Allergia eri kalalajeja vastaan ​​kalalle allergisilla lapsilla ja nuorilla (TRO-FAST)

Esittely:

Kalalla on tärkeä rooli ihmisravinnoissa arvokkaana erittäin assimiloituneiden proteiinien lähteenä, ja kalan kulutus kasvaa kaikkialla maailmassa. Kalaallergia on yksi yleisimmistä ruoka-aineallergioista yhdessä maidon, kananmunan, pähkinöiden, maapähkinöiden, hedelmien, vehnän, soijan ja äyriäisten kanssa. Se on yleisempää rannikkomaissa ja maissa, joilla on perinteitä kalateollisuudessa ja joissa kalalla on tärkeä rooli ruokaperinteissä. Tämä on tilanne Pohjois-Norjassa, jossa kalastus ja kalateollisuus ovat olleet tärkein toimeentulokeino ja kala tärkeä osa ruokaa. Kala-allergia on erityisen yleinen lapsilla ja nuorilla aikuisilla. Kalaallergiaan liittyvät oireet vaihtelevat lievistä oireista anafylaksiaan. Suurin osa kalaallergisista potilaista välttää kaikkia kalalajeja, ja terveydenhuollon työntekijät neuvovat heitä usein tekemään niin. Kalojen tärkein allergeeni on lihasparvalbumiini, joka kestää lämpöä, kemiallista denaturaatiota ja proteolyyttisiä entsyymejä. Eri kalalajien parvalbumiinien aminohapposekvenssin homologiasta johtuen ristireaktiivisuutta esiintyy.

Kliiniset kokemukset, herkistymistä koskevat tutkimukset ja jotkin avoimet elintarvikehaastetutkimukset osoittavat kuitenkin, että jotkut kala-allergiset potilaat voivat sietää joitain kalalajeja. Tämän tutkimuksen päätarkoituksena on selvittää, missä määrin kalaallergiset lapset ja nuoret sietävät joitain kalalajeja käyttämällä DBPCFC:tä kultaisena standardina ruoka-aineallergioiden diagnosoinnissa ja siten välttämään tarpeettomia ruokarajoituksia ruokavaliossaan.

Elintarviketeollisuus merkitsee usein tuotteisiinsa "sisältää allergeeneja", koska niillä ei ole tietoa allergisten reaktioiden kynnysannoksista. Elintarvikkeiden tarpeettomat merkinnät vähentävät ruoka-allergisten potilaiden ruokavalion vaihtelua. Tämän tutkimuksen toinen tarkoitus on löytää minimaalinen aiheuttava annos, johon 10 % osallistujista saa allergisen reaktion, ja siten edistää elintarvikkeiden tarkempaa merkitsemistä.

Menetelmä:

DBPCFC on kultainen standardi ruoka-aineallergioiden diagnosoinnissa. Kalan makua ja hajua on vaikea peittää standardoidussa testiruoassa, jolla on hyvä maku ja koostumus. Erityisen vaikeaa se on lasten kanssa, jotka harvemmin syövät huonomakuista ruokaa ja joiden testiruoan määrä on rajoitettu.

Olemme yhteistyössä Norjan Elintarviketutkimuslaitoksen kanssa valmistaneet kuivattuja kalajauheita turskasta, lohesta ja makrillista. Pakastetut fileet on keitetty, kuivattu ja niistä on tehty jauheita. Jauheiden mikrobiologinen ja proteiinipitoisuus on tarkastettu. Toimenpide sisältää mahdollisimman paljon rasvaa poistamista. Jauheet säilytetään pakastimessa -20°C:n lämpötilassa. Tilavuus on pienempi noin 80 % verrattuna keitettyyn kalaan.

Yhteistyössä Manchesterin yliopiston Manchester Institute of Biotechnology -instituutin Molecular Allergology -ryhmän professori Clare Millsin kanssa kalajauheet laitetaan suklaajälkiruoaksi EuroPrevallin ruoka-allergiatutkimuksessa käytetyn reseptin perusteella. Suklaajälkiruoat valmistetaan Manchesterin yliopistossa sekä laaduntarkastuksia allergeenipitoisuudesta, parvalbumiinipitoisuudesta, mikrobiologiasta ja kalan lajikkeista. Maun ja hajun naamiointi testataan sensorisessa testipaneelissa.

Osallistujien rekrytointi:

Mukaan kutsutaan Pohjois-Norjan yliopistollisen sairaalan lasten ja nuorten poliklinikalla käyneitä 5-20-vuotiaita, kala-allergioita ja kalaherkistyneitä potilaat. Myös kalalle herkistyneet potilaat, jotka eivät ole koskaan syöneet kalaa, ovat tervetulleita. Lisäksi kutsutaan osallistumaan potilaat, jotka on rekisteröity Pohjois-Norjan yliopistollisen sairaalan allergologian laboratorioon vuodesta 2008 lähtien turskaa vastaan, joita ei ole vielä noudettu poliklinikalta. Laboratorio on alueen ainoa allergologinen laboratorio, josta osallistujat rekrytoidaan.

Tutkimus ennen sisällyttämistä:

Kaikille potilaille, jotka antavat suostumuksensa osallistua, tehdään kliininen tutkimus, mukaan lukien spirometria, ennen osallistumista kelpoisuuden varmistamiseksi. Kliininen tutkimus sisältää painon ja pituuden mittaukset, sydämen ja keuhkojen kuuntelun, ihon, sidekalvon, nenän ja suuontelon tutkimuksen.

Erityistä huomiota kiinnitetään hallitsemattomaan astmaan ja ekseemaan sekä optimaalisen hoidon varmistamiseen ennen sisällyttämistä. Siitepölyallergiset potilaat eivät joudu ruokahaasteisiin siitepölykauden aikana.

Spesifisen immunoglobuliini E:n (IgE) mittaus seerumissa:

Kaikilta osallistujilta mitataan seerumin spesifinen IgE seuraavia allergeeneja vastaan:

1. Fx5 (muna, maito, turska, vehnä, soija, maapähkinä)
2. Inhalaatiopaneeli 6 (koivu, timotei, mukijuuri, alternaria, kladosporium)
3. Inhalaatiopaneeli 7 (kissa, hevonen, koira, pölypunkki, kani)
4. Gad c1, f426 (parvalbumiini turskasta)
5. Cyp c1, f355 (karpin parvalbumiini)
6. Lohi, f41
7. Makrilli, f206
8. Pallas, f303
9. Pollock, f413
10. Kolja, f42
11. Silli, f205
12. Punakampela, 4254
13. Tonnikala, f40
14. Katkarapu, f24
15. f351 (rekombinantti katkaraputropomyosiini)

Kyselylomake:

Vanhemmat vastaavat allergiatutkimuksen kyselyyn. Kyselylomake käännetään norjaksi ja käytetään sähköistä kyselyä. Vanhemmat vastaavat kyselyyn ensimmäisen haastepäivän aikana. Kyselylomaketta täydennetään kala-allergiaa koskevilla kysymyksillä.

Double Blind Placebo Controlled Food Challenge turskan, lohen, makrillin ja lumelääkkeen kanssa:

Kaikille osallistujille suoritetaan DBPCFC turskan, lohen, makrillin ja lumelääkevalmisteen kanssa satunnaistetussa järjestyksessä, naamioituna suklaajälkiruoaksi neljänä erillisenä haastepäivänä siten, että jokaisen altistuspäivän välillä on vähintään 6 viikkoa. Osallistujat, jotka ovat kokeneet anafylaksia, todennettu ja hoidettu sairaalassa, eivät altistu anafylaksia saaneille lajeille. Oireet kirjataan kliinisten ilmenemismuotojen muistiinpanolevylle Etelä-Manchesterin yliopistollisen sairaalan protokollaan, jossa oireet luokitellaan ja määritellyt lopetuskriteerit. Proteiiniannokset perustuvat kokemuksiin EuroPrevall-tutkimuksesta DBPCFC:llä turskan kanssa:

3 µg, 600 µg, 12 mg, 120 mg ja 1 g DBPCFC:lle

Avoimet haasteet turskan ja/tai lohen ja makrillin kanssa:

Osallistujat, joilla ei ole allergisia reaktioita DBPCFC:n jälkeen turskan, lohen ja makrillin kanssa, altistetaan avoimelle altistukselle 2 g:lla, 6 g:lla ja 12 g:lla proteiinia, joka toimi keitettynä kalana lajeilla, jotka antoivat negatiivisen DBPCFC:n. Avoimet haasteet tehdään eri päivinä satunnaiskoodin rikkomisen jälkeen.

Lääkityksen lopettaminen ennen DBPCFC:tä ja avoimet haasteet:

Systeeminen kortikosteroidihoito lopetetaan vähintään viikkoa ennen altistusta. Antihistamiinihoito lopetetaan vähintään 72 tuntia ennen haasteita. Lyhytvaikutteiset β-2-agonistit lopetetaan vähintään 6 tuntia ennen altistusta ja pitkävaikutteiset β-2-agonistit vähintään 24 tuntia ennen altistusta. Osallistujat saavat jatkaa inhaloitavien kortikosteroidien ja leukotrieenireseptorin antagonistien käyttöä.

DBPCFC:n lykkääminen ja avoimet haasteet:

Haasteita lykätään, jos osallistujilla on jatkuvia infektioita, jatkuvia allergisia reaktioita, hallitsematonta ekseemaa tai hallitsematonta astmaa. Siitepölyallergiasta kärsiviä ei haastateta siitepölykauden aikana.

Allergisten reaktioiden tarkkailu ja hoito:

Kaikki kalahaasteet suoritetaan Pohjois-Norjan yliopistollisen sairaalan tutkimusyksikössä syyskuusta 2014 helmikuuhun 2015. Kukin haastepäivä haastaa kaksi osallistujaa ja yksi sokeutunut tutkimussairaanhoitaja tarkkailee kaikkia osallistujia. Sokoimaton henkilökunta valmistaa testiateriat joka aamu. Yksi sokeutunut lääkäri tutkii osallistujat ennen haasteita, niiden aikana ja jälkeen ja päättää, ovatko haasteet positiivisia vai negatiivisia. Haasteet loppuvat, jos osallistujilla ilmenee objektiivisia merkkejä allergisista reaktioista. Pysäytyskriteerit on ennalta määritetty. Osallistujia tarkkaillaan sairaalassa vähintään kaksi tuntia haasteiden lopettamisen jälkeen. Allergiset ja anafylaktiset reaktiot hoidetaan Euroopan allergologian ja kliinisen immunologian akatemian anafylaksiaa koskevan kannanoton mukaan. Sokeutunut tutkimussairaanhoitaja ottaa osallistujiin yhteyttä puhelimitse seuraavana päivänä kotiutumisen jälkeisten myöhäisten reaktioiden kirjaamiseksi.