E-vitamiinin vaikutus alkoholittomaan rasvamaksasairauteen

Tutkimusmenettelyt (terveet ja NAFLD/NASH-potilaat) Seulonta (viikko -2) Ennen aikajanan aloittamista tutkimussairaanhoitaja arvioi kaikki mahdolliset tutkimukseen osallistujat saadakseen tietoisen suostumuksen, lyhyen sairaushistorian, pituuden, painon ja painon. indeksi, vyötärön/lantion ympärysmitta, elintoiminnot, noin 20 ml. verta laboratorioiden seulontaa varten ja virtsaa analysointia varten. NAFLD/NASH-potilailta, joilla ei ole saatavilla maksaserologioita, otetaan lisäksi 25 ml verta. Tämä käynti kestää noin 60 minuuttia ja sisältää seulontakyselyn perheen sairaushistoriasta, päivittäisistä toiminnoista (ADL) ja alkoholin käytöstä. Diabeetikoiden tulee myös kieltäytyä antamasta suun kautta otettavaa diabeettista lääkettä ennen paastoseulontalaboratoriotyötä.

Opetuskäynti: (viikko -2 tai ennen viikkoa -1): Tutkimussairaanhoitaja antaa diabeetikoille 30 minuutin diabeteksen kertauskurssin, joka sisältää hyper- ja hypoglykemian merkit ja oireet. Jokaiselle diabeetikolle annetaan opetusvihkonen. Jotkut tyypin 2 diabeetikko (T2DM) -potilaat, jotka saavat vain suun kautta otettavaa lääkitystä, eivät tarkista verensokeria säännöllisesti. Jos potilaalla ei ole glukoosimittaria, toimitamme diabeetikkotutkimuksen vapaaehtoisille glukometrin, tarvikkeita ja käyttöohjeita heidän tutkimukseen osallistumisensa aikana.

Ennen standardoidun ruokavalion aloittamista koehenkilöt säilyttävät normaalin ruokavalionsa. Kolmesta neljään päivää ennen protokollatoimenpiteitä koehenkilöt asetetaan standardoidulle ruokavaliolle, jonka tarjoaa CTRC:n metabolinen keittiö. Lisäksi osallistujat pidättäytyvät liikunnasta vähintään 3 päivää ennen toimenpiteitä. Myös T2DM-osallistujat kieltäytyvät suun kautta otettavista diabeetikoista 3-4 päivää ennen protokollatoimenpiteitä.

Fenotyypitys (viikko -1) Osallistujia pyydetään kirjoittamaan muistiin kolmen päivän aikana ennen tätä vierailua kulunut ruoka ja juoma. Tämä ruokaloki muutetaan Clinical Translational Research Centerin (CTRC) ravitsemusterapeutiksi proteiinien, hiilihydraattien ja rasvojen laskemiseksi, jotta voidaan laskea räätälöity 3,5 päivän ateriasuunnitelma, joka nautitaan juuri ennen yön paastoa.

Osallistujia pyydetään olemaan syömättä tai juomatta mitään puolenyön jälkeen ennen tätä vierailua valmistautuakseen päivän opintoihin.

Diabeetikoiden osallistujat pidättävät oraaliset diabeettiset lääkkeensä 3 päivää ennen fenotyyppikäyntiä ja käyntipäivää. Tänä aikana heitä ohjataan mittaamaan verensokerinsa 30 minuuttia ennen jokaista ateriaa ja päivittäin nukkumaan mennessä sekä ilmoittamaan tutkimushoitajalle tai tutkimuslääkärille, jos verensokeri on alle 70 mg/dl tai yli 250 mg/dl.

Osallistujat saapuvat Advanced Imaging Research Centeriin (AIRC) noin klo 8.30. Aamulla osallistujat mittaavat maksan rasvaa 3 Teslan (3T) magneettiresonanssin (MR) skannerilla ja mittaavat hengitysosamäärää (RQ) epäsuoralla kalorimetrillä. Välittömästi skannauksen jälkeen asetetaan kaksi suonensisäistä katetria insuliini/puristintutkimuksen valmistelua varten: kyynärpäälaskimokatetri dekstroosin ja insuliinin infuusiota varten ja selkälaskimokatetri verinäytteen ottamista varten. Käsiä säilytetään kuumassa laatikossa 70 °C:ssa laskimoveren valtimoitumista varten. Kolme 10 ml. verikokeet otetaan glukoositason perusmittausta, insuliini-infuusion valmistusta ja veren kemiallista analyysiä varten. Noin klo 11.30 tavallisen ihmisinsuliinin jatkuva infuusio aloitetaan 2 tunnin ajan. 20-prosenttinen dekstroosi-infuusio aloitetaan 4 minuutin insuliini-infuusion jälkeen ja sitä säädetään euglykemian ylläpitämiseksi. Pieni määrä verta (1 ml) otetaan 5 minuutin välein 2 tunnin ajan plasman glukoosipitoisuuden seuraamiseksi. Koko toimenpiteeseen tarvitaan yhteensä noin 80 ml verta. Virtsanäyte otetaan virtsan glukoosihäviöiden määrittämiseksi imeytymisen jälkeisessä tilassa. Noin kolmelta terveeltä vapaaehtoiselta mitataan ylimääräinen maksan rasvapitoisuus insuliinipuristimen jälkeen sen määrittämiseksi, näkyykö testissä muutoksia. Tämän jälkeen osallistujalle tarjotaan ateria ja hänet poistetaan AIRC:stä. Vierailun kesto on noin 7 tuntia.

