IL-17:n rooli psoriaasin muunnelmissa

Rekrytoidaan yhteensä 80 psoriaasipotilasta, jotka eivät tällä hetkellä käytä systeemistä hoitoa, joilla on vähintään yksi psoriaattinen plakki rungossa tai proksimaalisissa raajoissa ja joilla on myös psoriaasin hoidolle vastustuskykyisempiä alueita. Nämä henkilöt luokitellaan seuraavaan 5 ryhmään vastustuskykyisten alueiden sijainnin mukaan: päänahan psoriaasi (20 henkilöä), märkärakkulainen palmo-plantaaripsoriaasi (10 henkilöä), ei-pustuloarinen palmo-plantaaripsoriaasi (10 henkilöä), kyynärpään psoriaasi ( 20 henkilöä) ja säären psoriaasista (20 henkilöä).

Päivän 0 käynnillä psoriaasin vakavuus arvioidaan käyttämällä kehon pinta-alaa (BSA) ja psoriaasialue- ja vakavuusindeksiä (PASI).

Asianmukaisten huuhtoutumisjaksojen jälkeen kaikilta 80 koehenkilöltä otetaan kaksi ihobiopsiaa: yksi vartalon tai proksimaalisten raajojen alueella sijaitsevasta plakista ja toinen hoidolle vastustuskykyisemmällä alueella (päänahka, kämmenet/pohjat, kyynärpää tai jalka) . Jokainen biopsia jaetaan kahtia. Yhtä osaa käytetään rajoitettuun immunohistokemialliseen paneeliin ja ylimääräinen värjäys tehdään näytteille, jotka on otettu märkärapeasta palmo-plantaarisesta psoriaasista ja ei-pustulaarisesta palmoplantaarisesta psoriaasista IL-17A:ta ja IL-23:a tuottavien solujen paikallistamiseksi. Toista puoliskoa käytetään geeniekspressioanalyysiin käyttäen käänteistranskriptiopolymeraasiketjureaktiota (RT-PCR) kaikille koehenkilöille, mukaan lukien seuraavat geenit: IL-23 (p40 & p19), IL-17A ja ihmisen hapan ribosomaaliproteiini (HARP) ). Lisäksi muiden kiinnostavien spesifisten geenien ilmentyminen analysoidaan käyttämällä RT-PCR:ää potilailla, joilla on märkärakkulainen palmo-plantaarinen psoriaasi ja ei-pustuloarinen palmo-plantaaripsoriaasi. Lisäksi 10 terveeltä vapaaehtoiselta kerätään neljä ihobiopsiaa RT-PCR:ää varten (IL-23 (p40 & p19), IL-17A ja HARP). Yksi biopsia otetaan rungosta ja toinen kämmenestä tai jalkapohjasta. Kolmas ja neljäs biopsia otetaan lisäalueilta (päänahka, kyynärpää tai alaraaja). Geenien ilmentymistä hoidolle vastustuskykyisemmiltä alueilta (päänahka, kämmenet, kyynärpäät, sääret) olevissa plakeissa verrataan geenien ilmentymiseen rungosta tai muista ylä- ja alaraajojen plakeista.

Yhteensä 30 koehenkilölle 80:stä otetaan myös yksi tai kaksi ylimääräistä ihobiopsiaa. Kymmenelle potilaalle, joilla on märkärakkulainen palmoplantaaripsoriaasi ja 10 potilaalla, joilla on ei-pustuloarinen palmoplantaaripsoriaasi, tehdään yksi ylimääräinen biopsia kämmenen kärsineestä ihosta ja yhdestä rungossa tai raajoissa olevasta plakista solujen eristämistä ja soluanalyysiä varten. tutkia mekanismeja, jotka liittyvät IL-17A:n lisääntyneeseen ilmentymiseen ilman samanaikaista IL-23:n lisääntymistä. Kymmenelle potilaalle, joilla on vulgaris psoriaasi vartalossa tai yläraajoissa, mutta joilla ei ole märkäraajoista tai ei-pustuloista palmo-plantaarista psoriaasia, tehdään myös ylimääräinen biopsia vaurioituneelle iholle. Tulehdussolujen uuttamisen jälkeen virtaussytometriaa, jossa yhdistyvät solun pintamarkkerit ja solunsisäinen värjäys, käytetään IL-17A:n ja IL-23:n tutkimiseen T-soluissa, granulosyyteissä/mastosyyteissä/makrofageissa ja Ag:tä esittelevissä soluissa. Jos soluja on kerätty tarpeeksi, kolme vasta-ainepaneelia analysoidaan seuraavassa järjestyksessä virtaussytometriaa käyttäen: T-solupaneeli, granulosyytit/mastosyytit/makrofagit-paneeli ja antigeeniä esittelevä solu (APC) -paneeli. Kaikki paneelit on myös arvioitava anti-CD45-vasta-aineella (cluster of differentiation) ja elinkelpoisuustestillä (Aqua live/dead). Virtaussytometrian tuloksia verrataan koepalasta otettuihin koekappaleisiin potilailta, joilla on märkärakkulainen ja ei-pustuloarinen palmo-plantaarinen psoriaasi, rungosta tai proksimaalisista raajoista potilailla, joilla on märkärakkulainen ja ei-pustuloarinen palmo-plantaarinen psoriaasi sekä vulgarista psoriasista sairastavien henkilöiden rungot tai proksimaaliset raajat. .

Kaikki ihobiopsiat tehdään päivän 0 käynnillä ja valinnainen tutkimuskäynti (päivä 10) tehdään, jos ompeleiden poistaminen ihobiopsioista on tarpeen.

Lisäksi verenkierrossa olevat IL-17A:n plasmapitoisuudet mitataan kaikilta koehenkilöiltä ja terveiltä vapaaehtoisilta, jotta voidaan verrata IL-17A-tasoja viidessä psoriaasipotilasryhmässä ja terveissä koehenkilöissä. Lisäksi tutkitaan korrelaatiota IL-17A-tasojen ja PASI:n välillä.