Активность CYP2C9 оценивается с помощью простого прокола пальца

Ферменты цитохрома Р450 (CYP) являются основной ферментной системой, метаболизирующей лекарственные средства у человека. Большая межиндивидуальная вариабельность влияет на активность этих ферментов и, следовательно, на концентрацию лекарственного средства в плазме, что приводит к различным фармакодинамическим эффектам и появлению побочных эффектов. Факторы окружающей среды, диета, лекарства или генетика ответственны за эту изменчивость. Генетические факторы очень важны, так как большинство этих ферментов высоко полиморфны. Например, к настоящему времени обнаружено более 80 аллельных вариантов CYP2D6, связанных с отсутствием, снижением или увеличением активности фермента. Большинство полиморфизмов было выявлено по побочным реакциям, возникающим в группе населения после введения обычных доз препаратов. Те пациенты, у которых наблюдались побочные реакции, часто имели сниженную способность метаболизировать определенные препараты. В клинической терапии эта изменчивость имеет важные последствия, включая отсутствие ответа на лечение и/или побочные реакции на лекарства. Чтобы уменьшить эти потенциально нежелательные явления, которые могут привести к серьезным побочным реакциям или смерти, поэтому может представлять решающий интерес возможность оценки активности этих ферментов на индивидуальном уровне. Для оценки активности CYP можно использовать два подхода: генотип и фенотип. Генотип основан на анализе ДНК и обнаружении полиморфизма. Фенотип состоит из введения «модельного» препарата или препарата-зонда, метаболизирующегося специфическим CYP, и определения соотношения между препаратом и его метаболитом в плазме или моче. Принципиальным недостатком методов фенотипирования является сбор мочи в течение ночи или не менее чем через 8 часов после введения зондового теста. Эта процедура очень утомительна и отнимает много времени как у пациента, так и у медицинского персонала. Тест можно проводить в плазме или крови через 1-2 часа после введения зонда. Однако эта процедура является инвазивной и требует значительного объема крови (6 мл). Недавно был разработан новый подход для количественного определения концентраций циркулирующих лекарств с использованием высушенных пятен крови (DBS) на фильтровальной бумаге, полученных простым проколом пальца. Из-за того, что требуется небольшой объем крови (около 10 мкл) по сравнению с обычным забором крови, этот минимально инвазивный метод представляет собой удобную для пациента альтернативу сбору крови у пациентов, у которых забор венозной крови неэтичен или невозможен (педиатрия).

Кроме того, забор СКК не требует использования антикоагулянта, отделения плазмы и снижает контакт с инфекционным материалом. Кроме того, высушенные пятна крови можно легко хранить и отправлять в аналитические лаборатории без использования холодильных устройств.

Благодаря новым разработкам в аналитических методах (масс-спектрометрия), которые позволяют проводить количественный анализ очень малого объема крови. Отбор проб DBS представляет собой мощный инструмент для биомедицинских анализов, особенно в фармакокинетических исследованиях, когда необходимо несколько образцов крови, и для процедур фенотипирования.