El papel de las citocinas y los mastocitos en la patogenia de SLK, conjuntivocalasia y ojo seco
23 de junio de 2014 actualizado por: National Taiwan University Hospital
El papel de las citocinas y los mastocitos en la patogenia de las enfermedades inflamatorias de la superficie ocular, incluidas la queratoconjuntivitis límbica superior, la conjuntivocalasia y el ojo seco
Los objetivos específicos de los estudios de los investigadores son los siguientes:
- Para recolectar muestras de lágrimas de pacientes con diferentes trastornos de la superficie ocular, incluidos SLK, conjuntivochalasis y queratoconjuntivitis sicca (KCS).
- Evaluar la expresión diferencial de citoquinas lagrimales y valores de pH entre diferentes trastornos de la superficie ocular.
- Recoger las muestras conjuntivales quirúrgicas de los pacientes con SLK y conjuntivochalasis.
- Evaluar los factores que inducen la migración de mastocitos y cómo se activan los mastocitos en SLK a través de muestras quirúrgicas y fibroblastos cultivados.
Descripción general del estudio
Estado
Desconocido
Descripción detallada
Detección de varios niveles de citocinas en lágrimas en pacientes con queratoconjuntivitis límbica superior, conjuntivocalasia y queratoconjuntivitis sicca
- Las muestras de lágrimas basales se recogerán de forma atraumática del menisco lagrimal inferolateral utilizando tubos capilares de vidrio. Se tiene cuidado de evitar tocar la superficie de la córnea y la conjuntiva. Se obtienen aproximadamente 30 μl de muestras de lágrimas y luego se centrifugan las muestras durante 10 minutos a 1500 rpm (225 g). Las muestras de lágrimas se colocan en microtubos (Eppendorf) y se almacenan a -70°C. Los niveles de IL-1β, IL-17, TNF-α e IFN-γ se medirán mediante kits de ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas.
- Método de tinción inmunohistoquímica para muestras conjuntivales: la conjuntiva se recolectará de pacientes con SLK y conjuntivocalasia que recibieron resección conjuntival bulbar superior e inferior según sea necesario. La conjuntiva redundante observada después de la peritomía durante la cirugía de cataratas o retina se extirpará para que sirva como control normal. Las muestras conjuntivales de todos los grupos de SLK, conjuntivocalasia y control se envían al departamento de patología para la inclusión en parafina de rutina y la tinción con hematoxilina y eosina. Las muestras quirúrgicas se colocan en paraformaldehído al 4 % a 4 °C durante uno o dos días y luego se almacenan en tampón de fosfato de sodio al 1 % a 4 °C. Luego se incrustan en parafina. Para mejorar la adhesión del tejido, se montan secciones de 5 micrómetros de espesor en portaobjetos de vidrio pretratados con Vectabond (Vector Laboratories, Burlingame, California, EE. UU.). Las secciones de parafina se desparafinan, se rehidratan y se lavan con solución salina tamponada con fosfato (PBS; pH 7,4). La recuperación del antígeno se realiza sumergiendo las secciones en un baño de agua con tripsina al 0,1 % durante 15 minutos. La actividad de la peroxidasa endógena se extingue colocando los portaobjetos en peróxido de hidrógeno al 3%. Luego, los portaobjetos se bloquean con suero y luego se incuban con anticuerpos primarios. Los anticuerpos primarios (TSL y SCF) se incuban durante la noche a 4 °C. Posteriormente, se realiza la incubación con el anticuerpo secundario conjugado con biotina a temperatura ambiente durante 60 min. Además, la incubación con complejo de peroxidasa de rábano picante avidina-biotina también se realiza a temperatura ambiente durante 30 minutos utilizando el kit Vectastain elite® ABC (Vector labs, CA, EE. UU.). La ubicación donde se une la enzima se visualizará mediante la adición del sustrato 3,3'-diaminobencidina (DAKO, CA, EE. UU.), un cromógeno que produce un precipitado insoluble de color marrón. A continuación, las secciones se contrastan con hematoxilina, a lo que sigue la deshidratación y el montaje con Vecta Mount Mounting medium para evaluar los portaobjetos.
Tipo de estudio
De observación
Inscripción (Anticipado)
105
Contactos y Ubicaciones
Esta sección proporciona los datos de contacto de quienes realizan el estudio e información sobre dónde se lleva a cabo este estudio.
Ubicaciones de estudio
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Zhongzheng Dist
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Taipei, Zhongzheng Dist, Taiwán, 100
- National Taiwan University Hospital
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Criterios de participación
Los investigadores buscan personas que se ajusten a una determinada descripción, denominada criterio de elegibilidad. Algunos ejemplos de estos criterios son el estado de salud general de una persona o tratamientos previos.
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
20 años a 85 años (Adulto, Adulto Mayor)
Acepta Voluntarios Saludables
No
Géneros elegibles para el estudio
Todos
Método de muestreo
Muestra no probabilística
Población de estudio
Parte I. Muestra de lágrima diagnosticada como pacientes con queratoconjuntivitis límbica superior (SLK) o conjuntivocalasia o queratoconjuntivitis sicca (KCS) Parte II.
Grupo de enfermedad de muestra de conjuntiva quirúrgica: SLK o pacientes con conjuntivocalasia refractarios al tratamiento médico y sometidos a cirugía de resección conjuntival
Descripción
• Parte I. Muestra de lágrimas
Criterios de inclusión:
- edad 20-85 años
- diagnosticados como pacientes de queratoconjuntivitis límbica superior (SLK) o conjuntivocalasia o queratoconjuntivitis sicca (KCS)
Criterio de exclusión:
- el embarazo
cualquier cirugía ocular dentro de los 3 meses
- Parte II. Muestra de conjuntiva quirúrgica
Criterios de inclusión:
- edad 20-85 años
- grupo de enfermedades: SLK o pacientes con conjuntivocalasia refractarios al tratamiento médico y sometidos a cirugía de resección conjuntival
- grupo de control: pacientes sometidos a cirugía de retina o cataratas con conjuntiva redundante después de la peritomía
Plan de estudios
Esta sección proporciona detalles del plan de estudio, incluido cómo está diseñado el estudio y qué mide el estudio.
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Perspectivas temporales: Futuro
¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Periodo de tiempo |
|---|---|
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Cambio de citoquinas lagrimales medido por ELISA
Periodo de tiempo: Se recolectarán lágrimas antes del tratamiento, visitas de seguimiento al mes y a los seis meses
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Se recolectarán lágrimas antes del tratamiento, visitas de seguimiento al mes y a los seis meses
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Colaboradores e Investigadores
Aquí es donde encontrará personas y organizaciones involucradas en este estudio.
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: Fung-Rong Hu, MD, National Taiwan University Hospital
Fechas de registro del estudio
Estas fechas rastrean el progreso del registro del estudio y los envíos de resultados resumidos a ClinicalTrials.gov. Los registros del estudio y los resultados informados son revisados por la Biblioteca Nacional de Medicina (NLM) para asegurarse de que cumplan con los estándares de control de calidad específicos antes de publicarlos en el sitio web público.
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio
1 de marzo de 2014
Finalización primaria (Anticipado)
1 de diciembre de 2017
Finalización del estudio (Anticipado)
1 de diciembre de 2017
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
27 de mayo de 2014
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
9 de junio de 2014
Publicado por primera vez (Estimar)
10 de junio de 2014
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Estimar)
24 de junio de 2014
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
23 de junio de 2014
Última verificación
1 de junio de 2014
Más información
Términos relacionados con este estudio
Términos MeSH relevantes adicionales
Otros números de identificación del estudio
- 201312127RINB
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