Rola cytokin i komórek tucznych w patogenezie SLK, spojówki i zespołu suchego oka
23 czerwca 2014 zaktualizowane przez: National Taiwan University Hospital
Rola cytokin i komórek tucznych w patogenezie chorób zapalnych powierzchni oka, w tym zapalenia rogówki i spojówki kończyn górnych, zapalenia spojówek i zespołu suchego oka
Szczegółowe cele badań badaczy są następujące:
- Pobieranie próbek łez od pacjentów z różnymi zaburzeniami powierzchni oka, w tym SLK, zapaleniem spojówek i suchym zapaleniem rogówki i spojówki (KCS).
- Aby ocenić zróżnicowaną ekspresję cytokin łzowych i wartości pH między różnymi zaburzeniami powierzchni oka.
- Pobieranie chirurgicznych próbek spojówek od pacjentów z SLK i spojówkami.
- Ocena czynników indukujących migrację komórek tucznych i sposobu aktywacji komórek tucznych w SLK za pomocą próbek chirurgicznych i hodowanych fibroblastów.
Przegląd badań
Status
Nieznany
Szczegółowy opis
Wykrywanie różnych poziomów cytokin łzowych u pacjentów z zapaleniem rogówki i spojówki kończyn górnych, zapaleniem spojówek i suchym zapaleniem rogówki i spojówki
- Podstawowe próbki łez zostaną pobrane atraumatycznie z dolno-bocznej łąkotki łzowej za pomocą szklanych rurek kapilarnych. Należy uważać, aby nie dotknąć powierzchni rogówki i spojówki. Otrzymuje się około 30 μl próbek łez, które następnie wiruje się przez 10 minut przy 1500 obr./min (225 g). Próbki łez umieszcza się w mikroprobówkach (Eppendorf) i przechowuje w temperaturze -70°C. Poziomy IL-1β, IL-17, TNF-α i IFN-γ będą mierzone za pomocą zestawów testów immunoenzymatycznych.
- Immunohistochemiczna metoda barwienia próbek spojówek - Spojówka zostanie pobrana od pacjentów z SLK i spojówkami, którzy otrzymali górną i dolną resekcję spojówki opuszkowej w razie potrzeby. Zbędna spojówka stwierdzona po perytomii podczas operacji zaćmy lub siatkówki zostanie wycięta, aby służyć jako normalna kontrola. Próbki spojówek wszystkich SLK, spojówek i grup kontrolnych są wysyłane do oddziału patologii w celu rutynowego zatapiania w parafinie i barwienia hematoksyliną i eozyną. Próbki chirurgiczne umieszcza się w 4% paraformaldehydzie w 4°C na jeden do dwóch dni, a następnie przechowuje w 1% buforze fosforanu sodu w 4°C. Następnie zatapiane są w parafinie. Aby zwiększyć adhezję tkanki, skrawki o grubości 5 mikrometrów umieszcza się na szklanych szkiełkach wstępnie traktowanych Vectabond (Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornia, USA). Skrawki parafinowe odparafinowano, ponownie uwodniono i przemyto solą fizjologiczną buforowaną fosforanami (PBS; pH 7,4). Odzyskiwanie antygenu przeprowadza się przez zanurzenie skrawków w 0,1% trypsynie w łaźni wodnej na 15 minut. Endogenną aktywność peroksydazy wygaszono przez umieszczenie szkiełek w 3% nadtlenku wodoru. Szkiełka są następnie blokowane surowicą, a następnie inkubowane z pierwszorzędowymi przeciwciałami. Pierwotne przeciwciała (TSL i SCF) inkubuje się przez noc w temperaturze 4°C. Następnie przeprowadza się inkubację z drugorzędowym przeciwciałem skoniugowanym z biotyną w temperaturze pokojowej przez 60 minut. Następnie przeprowadza się następnie inkubację z kompleksem peroksydazy chrzanowej awidyna-biotyna w temperaturze pokojowej przez 30 minut przy użyciu zestawu Vectastain elite® ABC (Vector labs, CA USA). Miejsce wiązania enzymu będzie wizualizowane przez dodanie substratu 3,3'-diaminobenzydyny (DAKO, CA, USA), chromogenu, który wytwarza brązowy nierozpuszczalny osad. Następnie skrawki barwiono kontrastowo hematoksyliną, po czym odwadniano i zamykano za pomocą Vecta Mount Mounting medium do oceny szkiełek.
