Sytokiinien ja syöttösolujen rooli SLK:n, sidekalvon ja kuivan silmän patogeneesissä
maanantai 23. kesäkuuta 2014 päivittänyt: National Taiwan University Hospital
Sytokiinien ja syöttösolujen rooli silmän pinnan tulehdussairauksien patogeneesissä, mukaan lukien ylimmäinen limbinen keratokonjunktiviitti, sidekalvontulehdus ja kuivasilmäisyys
Tutkijoiden tutkimusten erityistavoitteet ovat seuraavat:
- Keräämään kyynelnäytteitä potilailta, joilla on erilaisia silmän pintahäiriöitä, mukaan lukien SLK, sidekalvontulehdus ja keratoconjunctivitis sicca (KCS).
- Arvioida kyynelsytokiinien erilaista ilmentymistä ja pH-arvoja eri silmän pintahäiriöiden välillä.
- Kerää kirurgiset sidekalvonäytteet potilailta, joilla on SLK ja sidekalvontulehdus.
- Arvioida syöttösolujen migraatiota indusoivia tekijöitä ja kuinka syöttösolu aktivoituu SLK:ssa kirurgisten näytteiden ja viljellyn fibroblastin avulla.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Tuntematon
Yksityiskohtainen kuvaus
Erilaisten kyynelsytokiinitasojen havaitseminen potilailla, joilla on ylivoimainen limbinen keratokonjunktiviitti, sidekalvontulehdus ja keratoconjunctivitis sicca
- Peruskyynelnäytteet kerätään atraumaattisesti inferolateraalisesta kyynelmeniskistä lasikapillaariputkien avulla. Varo koskettamasta sarveiskalvon ja sidekalvon pintaa. Saadaan noin 30 μl kyynelnäytteitä, minkä jälkeen näytteitä sentrifugoidaan 10 minuuttia nopeudella 1500 rpm (225 g). Kyynelnäyte laitetaan mikroputkiin (Eppendorf) ja säilytetään -70 °C:ssa. IL-1p-, IL-17-, TNF-a- ja IFN-y-tasot mitataan entsyymikytketyillä immunosorbenttimäärityssarjoilla.
- Immunohistokemiallinen värjäysmenetelmä sidekalvonäytteille - Sidekalvo kerätään SLK- ja sidekalvontulehduspotilailta, joille tehtiin tarvittaessa yli- ja alaresektio. Kaihi- tai verkkokalvoleikkauksen aikana havaittu ylimääräinen sidekalvo leikataan normaaliksi kontrolliksi. Kaikkien SLK-, sidekalvon ja kontrolliryhmien sidekalvonäytteet lähetetään patologian osastolle rutiininomaiseen parafiiniin upottamiseen sekä hematoksyliini- ja eosiinivärjäykseen. Kirurgiset näytteet asetetaan 4-prosenttiseen paraformaldehydiin 4 °C:seen yhdestä kahdeksi päiväksi ja säilytetään sitten 1-prosenttisessa natriumfosfaattipuskurissa 4 °C:ssa. Sitten ne upotetaan parafiiniin. Kudosadheesion parantamiseksi 5 mikrometrin paksuisia leikkeitä asennetaan lasilevyille, jotka on esikäsitelty Vectabondilla (Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornia, USA). Parafiinileikkeistä poistetaan parafiini, ne hydratoidaan uudelleen ja pestään fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella (PBS; pH 7,4). Antigeenin haku suoritetaan upottamalla leikkeet 0,1 % trypsiiniin vesihauteessa 15 minuutiksi. Endogeeninen peroksidaasiaktiivisuus sammutetaan asettamalla objektilasit 3-prosenttiseen vetyperoksidiin. Objektilasit blokataan sitten seerumilla, minkä jälkeen niitä inkuboidaan primääristen vasta-aineiden kanssa. Primaarisia vasta-aineita (TSL ja SCF) inkuboidaan yön yli 4 °C:ssa. Sen jälkeen inkubointi biotiinilla konjugoidun sekundaarisen vasta-aineen kanssa suoritetaan huoneenlämpötilassa 60 minuutin ajan. Lisäksi inkubointi avidiini-biotiini piparjuuriperoksidaasikompleksin kanssa suoritetaan sitten myös huoneenlämmössä 30 minuutin ajan käyttäen Vectastain elite® ABC -pakkausta (Vector labs, CA USA). Paikka, johon entsyymi on sitoutunut, visualisoidaan lisäämällä substraattia 3,3'-diaminobentsidiini (DAKO, CA, USA), kromogeenia, joka tuottaa ruskean liukenemattoman sakan. Leikkeet vastavärjätään sitten hematoksyliinillä, mitä seuraa dehydraatio ja kiinnitys Vecta Mount -levyllä. Levyjen arvioimiseen käytettiin kiinnitysväliainetta.
