Allergia contro diverse specie di pesci nei bambini e negli adolescenti allergici ai pesci (TRO-FAST)

Introduzione:

I pesci hanno un ruolo importante nell'alimentazione umana fornendo una preziosa fonte di proteine ​​altamente assimilabili e il consumo di pesce è in aumento in tutto il mondo. L'allergia al pesce è una delle allergie alimentari più comuni insieme a latte, uova, noci, arachidi, frutta, grano, soia e frutti di mare. È più comune nei paesi costieri e nei paesi con tradizioni nell'industria ittica e dove il pesce svolge un ruolo importante nelle tradizioni alimentari. Questa è la situazione nella Norvegia settentrionale, dove la pesca e l'industria ittica sono state il modo più importante per guadagnarsi da vivere e il pesce una parte importante del cibo. L'allergia al pesce è particolarmente comune nei bambini e nei giovani adulti. I sintomi correlati all'allergia al pesce variano da sintomi lievi a anafilassi. La maggior parte dei pazienti con allergia ai pesci evita tutte le specie di pesci e gli operatori sanitari spesso consigliano loro di farlo. Il principale allergene nel pesce è una parvalbumina muscolare resistente al calore, alla denaturazione chimica e agli enzimi proteolitici. A causa dell'omologia nella sequenza degli amminoacidi nelle parvalbumine in diverse specie di pesci, esiste una reattività crociata.

Tuttavia, l'esperienza clinica, gli studi sulla sensibilizzazione e alcuni studi open food challenge indicano che alcuni pazienti con allergia ai pesci possono tollerare alcune specie di pesci. Lo scopo principale di questo studio è scoprire fino a che punto i bambini e gli adolescenti allergici ai pesci possono tollerare alcune specie di pesci, utilizzando DBPCFC come gold standard nella diagnosi di allergia alimentare, e quindi evitare inutili restrizioni alimentari nella loro dieta.

L'industria alimentare spesso etichetta i propri prodotti con "contiene principale allergene" perché non dispone di informazioni sulle dosi soglia per le reazioni allergiche. L'etichettatura non necessaria degli alimenti si traduce in una minore variazione nella dieta per i pazienti allergici agli alimenti. Un altro scopo di questo studio è trovare la dose minima stimolante alla quale il 10% dei partecipanti ha una reazione allergica, contribuendo così a un'etichettatura più precisa degli alimenti.

Metodo:

DBPCFC è il gold standard nella diagnosi di allergia alimentare. È difficile camuffare il gusto e l'odore del pesce in un alimento di prova standardizzato con buon gusto e consistenza. È particolarmente difficile con i bambini, che hanno meno probabilità di mangiare cibo di cattivo gusto e dove il volume del cibo di prova che possono gestire è limitato.

In collaborazione con il National Institute of Food Research in Norvegia, abbiamo prodotto polveri di pesce essiccate da merluzzo, salmone e sgombro. I filetti congelati sono stati cotti, essiccati e ridotti in polvere. Le polveri sono state controllate per contenuto microbiologico e contenuto proteico. La procedura prevede la rimozione di quanto più grasso possibile. Le polveri vengono conservate in un congelatore con una temperatura di -20°C. Il volume è diminuito di circa l'80% rispetto al pesce cotto.

In collaborazione con la professoressa Clare Mills del gruppo Molecular Allergology, Manchester Institute of Biotechnology, The University of Manchester, le polveri di pesce vengono inserite in un dessert al cioccolato basato su una ricetta utilizzata in uno studio EuroPrevall sulle allergie alimentari. La produzione di dessert al cioccolato viene eseguita presso l'Università di Manchester insieme al controllo di qualità per quanto riguarda il contenuto di allergeni, il contenuto di parvalbumina, la microbiologia e la speciazione del pesce. Il travestimento di gusto e olfatto viene testato in un pannello di prova sensoriale.

Reclutamento dei partecipanti:

Sono invitati a partecipare i pazienti di età compresa tra 5 e 20 anni, con una storia di allergia al pesce e sensibilizzazione al pesce che hanno visitato una delle cliniche ambulatoriali per bambini e adolescenti presso l'ospedale universitario della Norvegia settentrionale. Sono invitati anche i pazienti sensibilizzati al pesce che non hanno mai mangiato pesce. Inoltre, i pazienti registrati con sensibilizzazione contro il merluzzo presso il laboratorio di allergologia, University Hospital of Northern Norway dal 2008, che non erano già stati prelevati da una clinica ambulatoriale sono invitati a partecipare. Il laboratorio è l'unico laboratorio di allergologia della regione da cui vengono reclutati i partecipanti.

Esame prima dell'inclusione:

Tutti i pazienti che danno il loro consenso a partecipare vengono sottoposti a esame clinico, inclusa la spirometria, prima dell'inclusione per garantire l'idoneità. L'esame clinico comprende le misurazioni del peso e dell'altezza, l'auscultazione del cuore e dei polmoni, l'esame della pelle, della congiuntiva, del naso e del cavo orale.

Particolare attenzione viene data all'asma e all'eczema non controllati e per garantire un trattamento ottimizzato prima dell'inclusione. I pazienti allergici ai pollini non subiranno sfide alimentari durante la stagione dei pollini.

Dosaggio dell'immunoglobulina E specifica (IgE) nel siero:

In tutti i partecipanti vengono misurate le IgE specifiche nel siero contro i seguenti allergeni:

1. Fx5 (Uovo, latte, merluzzo, grano, soia, arachidi)
2. Pannello inalatorio 6 (Betulla, timoteo, artemisia, alternaria, cladosporium)
3. Pannello di inalazione 7(Gatto, cavallo, cane, acaro della polvere, coniglio)
4. Gad c1, f426 (parvalbumina da cod)
5. Cyp c1, f355 (Parvalbumina da carpa)
6. Salmone, f41
7. Sgombro, f206
8. Halibut, f303
9. Pollock, f413
10. Eglefino, f42
11. Aringhe, f205
12. Passera di mare, 4254
13. Tonno, f40
14. Gamberi,f24
15. f351 (tropomiosina di gambero ricombinante)

Questionario:

I genitori rispondono a un questionario per la ricerca in allergia. Il questionario è tradotto in norvegese e viene utilizzato un sondaggio elettronico. I genitori rispondono al questionario durante il primo giorno di sfida. Il questionario è ampliato con domande riguardanti l'allergia al pesce.

Double Blind Placebo Controlled Food Challenge con merluzzo, salmone, sgombro e placebo:

Tutti i partecipanti sono sottoposti a DBPCFC con merluzzo, salmone, sgombro e placebo in ordine casuale, mascherati da un dessert al cioccolato in 4 giorni di sfida separati con un minimo di 6 settimane tra ogni giorno di sfida. I partecipanti che hanno subito anafilassi, verificati e curati in ospedale, non sono sfidati con le specie che hanno dato anafilassi. I sintomi sono registrati su un foglio di registrazione delle manifestazioni cliniche basato su un protocollo dell'ospedale universitario di South Manchester con classificazione dei sintomi e criteri di arresto definiti. Le dosi proteiche si basano sull'esperienza di uno studio EuroPrevall con DBPCFC con merluzzo:

3µg, 600µg, 12mg, 120mg e 1g per DBPCFC

Sfide aperte con merluzzo e/o salmone e sgombro:

I partecipanti che non hanno avuto reazioni allergiche dopo DBPCFC con merluzzo, salmone e sgombro, sono stati sottoposti a test aperti con 2 g, 6 ge 12 g di proteine, serviti come pesce cotto, con le specie che hanno dato DBPCFC negativo. Le sfide aperte vengono svolte in giorni separati dopo che il codice di randomizzazione è stato violato.

Cessazione del trattamento prima del DBPCFC e sfide aperte:

La terapia con corticosteroidi sistemici viene interrotta almeno una settimana prima delle sfide. Il trattamento antistaminico viene interrotto almeno 72 ore prima delle sfide. I β-2 agonisti a breve durata d'azione vengono sospesi almeno 6 ore prima delle sfide e i β-2 agonisti a lunga durata d'azione almeno 24 ore prima delle sfide. I partecipanti possono continuare a inalare corticosteroidi e antagonisti del recettore dei leucotrieni.

Rinvio di DBPCFC e sfide aperte:

Le sfide vengono rinviate se i partecipanti hanno infezioni in corso, reazioni allergiche in corso, eczema non controllato o asma non controllato. I partecipanti con allergia ai pollini non sono sfidati durante la stagione dei pollini.

Osservazione e trattamento delle reazioni allergiche:

Tutte le sfide con i pesci vengono eseguite presso l'unità di ricerca presso l'Ospedale universitario della Norvegia settentrionale nel periodo settembre 2014 - febbraio 2015. Due partecipanti vengono sfidati ogni giorno della sfida e tutti i partecipanti sono osservati da un'infermiera ricercatrice in cieco. Il personale non cieco prepara i pasti di prova ogni mattina. Un medico in cieco esamina i partecipanti prima, durante e dopo le sfide e decide se le sfide sono positive o negative. Le sfide vengono interrotte se i partecipanti sviluppano segni oggettivi di reazioni allergiche. I criteri di arresto sono predefiniti. I partecipanti vengono osservati in ospedale almeno due ore dopo che le sfide sono state interrotte. Le reazioni allergiche e anafilattiche sono trattate secondo il position paper dell'Accademia Europea di Allergologia e Immunologia Clinica sull'Anafilassi. I partecipanti vengono contattati telefonicamente da un'infermiera ricercatrice cieca il giorno successivo per registrare le reazioni tardive dopo la dimissione.