Аллергия на различные виды рыб у детей и подростков с аллергией на рыбу (TRO-FAST)

Вступление:

Рыба играет важную роль в питании человека, являясь ценным источником высокоусвояемых белков, и потребление рыбы растет во всем мире. Аллергия на рыбу является одной из наиболее распространенных пищевых аллергий наряду с молоком, яйцами, орехами, арахисом, фруктами, пшеницей, соей и морепродуктами. Чаще встречается в прибрежных странах и странах с традициями рыбной промышленности, где рыба играет важную роль в пищевых традициях. Такова ситуация в Северной Норвегии, где рыболовство и рыбная промышленность были самым важным способом зарабатывать на жизнь, а рыба составляла важную часть пищи. Аллергия на рыбу особенно часто встречается у детей и молодых людей. Симптомы, связанные с аллергией на рыбу, варьируются от легких симптомов до анафилаксии. Большинство пациентов с аллергией на рыбу избегают всех видов рыбы, и медицинские работники часто советуют им это делать. Основным аллергеном рыб является мышечный парвальбумин, устойчивый к нагреванию, химической денатурации и протеолитическим ферментам. Из-за гомологии аминокислотной последовательности парвальбуминов у разных видов рыб существует перекрестная реактивность.

Тем не менее, клинический опыт, исследования по сенсибилизации и некоторые исследования с открытой пищей показывают, что некоторые пациенты с аллергией на рыбу могут переносить некоторые виды рыб. Основная цель этого исследования - выяснить, в какой степени дети и подростки с аллергией на рыбу могут переносить некоторые виды рыбы, используя DBPCFC в качестве золотого стандарта в диагностике пищевой аллергии, и тем самым избежать ненужных пищевых ограничений в своем рационе.

Пищевая промышленность часто маркирует свои продукты как «основной аллерген», потому что у них нет информации о пороговых дозах для аллергических реакций. Излишняя маркировка продуктов питания приводит к меньшему разнообразию рациона питания пациентов с пищевой аллергией. Другая цель этого исследования — найти минимальную вызывающую дозу, на которую у 10% участников возникает аллергическая реакция, и тем самым способствовать более точной маркировке пищевых продуктов.

Метод:

DBPCFC является золотым стандартом в диагностике пищевой аллергии. Замаскировать вкус и запах рыбы в стандартизированном испытательном корме с хорошим вкусом и консистенцией сложно. Особенно тяжело приходится детям, которые менее склонны к употреблению пищи с неприятным вкусом, а объем тестовой пищи, с которым они могут справиться, ограничен.

В сотрудничестве с Национальным институтом пищевых исследований Норвегии мы произвели сушеные рыбные порошки из трески, лосося и скумбрии. Замороженное филе сварили, высушили и превратили в порошок. Порошки были проверены на микробиологический состав и содержание белка. Процедура предполагает удаление как можно большего количества жира. Порошки хранят в морозильной камере при температуре -20°С. Объем уменьшается примерно на 80% по сравнению с приготовленной рыбой.

В сотрудничестве с профессором Клэр Миллс из группы молекулярной аллергологии Манчестерского института биотехнологии Манчестерского университета рыбные порошки добавляют в шоколадный десерт на основе рецепта, использованного в исследовании пищевой аллергии, проведенном EuroPrevall. Производство шоколадных десертов осуществляется в Манчестерском университете вместе с проверкой качества на содержание аллергенов, содержание парвальбумина, микробиологию и видообразование рыбы. Маскировка вкуса и запаха проверяется на сенсорной тестовой панели.

Набор участников:

К участию приглашаются пациенты в возрасте 5-20 лет, имеющие в анамнезе аллергию на рыбу и сенсибилизацию к рыбе, посетившие одну из детских и подростковых амбулаторий при университетской больнице Северной Норвегии. Также приглашаются пациенты с сенсибилизацией к рыбе, которые никогда не ели рыбу. Кроме того, к участию приглашаются пациенты, зарегистрированные с сенсибилизацией против трески в аллергологической лаборатории Университетской больницы Северной Норвегии с 2008 года, которые еще не были взяты из амбулаторной клиники. Лаборатория является единственной аллергологической лабораторией в регионе, откуда набираются участники.

Обследование перед включением:

Все пациенты, давшие согласие на участие, перед включением проходят клиническое обследование, включая спирометрию, для подтверждения соответствия критериям. Клиническое обследование включает измерение веса и роста, аускультацию сердца и легких, осмотр кожи, конъюнктивы, носа и полости рта.

Особое внимание уделяется неконтролируемой астме и экземе и обеспечению оптимального лечения перед включением. Пациенты с аллергией на пыльцу не будут испытывать пищевых проблем в сезон пыльцы.

Измерение специфического иммуноглобулина Е (IgE) в сыворотке:

У всех участников измеряют специфический IgE в сыворотке против следующих аллергенов:

1. Fx5 (яйцо, молоко, треска, пшеница, соя, арахис)
2. Ингаляционная панель 6 (береза, тимофеевка, полынь, альтернария, кладоспориум)
3. Ингаляционная панель 7 (кошка, лошадь, собака, клещ домашней пыли, кролик)
4. Gad c1, f426 (парвальбумин трески)
5. Cyp c1, f355 (парвальбумин карпа)
6. Лосось, f41
7. Скумбрия, f206
8. Палтус, ф303
9. Поллок, f413
10. Пикша, f42
11. Сельдь, f205
12. Камбала,4254
13. Тунец, f40
14. Креветка,f24
15. f351 (рекомбинантный тропомиозин креветки)

Анкета:

Родители отвечают на вопросник для исследований в области аллергии. Анкета переведена на норвежский язык и используется электронный опрос. Родители отвечают на вопросы анкеты в течение первого челлендж-дня. Анкета дополнена вопросами об аллергии на рыбу.

Двойной слепой плацебо-контролируемый пищевой эксперимент с треской, лососем, скумбрией и плацебо:

Все участники проходят DBPCFC с треской, лососем, скумбрией и плацебо в случайном порядке, замаскированным шоколадным десертом, в течение 4 отдельных дней испытания с минимум 6 неделями между каждым днем ​​испытания. Участники, перенесшие анафилаксию, проверенную и пролеченную в больнице, не подвергаются заражению видами, вызвавшими анафилаксию. Симптомы записываются в протокол клинических проявлений на основе протокола Университетской больницы Южного Манчестера с классификацией симптомов и определенными критериями остановки. Дозы белка основаны на опыте исследования EuroPrevall с DBPCFC на треске:

3 мкг, 600 мкг, 12 мг, 120 мг и 1 г для DBPCFC

Открытые испытания с треской и/или лососем и скумбрией:

Участники, у которых не было аллергических реакций после DBPCFC с треской, лососем и скумбрией, подвергались открытому заражению 2 г, 6 г и 12 г белка, подаваемого в виде приготовленной рыбы, с видами, которые дали отрицательный результат DBPCFC. Открытые испытания проводятся в отдельные дни после взлома кода рандомизации.

Прекращение приема лекарств до DBPCFC и открытые испытания:

Системную кортикостероидную терапию прекращают как минимум за неделю до провокации. Лечение антигистаминными препаратами прекращают не менее чем за 72 часа до провокации. Применение агонистов β-2 короткого действия прекращается по крайней мере за 6 часов до провокации, а агонистов β-2 длительного действия - по крайней мере за 24 часа до провокации. Участникам разрешается продолжать ингаляционные кортикостероиды и антагонисты лейкотриеновых рецепторов.

Отсрочка DBPCFC и открытые вызовы:

Испытания откладываются, если у участников есть продолжающиеся инфекции, продолжающиеся аллергические реакции, неконтролируемая экзема или неконтролируемая астма. Участники с аллергией на пыльцу не подвергаются испытаниям в сезон пыльцы.

Наблюдение и лечение аллергических реакций:

Все провокации рыб проводятся в исследовательском центре университетской больницы Северной Норвегии в период с сентября 2014 г. по февраль 2015 г. Двум участникам бросают вызов каждый день испытания, и за всеми участниками наблюдает одна медсестра-исследователь, работающая вслепую. Неослепленные сотрудники готовят пробные блюда каждое утро. Один ослепленный врач осматривает участников до, во время и после испытаний и решает, являются ли испытания положительными или отрицательными. Испытания прекращают, если у участников появляются объективные признаки аллергических реакций. Критерии остановки предопределены. Участников наблюдают в больнице не менее чем через два часа после прекращения испытаний. Аллергические и анафилактические реакции лечат в соответствии с положениями Европейской академии аллергологии и клинической иммунологии Anaphylaxis. На следующий день с участниками связывается ослепленная исследовательская медсестра по телефону, чтобы записать поздние реакции после выписки.