Typ studiów
Obserwacyjny
Zapisy (Oczekiwany)
105
Kontakty i lokalizacje
Ta sekcja zawiera dane kontaktowe osób prowadzących badanie oraz informacje o tym, gdzie badanie jest przeprowadzane.
Lokalizacje studiów
-
-
Zhongzheng Dist
-
Taipei, Zhongzheng Dist, Tajwan, 100
- National Taiwan University Hospital
-
-
Kryteria uczestnictwa
Badacze szukają osób, które pasują do określonego opisu, zwanego kryteriami kwalifikacyjnymi. Niektóre przykłady tych kryteriów to ogólny stan zdrowia danej osoby lub wcześniejsze leczenie.
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
20 lat do 85 lat (Dorosły, Starszy dorosły)
Akceptuje zdrowych ochotników
Nie
Płeć kwalifikująca się do nauki
Wszystko
Metoda próbkowania
Próbka bez prawdopodobieństwa
Badana populacja
Część I. Próbka łez rozpoznana u pacjentów z zapaleniem rogówki i spojówki kończyn górnych (SLK) lub spojówek lub suchym zapaleniem rogówki i spojówki (KCS) Część II.
Grupa chorób pobranych chirurgicznie z próbki spojówki: pacjenci z SLK lub z zapaleniem spojówek oporni na leczenie i poddawani zabiegowi resekcji spojówki
Opis
• Część I. Próbka łez
Kryteria przyjęcia:
- wiek 20-85 lat
- zdiagnozowanych jako pacjenci z zapaleniem rogówki i spojówki kończyn górnych (SLK) lub spojówek lub suchym zapaleniem rogówki i spojówki (KCS)
Kryteria wyłączenia:
- ciąża
jakąkolwiek operację okulistyczną w ciągu 3 miesięcy
- Część druga. Chirurgiczny preparat spojówki
Kryteria przyjęcia:
- wiek 20-85 lat
- grupa chorobowa: pacjenci z SLK lub spojówkami oporni na leczenie farmakologiczne i poddani zabiegowi resekcji spojówki
- grupa kontrolna: chorzy po operacji siatkówki lub zaćmy ze zbędną spojówką po peritomii
Plan studiów
Ta sekcja zawiera szczegółowe informacje na temat planu badania, w tym sposób zaprojektowania badania i jego pomiary.
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Perspektywy czasowe: Spodziewany
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Ramy czasowe |
|---|---|
|
Zmiana cytokin łzowych mierzona metodą ELISA
Ramy czasowe: Łzy będą zbierane przed leczeniem, miesięcznymi i sześciomiesięcznymi wizytami kontrolnymi
|
Łzy będą zbierane przed leczeniem, miesięcznymi i sześciomiesięcznymi wizytami kontrolnymi
|
Współpracownicy i badacze
Tutaj znajdziesz osoby i organizacje zaangażowane w to badanie.
Śledczy
- Główny śledczy: Fung-Rong Hu, MD, National Taiwan University Hospital
Daty zapisu na studia
Daty te śledzą postęp w przesyłaniu rekordów badań i podsumowań wyników do ClinicalTrials.gov. Zapisy badań i zgłoszone wyniki są przeglądane przez National Library of Medicine (NLM), aby upewnić się, że spełniają określone standardy kontroli jakości, zanim zostaną opublikowane na publicznej stronie internetowej.
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów
1 marca 2014
Zakończenie podstawowe (Oczekiwany)
1 grudnia 2017
Ukończenie studiów (Oczekiwany)
1 grudnia 2017
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
27 maja 2014
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
9 czerwca 2014
Pierwszy wysłany (Oszacować)
10 czerwca 2014
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Oszacować)
24 czerwca 2014
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
23 czerwca 2014
Ostatnia weryfikacja
1 czerwca 2014
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
- 201312127RINB
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .