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Il ruolo delle citochine e dei mastociti nella patogenesi di SLK, congiuntivocalasi e occhio secco

23 giugno 2014 aggiornato da: National Taiwan University Hospital

Il ruolo delle citochine e dei mastociti nella patogenesi delle malattie infiammatorie della superficie oculare, tra cui la cheratocongiuntivite limbica superiore, la congiuntivocalasi e l'occhio secco

Gli obiettivi specifici degli studi dei ricercatori sono i seguenti:

  • Per raccogliere i campioni lacrimali da pazienti con diversi disturbi della superficie oculare, tra cui SLK, conjunctivochalasis e keratoconjunctivitis secca (KCS).
  • Per valutare l'espressione differenziale delle citochine lacrimali e dei valori di pH tra diversi disturbi della superficie oculare.
  • Raccogliere i campioni congiuntivali chirurgici dai pazienti con SLK e conjunctivochalasis.
  • Valutare i fattori che inducono la migrazione dei mastociti e come i mastociti vengono attivati ​​in SLK tramite campioni chirurgici e fibroblasti coltivati.

Panoramica dello studio

Stato

Sconosciuto

Condizioni

Descrizione dettagliata

  1. Rilevamento di vari livelli di citochine lacrimali in pazienti con cheratocongiuntivite limbica superiore, congiuntivocalasi e cheratocongiuntivite secca

    - I campioni lacrimali basali saranno prelevati in modo atraumatico dal menisco lacrimale inferolaterale utilizzando tubi capillari di vetro. Si presta attenzione per evitare di toccare la superficie corneale e congiuntivale. Si ottengono circa 30 μl di campioni di lacrime, quindi i campioni vengono centrifugati per 10 minuti a 1500 rpm (225 g). I campioni di lacrime vengono posti in microtubi (Eppendorf) e conservati a -70°C. I livelli di IL-1β, IL-17, TNF-α e IFN-γ saranno misurati mediante kit di analisi di immunosorbenti legati all'enzima.

  2. Metodo di colorazione immunoistochimica per campioni congiuntivali - La congiuntiva sarà raccolta da pazienti con SLK e conjunctivochalasis che hanno ricevuto resezione congiuntivale bulbare superiore e inferiore secondo necessità. La congiuntiva ridondante notata dopo la peritomia durante la chirurgia della cataratta o della retina sarà asportata per fungere da normale controllo. I campioni congiuntivali di tutti i gruppi SLK, conjunctivochalasis e di controllo vengono inviati al reparto di patologia per l'inclusione di routine in paraffina e la colorazione con ematossilina ed eosina. I campioni chirurgici vengono posti in paraformaldeide al 4% a 4°C per uno o due giorni e quindi conservati in tampone fosfato di sodio all'1% a 4°C. Vengono quindi incorporati in paraffina. Per migliorare l'adesione dei tessuti, sezioni spesse 5 micrometri vengono montate su vetrini pretrattati con Vectabond (Vector Laboratories, Burlingame, California, USA). Le sezioni in paraffina vengono deparaffinate, reidratate e lavate con soluzione salina tamponata con fosfato (PBS; pH 7,4). Il recupero dell'antigene viene eseguito immergendo le sezioni in tripsina allo 0,1% a bagnomaria per 15 minuti. L'attività della perossidasi endogena viene estinta ponendo i vetrini in perossido di idrogeno al 3%. I vetrini vengono quindi bloccati con siero seguito da incubazione con anticorpi primari. Gli anticorpi primari (TSL e SCF) vengono incubati durante la notte a 4°C. Successivamente, l'incubazione con l'anticorpo secondario coniugato con biotina viene eseguita a temperatura ambiente per 60 min. Inoltre, l'incubazione con il complesso di avidina-biotina perossidasi di rafano viene quindi eseguita anche a temperatura ambiente per 30 minuti utilizzando il kit Vectastain elite® ABC (Vector labs, CA USA). La posizione in cui l'enzima è legato sarà visualizzata mediante l'aggiunta del substrato 3,3'-diaminobenzidina (DAKO, CA, USA), un cromogeno che produce un precipitato insolubile di colore marrone. Le sezioni vengono quindi controcolorate con ematossilina, seguita da disidratazione e montaggio con Vecta Mount Il mezzo di montaggio è stato utilizzato per valutare i vetrini.