Yönpaasto (viikko 0) Diabeetikoiden osallistujat pidättävät oraaliset diabeetikot 4 päivää ennen yöpaastokäyntiä ja käyntipäivää. Tänä aikana heitä ohjeistetaan tarkistamaan verensokerinsa 30 minuuttia ennen aamiaista ja päivittäin nukkumaan mennessä sekä ilmoittamaan tutkimushoitajalle tai tutkimuslääkärille, jos verensokeri on alle 70 mg/dl tai yli 250 mg/dl.

Neljä päivää ennen aineenvaihduntatutkimuksia osallistujat aloittavat räätälöidyn ruokavalion, jonka tarjoaa CTRC:n aineenvaihduntakeittiö. Paastotutkimuksia edeltävänä päivänä kaikki osallistujat syövät viimeisen aterian keskipäivällä ja aloittavat paaston.

Seuraavana päivänä he saapuvat Advanced Imaging Research Centeriin maksan magneettiresonanssispektroskopiaa (MRS) varten. Deuteriumoksidi (alias. raskas vesi), ensimmäinen stabiili isotooppi, annetaan osallistujan painon mukaan kolmeen annokseen jaettuna.

Osallistujat saavat hiili-13-leimattua [U-13C]propionaattia (kolme 400 mg:n annosta suun kautta 1 tunnin aikana). Tutkimuksen aikana koehenkilöille annetaan myös 0,5 % raskasta vettä ad libitum. Koehenkilöiden hengitysosamäärä (RQ) mitataan epäsuoralla kalorimetrillä juuri ennen infuusioprotokollaa. Tämän jälkeen koehenkilöille asetetaan suonensisäinen katetri ja infuusiona stabiileja isotooppeja hiili-13-merkitty [3,4-13C2]glukoosi, hiili-13-leimattu [1,2-13C]asetoasetaatti ja hiili-13-leimattu [3,4- 13C]3-hydroksibutyraatti aloitettiin kahden tunnin aikana. Tänä aikana 5 ml. verinäytteet otetaan tunnin välein plasman esteröimättömien rasvahappojen (NEFA), ketonien, glukoosin, insuliinin ja glukagonin määrittämiseksi. Kahden tunnin kuluttua infuusion aloittamisesta 50 ml. otetaan verikoe näytteiden saamiseksi ketogeneesin ja sitraatin hapettumisen nopeuden spektroskooppista määritystä varten sitruunahapposyklissä (TCA). Tutkimustoimenpiteiden päätyttyä stabiilien isotooppien infuusio lopetetaan ja osallistujat lähetetään CTRC-poliklinikalle kaksoisenergiaröntgenabsorptiometriaa (DEXA) varten arvioitujen kehon rasvan kokonaismäärän määrittämiseksi. DEXA:n jälkeen terveet koehenkilöt kotiutetaan; NAFLD-potilaat otetaan tarvittaessa CTRC:hen maksabiopsiaa varten.

Aineenvaihduntatutkimusten päättyminen viikolla 0 merkitsee tutkimuksen loppua kontrollihenkilöiden osalta, kun taas NAFLD-potilaille aloitetaan E-vitamiini- tai lumelääkehoito tässä vaiheessa. Kaikille koehenkilöille annetaan ateria, ja niiden stabiilisuus (elintoiminnot normaaleissa rajoissa) arvioidaan ennen kotiinlähtöä. Yön paastotutkimuksiin kerättävän veren kokonaismäärä on alle 325 ml.

Seurantakäynnit (viikot 4, 8, 12) Koehenkilöt vierailevat tutkimussairaanhoitajan ja/tai tohtori Browningin kanssa seuratakseen E-vitamiini/plasebo-ohjelman noudattamista. Jokaisella seurantakäynnillä koehenkilöiltä otetaan verta (noin 10 ml). taulukon 1 mukaan. Lisäksi jokaisella vapaaehtoisella on MRS maksan triglyseridipitoisuuden mittaamiseksi.

Fenotyyppikäynti (viikko 16) Tämä on toisto fenotyyppivierailusta viikolla -1.

Yön paasto (viikko 17) Tämä on yön ylipaaston toisto viikolla 0. Kaikki toimenpiteet, mukaan lukien isotooppitutkimukset, ovat samat.