乾癬のバリアントにおける IL-17 の役割

現在全身治療を使用しておらず、体幹または手足の近位に少なくとも 1 つの乾癬斑があり、乾癬領域の治療に対してより抵抗力がある合計 80 人の乾癬患者が募集されます。 これらの被験者は、耐性領域の局在に従って、次の5つのグループに分類されます：頭皮乾癬（20例）、膿疱性掌蹠乾癬（10例）、非膿疱性掌蹠乾癬（10例）、肘乾癬20 名）および下腿乾癬（20 名）。

0日目の訪問で、乾癬の重症度は、体表面積（BSA）および乾癬の面積と重症度指数（PASI）を使用して評価されます。

適切なウォッシュアウト期間の後、80 人の被験者全員が 2 つの皮膚生検を行います。1 つは体幹または手足の近位部に位置するプラークから、もう 1 つは治療に抵抗力のある領域 (頭皮、手のひら/足の裏、肘または下肢) に位置するプラークからのものです。 . 各生検は半分に分割されます。 一部は限られた免疫組織化学パネルに使用され、膿疱性掌蹠乾癬および非膿疱性掌蹠乾癬の被験者からのサンプルで追加の染色が行われ、IL-17AおよびIL-23産生細胞の位置が特定されます。 残りの半分は、次の遺伝子を含むすべての被験者の逆転写ポリメラーゼ連鎖反応 (RT-PCR) を使用した遺伝子発現分析に使用されます: IL-23 (p40 & p19)、IL-17A、およびヒト酸性リボソームタンパク質 (HARP) ）。 さらに、関心のある他の特定の遺伝子の発現は、膿疱性掌蹠乾癬および非膿疱性掌蹠乾癬の被験者に対してRT-PCRを使用して分析されます。 さらに、RT-PCR (IL-23 (p40 & p19)、IL-17A および HARP) のために、10 人の健康なボランティアから 4 つの皮膚生検が収集されます。 1 つの生検は体幹から採取され、もう 1 つは手のひらまたは足の裏から採取されます。 3 回目と 4 回目の生検は、追加の領域 (頭皮、肘、または下肢) で収集されます。 治療に対してより耐性のある領域（頭皮、手のひら、肘、下肢）からのプラークにおける遺伝子発現を、体幹または上肢および下肢の他の領域からのプラークにおける遺伝子発現と比較する。

80 人のうち合計 30 人の被験者は、1 つまたは 2 つの追加の皮膚生検も受けます。 膿疱性掌蹠乾癬の10人の被験者と非膿疱性掌蹠乾癬の10人の被験者は、細胞分離と細胞分析のために、手のひらの関与する皮膚の1つの追加の生検と、体幹または四肢のプラークの1つを順番に行います。 IL-23の同時増加なしでIL-17Aの発現増加に関与するメカニズムを調査する。 体幹または上肢に尋常性乾癬を有するが、膿疱性または非膿疱性掌蹠乾癬がない10人の被験者も、病変皮膚に対して追加の生検を実施する。 炎症細胞抽出後、細胞表面マーカーと細胞質内染色を組み合わせたフローサイトメトリーを使用して、T 細胞、顆粒球/肥満細胞/マクロファージ、および Ag 提示細胞における IL-17A および IL-23 を研究します。 十分な数の細胞が採取されると、フローサイトメトリーを使用して 3 つの抗体パネルが次の順序で分析されます: T 細胞パネル、顆粒球/マスト細胞/マクロファージ パネル、および抗原提示細胞 (APC) パネル。 すべてのパネルは、抗 CD45 (分化クラスター) 抗体および生存率テスト (Aqua live/dead) で評価することもできます。 フローサイトメトリーの結果は、膿疱性および非膿疱性掌蹠乾癬の被験者の手のひらからの生検、膿疱性および非膿疱性掌蹠乾癬の被験者の胴体または近位四肢、および尋常性乾癬の被験者の胴体または近位四肢の生検について比較されます。 .

すべての皮膚生検は 0 日目の訪問で行われ、皮膚生検からの縫合糸の除去が必要な場合は、オプションの研究訪問 (10 日目) が行われます。

さらに、乾癬を有する対象および健康な対象の5つのグループにおけるIL-17Aレベルを比較するために、IL-17Aの循環血漿レベルをすべての対象および健康なボランティアについて測定する。 さらに、IL-17A レベルと PASI の間の相関関係が調査されます。