimento é muito tedioso e demorado para o paciente, bem como para a equipe médica. O teste pode ser realizado em plasma ou sangue 1-2 horas após a administração da sonda. No entanto, este procedimento é invasivo e necessita de um volume importante de sangue (6 ml). Recentemente, uma nova abordagem foi desenvolvida para a determinação quantitativa das concentrações de drogas circulantes usando manchas de sangue seco (DBS) em papel de filtro obtido com uma simples picada no dedo. Devido ao pequeno volume de sangue necessário (cerca de 10 µL) em comparação com a amostragem convencional, este método minimamente invasivo oferece uma alternativa amigável ao paciente para coleta de sangue na população de pacientes em que a amostragem venosa é antiética ou impossível (pediatria).

Além disso, a amostragem DBS não requer o uso de anticoagulante, separação de plasma e diminui o contato com material infeccioso. Além disso, manchas de sangue seco podem ser facilmente armazenadas e enviadas para laboratórios analíticos sem o uso de dispositivos refrigerados.

Graças aos novos desenvolvimentos em técnicas analíticas (espectrometria de massa), que permitem análises quantitativas de volumes muito pequenos de sangue. A amostragem DBS representa uma ferramenta poderosa para as análises biomédicas, particularmente em estudos farmacocinéticos onde várias amostras de sangue são necessárias e para procedimentos de fenotipagem.