Tipo di studio

Osservativo

Iscrizione (Anticipato)

105

Contatti e Sedi

Questa sezione fornisce i recapiti di coloro che conducono lo studio e informazioni su dove viene condotto lo studio.

Luoghi di studio

  • Taiwan
    • Zhongzheng Dist
      • Taipei, Zhongzheng Dist, Taiwan, 100
        • National Taiwan University Hospital

Criteri di partecipazione

I ricercatori cercano persone che corrispondano a una certa descrizione, chiamata criteri di ammissibilità. Alcuni esempi di questi criteri sono le condizioni generali di salute di una persona o trattamenti precedenti.

Criteri di ammissibilità

Età idonea allo studio

Da 20 anni a 85 anni (Adulto, Adulto più anziano)

Accetta volontari sani

No

Sessi ammissibili allo studio

Tutto

Metodo di campionamento

Campione non probabilistico

Popolazione di studio

Parte I. Campione lacrimale diagnosticato come paziente affetto da cheratocongiuntivite limbica superiore (SLK) o congiuntivocalasi o cheratocongiuntivite secca (KCS) Parte II. Gruppo di malattie del campione chirurgico della congiuntiva: SLK o pazienti conjunctivochalasis refrattari al trattamento medico e sottoposti a intervento chirurgico di resezione congiuntivale

Descrizione

• Parte I. Campione lacrimale

Criterio di inclusione:

  1. età 20-85 anni
  2. diagnosticato come paziente con cheratocongiuntivite limbica superiore (SLK) o congiuntivocalasi o cheratocongiuntivite secca (KCS)

Criteri di esclusione:

  1. gravidanza

  2. qualsiasi intervento chirurgico oculare entro 3 mesi

    • Seconda parte. Esemplare chirurgico di congiuntiva

Criterio di inclusione:

  1. età 20-85 anni
  2. gruppo di malattia: SLK o pazienti conjunctivochalasis refrattari al trattamento medico e sottoposti a chirurgia di resezione congiuntivale
  3. gruppo di controllo: pazienti sottoposti a chirurgia della retina o della cataratta con congiuntiva ridondante dopo la peritomia

Piano di studio

Questa sezione fornisce i dettagli del piano di studio, compreso il modo in cui lo studio è progettato e ciò che lo studio sta misurando.

Come è strutturato lo studio?

Dettagli di progettazione

  • Prospettive temporali: Prospettiva

Cosa sta misurando lo studio?

Misure di risultato primarie

Misura del risultato
Lasso di tempo
Variazione delle citochine lacrimali misurata mediante ELISA
Lasso di tempo: La lacrima verrà raccolta prima del trattamento, un mese e sei mesi di visite di follow-up
La lacrima verrà raccolta prima del trattamento, un mese e sei mesi di visite di follow-up

Collaboratori e investigatori

Qui è dove troverai le persone e le organizzazioni coinvolte in questo studio.

Sponsor

National Taiwan University Hospital

Investigatori

  • Investigatore principale: Fung-Rong Hu, MD, National Taiwan University Hospital

Studiare le date dei record

Queste date tengono traccia dell'avanzamento della registrazione dello studio e dell'invio dei risultati di sintesi a ClinicalTrials.gov. I record degli studi e i risultati riportati vengono esaminati dalla National Library of Medicine (NLM) per assicurarsi che soddisfino specifici standard di controllo della qualità prima di essere pubblicati sul sito Web pubblico.

Studia le date principali

Inizio studio

1 marzo 2014

Completamento primario (Anticipato)

1 dicembre 2017

Completamento dello studio (Anticipato)

1 dicembre 2017

Date di iscrizione allo studio

Primo inviato

27 maggio 2014

Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità

9 giugno 2014

Primo Inserito (Stima)

10 giugno 2014

Aggiornamenti dei record di studio

Ultimo aggiornamento pubblicato (Stima)

24 giugno 2014

Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC

23 giugno 2014

Ultimo verificato

1 giugno 2014

Maggiori informazioni

Termini relativi a questo studio

Termini MeSH pertinenti aggiuntivi

Altri numeri di identificazione dello studio

  • 201312127RINB

Queste informazioni sono state recuperate direttamente dal sito web clinicaltrials.gov senza alcuna modifica. In caso di richieste di modifica, rimozione o aggiornamento dei dettagli dello studio, contattare register@clinicaltrials.gov. Non appena verrà implementata una modifica su clinicaltrials.gov, questa verrà aggiornata automaticamente anche sul nostro sito web .

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