Роль цитокинов и тучных клеток в патогенезе СЛК, конъюнктивохалазиса и синдрома сухого глаза
23 июня 2014 г. обновлено: National Taiwan University Hospital
Роль цитокинов и тучных клеток в патогенезе воспалительных заболеваний поверхности глаза, включая кератоконъюнктивит верхних лимбов, конъюнктивохалазис и сухость глаз
Конкретные цели исследований исследователей заключаются в следующем:
- Собрать образцы слезы у пациентов с различными заболеваниями глазной поверхности, включая SLK, конъюнктивохалазис и сухой кератоконъюнктивит (СКК).
- Оценить дифференциальную экспрессию цитокинов слезы и значения рН при различных заболеваниях глазной поверхности.
- Собрать хирургические образцы конъюнктивы у пациентов с СЛК и конъюнктивохалазисом.
- Оценить факторы, вызывающие миграцию тучных клеток, и то, как тучные клетки активируются в SLK, с помощью хирургических образцов и культивируемых фибробластов.
Обзор исследования
Статус
Неизвестный
Подробное описание
Выявление различных уровней слезных цитокинов у пациентов с верхнелимбическим кератоконъюнктивитом, конъюнктивохалазисом и сухим кератоконъюнктивитом
- Образцы базальной слезы будут собираться атравматически из нижнелатерального слезного мениска с использованием стеклянных капиллярных трубок. Следует соблюдать осторожность, чтобы не касаться поверхности роговицы и конъюнктивы. Получают приблизительно 30 мкл образцов слезы, а затем образцы центрифугируют в течение 10 минут при 1500 об/мин (225g). Образцы слезы помещают в микропробирки (Эппендорф) и хранят при -70°С. Уровни IL-1β, IL-17, TNF-α и IFN-γ будут измеряться с помощью наборов для твердофазного иммуноферментного анализа.
- Метод иммуногистохимического окрашивания образцов конъюнктивы. Конъюнктива будет собираться у пациентов с SLK и конъюнктивохалазисом, которым по мере необходимости выполнялась верхняя и нижняя бульбарная резекция конъюнктивы. Излишняя конъюнктива, отмеченная после перитомии во время операции по удалению катаракты или сетчатки, будет иссечена, чтобы служить нормальным контролем. Образцы конъюнктивы всех групп SLK, конъюнктивохалазиса и контрольной группы отправляются в отделение патологии для рутинной заливки парафином и окрашивания гематоксилином и эозином. Хирургические образцы помещают в 4% параформальдегид при 4°С на один-два дня, а затем хранят в 1% фосфатно-натриевом буфере при 4°С. Затем их заливают парафином. Для улучшения адгезии тканей срезы толщиной 5 микрометров монтируют на предметные стекла, предварительно обработанные Vectabond (Vector Laboratories, Берлингейм, Калифорния, США). Парафиновые срезы депарафинизируют, регидратируют и промывают фосфатно-солевым буфером (PBS, pH 7,4). Выделение антигена проводят путем погружения срезов в 0,1% раствор трипсина на водяной бане на 15 мин. Активность эндогенной пероксидазы подавляют, помещая предметные стекла в 3% перекись водорода. Затем предметные стекла блокируют сывороткой с последующей инкубацией с первичными антителами. Первичные антитела (TSL и SCF) инкубируют в течение ночи при 4°C. После этого проводят инкубацию с вторичным антителом, конъюгированным с биотином, при комнатной температуре в течение 60 мин. Далее проводят инкубацию с авидин-биотинпероксидазным комплексом хрена также при комнатной температуре в течение 30 мин с использованием набора Vectatain Elite® ABC (Vector labs, CA USA). Место, где связывается фермент, будет визуализировано добавлением субстрата 3,3'-диаминобензидина (DAKO, Калифорния, США), хромогена, который дает коричневый нерастворимый осадок. Затем срезы докрашивали гематоксилином, после чего проводили дегидратацию и фиксацию с помощью среды Vecta Mount. Для оценки предметных стекол использовали монтажную среду.
Тип исследования
Наблюдательный
Регистрация (Ожидаемый)
105
Контакты и местонахождение
В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.
Места учебы
-
-
Zhongzheng Dist
-
Taipei, Zhongzheng Dist, Тайвань, 100
- National Taiwan University Hospital
-
-
Критерии участия
Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
От 20 лет до 85 лет (Взрослый, Пожилой взрослый)
Принимает здоровых добровольцев
Нет
Полы, имеющие право на обучение
Все
Метод выборки
Невероятностная выборка
Исследуемая популяция
Часть I. Образец слезы, диагностированный у пациентов с верхним лимбическим кератоконъюнктивитом (SLK), конъюнктивохалазисом или сухим кератоконъюнктивитом (KCS). Часть II.
Группа хирургических заболеваний конъюнктивы: пациенты с SLK или конъюнктивохалазисом, рефрактерные к медикаментозному лечению и перенесшие хирургическую резекцию конъюнктивы.
Описание
• Часть I. Образец слезы
Критерии включения:
- возраст 20-85 лет
- диагностирован у пациентов с верхним лимбическим кератоконъюнктивитом (SLK) или конъюнктивохалазисом или сухим кератоконъюнктивитом (KCS)
Критерий исключения:
- беременность
любые глазные операции в течение 3 месяцев
- Часть II. Хирургический образец конъюнктивы
Критерии включения:
- возраст 20-85 лет
- группа заболевания: пациенты с SLK или конъюнктивохалазисом, рефрактерные к медикаментозному лечению и перенесшие хирургическую резекцию конъюнктивы
- контрольная группа: пациенты, перенесшие операцию на сетчатке или катаракте с избыточной конъюнктивой после перитомии
Учебный план
В этом разделе представлена подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Временные перспективы: Перспективный
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Временное ограничение |
|---|---|
|
Изменение цитокинов слезы, измеренное с помощью ELISA
Временное ограничение: Слезы будут собираться до лечения, через один месяц и через шесть месяцев после посещения врача.
|
Слезы будут собираться до лечения, через один месяц и через шесть месяцев после посещения врача.
|
Соавторы и исследователи
Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.
Следователи
- Главный следователь: Fung-Rong Hu, MD, National Taiwan University Hospital
Даты записи исследования
Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.
Изучение основных дат
Начало исследования
1 марта 2014 г.
Первичное завершение (Ожидаемый)
1 декабря 2017 г.
Завершение исследования (Ожидаемый)
1 декабря 2017 г.
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
27 мая 2014 г.
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
9 июня 2014 г.
Первый опубликованный (Оценивать)
10 июня 2014 г.
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Оценивать)
24 июня 2014 г.
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
23 июня 2014 г.
Последняя проверка
1 июня 2014 г.
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- 201312127RINB
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .