Le rôle des cytokines et des mastocytes dans la pathogenèse de la SLK, de la conjonctivochalase et de la sécheresse oculaire
23 juin 2014 mis à jour par: National Taiwan University Hospital
Le rôle des cytokines et des mastocytes dans la pathogenèse des maladies inflammatoires de la surface oculaire, y compris la kératoconjonctivite limbique supérieure, la conjonctivochalase et la sécheresse oculaire
Les objectifs spécifiques des études des investigateurs sont les suivants :
- Recueillir les échantillons de larmes de patients atteints de différents troubles de la surface oculaire, notamment SLK, conjonctivochalase et kératoconjonctivite sèche (KCS).
- Évaluer l'expression différentielle des cytokines lacrymales et des valeurs de pH entre différents troubles de la surface oculaire.
- Recueillir les échantillons conjonctivaux chirurgicaux des patients atteints de SLK et de conjonctivochalasis.
- Évaluer les facteurs induisant la migration des mastocytes et la façon dont les mastocytes sont activés dans SLK via des spécimens chirurgicaux et des fibroblastes cultivés.
Aperçu de l'étude
Statut
Inconnue
Les conditions
Description détaillée
Détection de divers niveaux de cytokines lacrymales chez les patients atteints de kératoconjonctivite limbique supérieure, de conjonctivochalase et de kératoconjonctivite sèche
- Des échantillons de déchirure basale seront prélevés de manière atraumatique à partir du ménisque de déchirure inférolatéral à l'aide de tubes capillaires en verre. Des précautions sont prises pour éviter de toucher la surface cornéenne et conjonctivale. Environ 30 µl d'échantillons de larmes sont obtenus, puis les échantillons sont centrifugés 10 minutes à 1500 rpm (225g). Les échantillons de larmes sont placés dans des microtubes (Eppendorf) et conservés à -70°C. Les niveaux d'IL-1β, d'IL-17, de TNF-α et d'IFN-γ seront mesurés par des kits de dosage immuno-enzymatique.
- Méthode de coloration immunohistochimique pour les échantillons conjonctivaux - La conjonctive sera prélevée sur des patients atteints de SLK et de conjonctivochalase qui ont subi une résection conjonctivale bulbaire supérieure et inférieure au besoin. La conjonctive redondante notée après péritomie lors d'une chirurgie de la cataracte ou de la rétine sera excisée pour servir de témoin normal. Les spécimens conjonctivaux de tous les groupes SLK, conjonctivochalasis et contrôle sont envoyés au service de pathologie pour inclusion de paraffine de routine et coloration à l'hématoxyline et à l'éosine. Les échantillons chirurgicaux sont placés dans du paraformaldéhyde à 4 % à 4 °C pendant un à deux jours, puis stockés dans un tampon de phosphate de sodium à 1 % à 4 °C. Ils sont ensuite inclus dans de la paraffine. Pour améliorer l'adhérence des tissus, des coupes de 5 micromètres d'épaisseur sont montées sur des lames de verre prétraitées avec du Vectabond (Vector Laboratories, Burlingame, Californie, USA). Les coupes de paraffine sont déparaffinées, réhydratées et lavées avec une solution saline tamponnée au phosphate (PBS ; pH 7,4). La récupération de l'antigène est effectuée en immergeant les coupes dans de la trypsine à 0,1 % au bain-marie pendant 15 minutes. L'activité peroxydase endogène est désactivée en plaçant les lames dans du peroxyde d'hydrogène à 3 %. Les lames sont ensuite bloquées avec du sérum suivi d'une incubation avec des anticorps primaires. Les anticorps primaires (TSL et SCF) sont incubés pendant une nuit à 4°C. Ensuite, l'incubation avec l'anticorps secondaire conjugué à la biotine est effectuée à température ambiante pendant 60 min. En outre, une incubation avec le complexe avidine-biotine peroxydase de raifort est ensuite effectuée à température ambiante également pendant 30 minutes à l'aide du kit Vectastain elite® ABC (Vector labs, CA USA). L'endroit où l'enzyme est liée sera visualisé par l'ajout du substrat 3,3'-diaminobenzidine (DAKO, CA, USA), un chromogène qui produit un précipité brun insoluble. Les coupes sont ensuite contre-colorées avec de l'hématoxyline, qui est suivie d'une déshydratation et d'un montage avec Vecta Mount. Le milieu de montage a été utilisé pour évaluer les lames.
