Ruolo dell'IL-17 nelle varianti della psoriasi

Verranno reclutati un totale di 80 soggetti affetti da psoriasi che attualmente non utilizzano trattamenti sistemici, con almeno una placca psoriasica sul tronco o sugli arti prossimali e con anche aree più resistenti al trattamento della psoriasi. Questi soggetti saranno classificati nei seguenti 5 gruppi in base alla localizzazione delle aree resistenti: psoriasi del cuoio capelluto (20 soggetti), psoriasi palmo-plantare pustolosa (10 soggetti), psoriasi palmo-plantare non pustolosa (10 soggetti), psoriasi del gomito ( 20 soggetti) e psoriasi della parte inferiore della gamba (20 soggetti).

Alla visita del giorno 0, la gravità della psoriasi verrà valutata utilizzando l'area di superficie corporea (BSA) e l'indice di area e gravità della psoriasi (PASI).

Dopo appropriati periodi di washout, tutti gli 80 soggetti riceveranno due biopsie cutanee: una da una placca situata sul tronco o sugli arti prossimali e una su una placca situata in un'area più resistente al trattamento (cuoio capelluto, palmi delle mani, gomito o parte inferiore della gamba) . Ogni biopsia sarà divisa a metà. Una parte verrà utilizzata per un pannello immunoistochimico limitato e verrà eseguita una colorazione aggiuntiva su campioni di psoriasi palmo-plantare pustolosa e soggetti con psoriasi palmo-plantare non pustolosa per localizzare le cellule produttrici di IL-17A e IL-23. L'altra metà verrà utilizzata per l'analisi dell'espressione genica utilizzando la reazione a catena della polimerasi a trascrizione inversa (RT-PCR) per tutti i soggetti, inclusi i seguenti geni: IL-23 (p40 e p19), IL-17A e proteina ribosomiale acida umana (HARP ). Inoltre, l'espressione di altri geni specifici di interesse sarà analizzata mediante RT-PCR per soggetti con psoriasi palmo-plantare pustolosa e psoriasi palmo-plantare non pustolosa. Inoltre, verranno raccolte quattro biopsie cutanee da 10 volontari sani per RT-PCR (IL-23 (p40 e p19), IL-17A e HARP). Una biopsia verrà prelevata dal tronco e un'altra da un palmo o da una pianta del piede. Una terza e una quarta biopsia verranno raccolte su aree aggiuntive (cuoio capelluto, gomito o arto inferiore). L'espressione genica nelle placche delle aree più resistenti al trattamento (cuoio capelluto, palmi, gomiti, parte inferiore delle gambe) sarà confrontata con l'espressione genica nelle placche del tronco o di altre aree degli arti superiori e inferiori.

Un totale di 30 soggetti su 80 avrà anche una o due biopsie cutanee aggiuntive. I 10 soggetti con psoriasi palmo-plantare pustolosa e i 10 soggetti con psoriasi palmo-plantare non pustolosa avranno una biopsia aggiuntiva della pelle coinvolta del palmo e una di una placca sul tronco o sugli arti per l'isolamento cellulare e l'analisi cellulare al fine esplorare i meccanismi coinvolti nell'aumentata espressione di IL-17A senza un concomitante aumento di IL-23. Dieci soggetti con psoriasi volgare del tronco o degli arti superiori ma senza psoriasi palmo-plantare pustolosa o non pustolosa verranno sottoposti anche ad un'ulteriore biopsia della cute lesionata. Dopo l'estrazione delle cellule infiammatorie, verrà utilizzata la citometria a flusso che combina marcatori di superficie cellulare e colorazione intracitoplasmatica per studiare IL-17A e IL-23 in cellule T, granulociti/mastociti/macrofagi e cellule presentanti Ag. Se vengono raccolte cellule sufficienti, verranno analizzati tre pannelli di anticorpi nel seguente ordine utilizzando la citometria a flusso: un pannello di cellule T, un pannello di granulociti/mastociti/macrofagi e un pannello di cellule presentanti l'antigene (APC). Tutti i pannelli devono essere valutati anche con un anticorpo anti-CD45 (cluster of differenziation) e un test di vitalità (Aqua live/dead). I risultati della citometria a flusso saranno confrontati per le biopsie dei palmi di soggetti con psoriasi palmo-plantare pustolosa e non pustolosa, del tronco o degli arti prossimali di soggetti con psoriasi palmo-plantare pustolosa e non pustolosa e del tronco o degli arti prossimali di soggetti con psoriasi volgare .

Tutte le biopsie cutanee verranno eseguite alla visita del giorno 0 e verrà eseguita una visita di studio facoltativa (giorno 10) se è necessaria la rimozione della sutura dalle biopsie cutanee.

Inoltre, saranno misurati i livelli circolanti di IL-17A in tutti i soggetti e nei volontari sani per confrontare i livelli di IL-17A nei 5 gruppi di soggetti con psoriasi e soggetti sani. Inoltre, verrà esplorata la correlazione tra i livelli di IL-17A e PASI.