Opintotyyppi
Havainnollistava
Ilmoittautuminen (Odotettu)
105
Yhteystiedot ja paikat
Tässä osiossa on tutkimuksen suorittajien yhteystiedot ja tiedot siitä, missä tämä tutkimus suoritetaan.
Opiskelupaikat
-
-
Zhongzheng Dist
-
Taipei, Zhongzheng Dist, Taiwan, 100
- National Taiwan University Hospital
-
-
Osallistumiskriteerit
Tutkijat etsivät ihmisiä, jotka sopivat tiettyyn kuvaukseen, jota kutsutaan kelpoisuuskriteereiksi. Joitakin esimerkkejä näistä kriteereistä ovat henkilön yleinen terveydentila tai aiemmat hoidot.
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
20 vuotta - 85 vuotta (Aikuinen, Vanhempi Aikuinen)
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Ei
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Kaikki
Näytteenottomenetelmä
Ei-todennäköisyysnäyte
Tutkimusväestö
Osa I. Kyynelnäyte, joka on diagnosoitu potilaaksi, jolla on ylivoimainen limbinen keratokonjunktiviitti (SLK) tai sidekalvontulehdus tai keratoconjunctivitis sicca (KCS). Osa II.
Kirurginen sidekalvonäytesairausryhmä: SLK- tai sidekalvontulehduspotilaat, jotka eivät kestä lääkehoitoa ja saavat sidekalvon resektioleikkausta
Kuvaus
• Osa I. Kyynelnäyte
Sisällyttämiskriteerit:
- ikä 20-85 vuotta
- joilla on diagnosoitu ylimmäinen limbinen keratokonjunktiviitti (SLK) tai sidekalvontulehdus tai keratoconjunctivitis sicca (KCS)
Poissulkemiskriteerit:
- raskaus
mihin tahansa silmäleikkaukseen 3 kuukauden sisällä
- Osa II. Kirurginen sidekalvonäyte
Sisällyttämiskriteerit:
- ikä 20-85 vuotta
- sairausryhmä: SLK- tai sidekalvon potilaat, jotka eivät kestä lääkehoitoa ja saavat sidekalvon resektioleikkausta
- kontrolliryhmä: verkkokalvon tai kaihileikkauksen saaneet potilaat, joilla on ylimääräinen sidekalvo vatsaontelon jälkeen
Opintosuunnitelma
Tässä osiossa on tietoja tutkimussuunnitelmasta, mukaan lukien kuinka tutkimus on suunniteltu ja mitä tutkimuksella mitataan.
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Aikanäkymät: Tulevaisuuden
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Aikaikkuna |
|---|---|
|
Kyynelsytokiinien muutos ELISA:lla mitattuna
Aikaikkuna: Kyyneleet kerätään ennen hoitoa, kuukauden ja kuuden kuukauden seurantakäyntejä
|
Kyyneleet kerätään ennen hoitoa, kuukauden ja kuuden kuukauden seurantakäyntejä
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Täältä löydät tähän tutkimukseen osallistuvat ihmiset ja organisaatiot.
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: Fung-Rong Hu, MD, National Taiwan University Hospital
Opintojen ennätyspäivät
Nämä päivämäärät seuraavat ClinicalTrials.gov-sivustolle lähetettyjen tutkimustietueiden ja yhteenvetojen edistymistä. National Library of Medicine (NLM) tarkistaa tutkimustiedot ja raportoidut tulokset varmistaakseen, että ne täyttävät tietyt laadunvalvontastandardit, ennen kuin ne julkaistaan julkisella verkkosivustolla.
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus
Lauantai 1. maaliskuuta 2014
Ensisijainen valmistuminen (Odotettu)
Perjantai 1. joulukuuta 2017
Opintojen valmistuminen (Odotettu)
Perjantai 1. joulukuuta 2017
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Tiistai 27. toukokuuta 2014
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Maanantai 9. kesäkuuta 2014
Ensimmäinen Lähetetty (Arvio)
Tiistai 10. kesäkuuta 2014
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Arvio)
Tiistai 24. kesäkuuta 2014
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Maanantai 23. kesäkuuta 2014
Viimeksi vahvistettu
Sunnuntai 1. kesäkuuta 2014
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 201312127RINB
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .