Alergia na różne gatunki ryb u dzieci i młodzieży z alergią na ryby (TRO-FAST)

Wstęp:

Ryby odgrywają ważną rolę w żywności człowieka, stanowiąc cenne źródło wysoko przyswajalnego białka, a spożycie ryb wzrasta na całym świecie. Alergia na ryby jest jedną z najczęstszych alergii pokarmowych, obok mleka, jaj, orzechów, orzeszków ziemnych, owoców, pszenicy, soi i owoców morza. Częściej występuje w krajach nadmorskich i krajach o tradycjach w przemyśle rybnym, gdzie ryba odgrywa ważną rolę w tradycjach żywieniowych. Taka jest sytuacja w północnej Norwegii, gdzie rybołówstwo i przemysł rybny były najważniejszym sposobem zarabiania na życie, a ryby stanowiły ważną część żywności. Alergia na ryby jest szczególnie powszechna u dzieci i młodych dorosłych. Objawy związane z alergią na ryby wahają się od łagodnych objawów do anafilaksji. Większość pacjentów z alergią na ryby unika wszystkich gatunków ryb, a pracownicy służby zdrowia często im to doradzają. Głównym alergenem ryb jest parwalbumina mięśniowa, odporna na ciepło, denaturację chemiczną i enzymy proteolityczne. Ze względu na homologię sekwencji aminokwasów w parwalbuminach u różnych gatunków ryb istnieje reaktywność krzyżowa.

Jednak doświadczenie kliniczne, badania nad uczuleniem i niektóre otwarte badania prowokacyjne wskazują, że niektórzy pacjenci z alergią na ryby mogą tolerować niektóre gatunki ryb. Głównym celem tego badania jest ustalenie, w jakim stopniu dzieci i młodzież z alergią na ryby mogą tolerować niektóre gatunki ryb, stosując DBPCFC jako złoty standard w diagnostyce alergii pokarmowej, a tym samym uniknąć niepotrzebnych ograniczeń żywieniowych w swojej diecie.

Przemysł spożywczy często oznacza swoje produkty napisem „główny alergen”, ponieważ brakuje im informacji o dawkach progowych dla reakcji alergicznych. Niepotrzebne etykietowanie żywności powoduje mniejsze zróżnicowanie diety dla pacjentów z alergią pokarmową. Kolejnym celem tego badania jest znalezienie minimalnej dawki wywołującej reakcję alergiczną u 10% uczestników, a tym samym przyczynienie się do bardziej precyzyjnego etykietowania żywności.

Metoda:

DBPCFC jest złotym standardem w diagnostyce alergii pokarmowej. Ukrycie smaku i zapachu ryb w znormalizowanej testowej żywności o dobrym smaku i konsystencji jest trudne. Jest to szczególnie trudne w przypadku dzieci, które rzadziej jedzą jedzenie o złym smaku i gdzie ilość testowanej żywności, którą mogą przetworzyć, jest ograniczona.

We współpracy z Narodowym Instytutem Badań Żywności w Norwegii wyprodukowaliśmy suszone proszki rybne z dorsza, łososia i makreli. Mrożone filety zostały ugotowane, wysuszone i przetworzone na proszek. Proszki zostały sprawdzone pod kątem zawartości mikrobiologicznej i białka. Zabieg polega na usunięciu jak największej ilości tłuszczu. Proszki przechowuje się w zamrażarce w temperaturze -20°C. Objętość jest zmniejszona o około 80% w porównaniu z gotowaną rybą.

We współpracy z profesor Clare Mills z grupy alergologii molekularnej Manchester Institute of Biotechnology, University of Manchester, proszki rybne dodaje się do czekoladowego deseru opartego na recepturze wykorzystanej w badaniu EuroPrevall dotyczącym alergii pokarmowych. Produkcja deserów czekoladowych odbywa się na Uniwersytecie w Manchesterze wraz z kontrolą jakości pod kątem zawartości alergenów, zawartości parwalbuminy, mikrobiologii i specjacji ryb. Przebranie smaku i zapachu jest testowane w panelu testów sensorycznych.

Rekrutacja uczestników:

Do udziału zaproszeni są pacjenci w wieku 5-20 lat, z wywiadem alergii i uczulenia na ryby, którzy odwiedzili jedną z przychodni dla dzieci i młodzieży szpitala uniwersyteckiego północnej Norwegii. Zapraszamy również pacjentów uczulonych na ryby, którzy nigdy nie jedli ryb. Ponadto do udziału zaproszeni są pacjenci zarejestrowani z uczuleniem na dorsza w laboratorium alergologicznym Szpitala Uniwersyteckiego Północnej Norwegii od 2008 roku, którzy nie zostali jeszcze odebrani z ambulatorium. Laboratorium jest jedyną pracownią alergologiczną w regionie, z której rekrutowani są uczestnicy.

Badanie przed włączeniem:

Wszyscy pacjenci, którzy wyrażą zgodę na udział, przechodzą badanie kliniczne, w tym spirometrię, przed włączeniem, aby upewnić się, że kwalifikują się do badania. Badanie kliniczne obejmuje pomiary masy ciała i wzrostu, osłuchiwanie serca i płuc, badanie skóry, spojówek, nosa i jamy ustnej.

Szczególną uwagę zwraca się na niekontrolowaną astmę i egzemę oraz zapewnienie optymalnego leczenia przed włączeniem. Pacjenci z alergią na pyłki nie będą poddawani prowokacji pokarmowej w okresie pylenia.

Pomiar swoistej immunoglobuliny E (IgE) w surowicy:

U wszystkich uczestników oznacza się swoiste IgE w surowicy przeciwko następującym alergenom:

1. Fx5 (jaja, mleko, dorsz, pszenica, soja, orzeszki ziemne)
2. Panel inhalacyjny 6 (Brzoza, Tymotka, Bylica, Alternaria, Cladosporium)
3. Panel inhalacyjny 7 (Kot, koń, pies, roztocze kurzu domowego, królik)
4. Gad c1, f426 (parwalbumina z dorsza)
5. Cyp c1, f355 (parwalbumina z karpia)
6. Łosoś, f41
7. Makrela, f206
8. Halibut, f303
9. Pollock, f413
10. Plamiak, f42
11. Śledź, f205
12. Gładzica, 4254
13. Tuńczyk, f40
14. Krewetki, f24
15. f351 (rekombinowana tropomiozyna z krewetek)

Ankieta:

Rodzice odpowiadają na kwestionariusz dotyczący badań nad alergią. Kwestionariusz jest tłumaczony na język norweski i wykorzystywana jest ankieta elektroniczna. Rodzice odpowiadają na kwestionariusz podczas pierwszego dnia wyzwania. Ankieta jest rozszerzona o pytania dotyczące alergii na ryby.

Double Blind Placebo Controlled Food Challenge z dorszem, łososiem, makrelą i placebo:

Wszyscy uczestnicy przechodzą DBPCFC z dorszem, łososiem, makrelą i placebo w losowej kolejności, przebrani w czekoladowy deser przez 4 oddzielne dni wyzwania z co najmniej 6 tygodniami pomiędzy każdym dniem wyzwania. Uczestnicy, którzy doświadczyli anafilaksji, zweryfikowani i leczeni w szpitalu, nie są prowokowani z gatunkami, które wywołały anafilaksję. Objawy rejestruje się w karcie objawów klinicznych na podstawie protokołu ze Szpitala Uniwersyteckiego w południowym Manchesterze z oceną objawów i zdefiniowanymi kryteriami zatrzymania. Dawki białka oparte są na doświadczeniach z badania EuroPrevall z DBPCFC z dorszem:

3µg, 600µg, 12mg, 120mg i 1g dla DBPCFC

Otwarte wyzwania z dorszem i/lub łososiem i makrelą:

Uczestnicy, którzy nie mieli reakcji alergicznych po DBPCFC z dorszem, łososiem i makrelą, przeszli otwartą prowokację z 2 g, 6 g i 12 g białka, podawanych jako gotowana ryba, z gatunkami, które dały negatywny DBPCFC. Otwarte wyzwania są wykonywane w różne dni po złamaniu kodu losowego.

Odstawienie leków przed DBPCFC i otwarte wyzwania:

Ogólnoustrojowe leczenie kortykosteroidami należy przerwać co najmniej na tydzień przed prowokacją. Leczenie przeciwhistaminowe należy przerwać co najmniej 72 godziny przed prowokacją. Krótko działające β-2-mimetyki odstawiono co najmniej 6 godzin przed prowokacją, a długo działające β-2-agonistów co najmniej 24 godziny przed prowokacją. Uczestnicy mogą kontynuować wziewne kortykosteroidy i antagonistów receptora leukotrienowego.

Przełożenie DBPCFC i otwartych wyzwań:

Wyzwania są odkładane, jeśli uczestnicy mają trwające infekcje, trwające reakcje alergiczne, niekontrolowaną egzemę lub niekontrolowaną astmę. Uczestnicy z alergią na pyłki nie są kwestionowani podczas sezonu pyłkowego.

Obserwacja i leczenie reakcji alergicznych:

Wszystkie prowokacje ryb są wykonywane w jednostce badawczej Szpitala Uniwersyteckiego Północnej Norwegii w okresie wrzesień 2014 – luty 2015. Dwóch uczestników jest prowokowanych każdego dnia, a wszyscy uczestnicy są obserwowani przez jedną zaślepioną pielęgniarkę badawczą. Niezaślepiony personel codziennie rano przygotowuje posiłki testowe. Jeden zaślepiony lekarz bada uczestników przed, w trakcie i po wyzwaniach i decyduje, czy wyzwania są pozytywne, czy negatywne. Wyzwania są przerywane, jeśli u uczestników wystąpią obiektywne oznaki reakcji alergicznych. Kryteria zatrzymania są wstępnie zdefiniowane. Uczestnicy są obserwowani w szpitalu przez co najmniej dwie godziny po zakończeniu prowokacji. Reakcje alergiczne i anafilaktyczne są leczone zgodnie ze stanowiskiem Europejskiej Akademii Alergologii i Immunologii Klinicznej w dokumencie dotyczącym anafilaksji. Zaślepiona pielęgniarka badawcza kontaktuje się z uczestnikami telefonicznie następnego dnia, aby zarejestrować późne reakcje po wypisie.