Type d'étude
Observationnel
Inscription (Anticipé)
105
Contacts et emplacements
Cette section fournit les coordonnées de ceux qui mènent l'étude et des informations sur le lieu où cette étude est menée.
Lieux d'étude
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Zhongzheng Dist
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Taipei, Zhongzheng Dist, Taïwan, 100
- National Taiwan University Hospital
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-
Critères de participation
Les chercheurs recherchent des personnes qui correspondent à une certaine description, appelée critères d'éligibilité. Certains exemples de ces critères sont l'état de santé général d'une personne ou des traitements antérieurs.
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
20 ans à 85 ans (Adulte, Adulte plus âgé)
Accepte les volontaires sains
Non
Sexes éligibles pour l'étude
Tout
Méthode d'échantillonnage
Échantillon non probabiliste
Population étudiée
Partie I. Échantillon de déchirure diagnostiqué comme un patient atteint de kératoconjonctivite limbique supérieure (SLK) ou de conjonctivochalase ou de kératoconjonctivite sèche (KCS) Partie II.
Groupe de maladies des spécimens chirurgicaux de la conjonctive : patients SLK ou conjonctivochalasis réfractaires au traitement médical et subissant une chirurgie de résection conjonctivale
La description
• Partie I. Échantillon de déchirure
Critère d'intégration:
- âge 20-85 ans
- diagnostiqué comme un patient atteint de kératoconjonctivite limbique supérieure (SLK) ou de conjonctivochalase ou de kératoconjonctivite sèche (KCS)
Critère d'exclusion:
- grossesse
toute chirurgie oculaire dans les 3 mois
- Deuxieme PARTIE. Spécimen chirurgical de conjonctive
Critère d'intégration:
- âge 20-85 ans
- groupe de maladies : patients SLK ou conjonctivochalasis réfractaires au traitement médical et subissant une chirurgie de résection conjonctivale
- groupe témoin : patients opérés de la rétine ou de la cataracte avec conjonctive redondante après péritomie
Plan d'étude
Cette section fournit des détails sur le plan d'étude, y compris la façon dont l'étude est conçue et ce que l'étude mesure.
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Perspectives temporelles: Éventuel
Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Délai |
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Modification des cytokines lacrymales mesurée par ELISA
Délai: La déchirure sera collectée avant le traitement, un mois et six mois de suivi
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La déchirure sera collectée avant le traitement, un mois et six mois de suivi
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Collaborateurs et enquêteurs
C'est ici que vous trouverez les personnes et les organisations impliquées dans cette étude.
Parrainer
Les enquêteurs
- Chercheur principal: Fung-Rong Hu, MD, National Taiwan University Hospital
Dates d'enregistrement des études
Ces dates suivent la progression des dossiers d'étude et des soumissions de résultats sommaires à ClinicalTrials.gov. Les dossiers d'étude et les résultats rapportés sont examinés par la Bibliothèque nationale de médecine (NLM) pour s'assurer qu'ils répondent à des normes de contrôle de qualité spécifiques avant d'être publiés sur le site Web public.
Dates principales de l'étude
Début de l'étude
1 mars 2014
Achèvement primaire (Anticipé)
1 décembre 2017
Achèvement de l'étude (Anticipé)
1 décembre 2017
Dates d'inscription aux études
Première soumission
27 mai 2014
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
9 juin 2014
Première publication (Estimation)
10 juin 2014
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Estimation)
24 juin 2014
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
23 juin 2014
Dernière vérification
1 juin 2014
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Termes MeSH pertinents supplémentaires
Autres numéros d'identification d'étude
- 201312127RINB
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