Effekt af vitamin E på ikke-alkoholisk fedtleversygdom

Undersøgelsesprocedurer (sunde og NAFLD/NASH-emner) Screening (uge -2) Forud for påbegyndelse af tidslinjen vil alle potentielle undersøgelsesdeltagere blive evalueret af en forskningssygeplejerske for at opnå informeret samtykke, en kort sygehistorie, højde, vægt, kropsmasse indeks, talje/hofteomkreds, vitale tegn, ca. 20 ml. af blod til screeningslaboratorier og urin til analyse. NAFLD/NASH-personer uden tilgængelige leverserologier vil få udtaget yderligere 25 ml blod. Dette besøg vil tage cirka 60 minutter og vil omfatte et screeningsspørgeskema for familiehistorie med sygdom, daglige aktiviteter (ADL) og alkoholforbrug. Diabetikere vil også tilbageholde deres orale diabetiske middel forud for fastescreeningslaboratoriet.

Undervisningsbesøg: (Uge -2 eller før uge -1): En forskningssygeplejerske vil give diabetikere et 30-minutters genopfriskningskursus om diabetes, som vil omfatte tegn og symptomer på hyper- og hypoglykæmi. Der vil blive givet et undervisningshæfte til hvert diabetikerfag. Nogle type 2-diabetespatienter (T2DM) kun på oral medicin kontrollerer ikke regelmæssigt deres blodsukker. Hvis patienten ikke har et glukometer, vil vi give et glukometer, forsyninger og instruktioner til brug for vores frivillige diabetiske undersøgelser under deres undersøgelsesdeltagelse.

Inden påbegyndelsen af ​​standardiseret diæt vil forsøgspersoner opretholde deres normale kostrutine. I tre til fire dage forud for protokolprocedurerne vil forsøgspersonerne blive sat på en standardiseret diæt leveret af CTRC's metaboliske køkken. Derudover vil deltagerne afstå fra fysisk træning mindst 3 dage før procedurerne. Desuden vil T2DM-deltagere tilbageholde deres orale diabetiske midler i 3-4 dage før protokolprocedurerne.

Fænotyping (Uge -1) Deltagerne vil blive bedt om at nedskrive mad- og drikkevareforbrug i tre dage før dette besøg. Denne madlog vil blive omdannet til diætist på Clinical Translational Research Center (CTRC) til beregning af proteiner, kulhydrater og fedtstoffer med henblik på at beregne en skræddersyet 3,5-dages måltidsplan, der skal indtages lige før nattens faste.

Deltagerne vil blive bedt om ikke at spise eller drikke noget efter midnat forud for dette besøg som forberedelse til dagens undersøgelsesprocedurer.

Diabetikere vil tilbageholde deres orale diabetiske midler i 3 dage forud for fænotypebesøget og dagen for besøget. I løbet af denne tid vil de blive bedt om at kontrollere deres blodsukker 30 minutter før hvert måltid og ved sengetid dagligt og vil underrette forskningssygeplejersken eller undersøgelseslægen, hvis deres blodsukkerniveau er under 70 mg/dl eller over 250 mg/dl.

Deltagerne ankommer til Advanced Imaging Research Center (AIRC) cirka kl. 8:30. I løbet af formiddagen vil deltagerne have målinger af leverfedt i 3 Tesla (3T) Magnetic Resonance (MR) scanneren og måling af deres respiratoriske kvotient (RQ) ved hjælp af et indirekte kalorimeter. Umiddelbart efter scanningen vil to intravenøse katetre blive placeret som forberedelse til insulin/klemme-undersøgelsen: et antecubital venekateter til infusion af dextrose og insulin og et dorsalt håndvenekateter til blodprøvetagning. Hånden opbevares i en varm boks ved 70 °C til arterialisering af venøst ​​blod. Tre 10 ml. Der vil blive taget blodprøver til baseline-måling af glukoseniveau, forberedelse af insulininfusat og blodkemianalyse. Cirka kl. 11:30 vil en primet kontinuerlig infusion af almindelig human insulin blive startet i 2 timer. En 20 % dextrose-infusion vil blive startet efter 4 minutters insulininfusion og justeret for at opretholde euglykæmi. En lille mængde blod (1 ml.) udtages hvert 5. minut i 2 timer for at overvåge plasmaglukosekoncentrationen. Den samlede mængde blod, der kræves til hele proceduren, er ca. 80 ml. Der tages en urinprøve til bestemmelse af uringlukosetab i den post-absorberende tilstand. Ca. 3 raske frivillige vil have en yderligere måling af leverfedt efter insulinklemmen for at afgøre, om ændringer er tydelige fra testen. Deltageren vil derefter få et måltid og udskrevet fra AIRC. Varigheden af ​​dette besøg er cirka 7 timer.

Overnight Fast (Uge 0) Diabetikere vil tilbageholde deres orale diabetiske midler i 4 dage før overnatningsfasten besøget og dagen for besøget. I løbet af denne tid vil de blive instrueret i at kontrollere deres blodsukker 30 minutter før morgenmad og ved sengetid dagligt og vil underrette forskningssygeplejersken eller undersøgelseslægen, hvis deres blodsukkerniveau er under 70 mg/dl eller over 250 mg/dl.

Fire dage før metaboliske undersøgelser vil deltagerne begynde på en skræddersyet diæt leveret af CTRC's metaboliske køkken. Dagen før fasteundersøgelser vil alle deltagere have det sidste måltid ved middagstid og begynde at faste.

Den følgende dag ankommer de til Advanced Imaging Research Center for en levermagnetisk resonansspektroskopi (MRS). Deuteriumoxid (a.k.a. tungt vand), den første stabile isotop, vil blive administreret i henhold til deltagerens vægt i tre opdelte doser.

Deltagerne vil modtage carbon-13 mærket [U-13C]propionat (tre 400 mg doser givet gennem munden over 1 time). Under undersøgelsen vil forsøgspersonerne også få 0,5 % tungt vand ad libitum. Forsøgspersoner vil gennemgå måling af deres respiratoriske kvotient (RQ) ved hjælp af et indirekte kalorimeter lige før infusionsprotokollen. Forsøgspersoner vil derefter få anbragt et intravenøst ​​kateter og en infusion af de stabile isotoper carbon-13-mærket [3,4-13C2]glucose, carbon-13-mærket [1,2-13C]acetoacetat og carbon-13-mærket [3,4- 13C]3-hydroxybutyrat initieret over to timer. I denne periode blev 5 ml. blodudtagninger vil ske hver time for at bestemme plasma ikke-esterificerede fedtsyrer (NEFA), ketoner, glucose, insulin og glucagon niveauer. To timer efter påbegyndelse af infusionen tilføres en 50 ml. blodudtagning vil blive udført for at opnå prøver til spektroskopisk bestemmelse af hastigheden af ​​ketogenese og citratoxidation i citronsyrecyklussen (TCA). Ved afslutningen af ​​undersøgelsesprocedurerne vil den stabile isotopinfusion blive stoppet, og deltagerne vil blive sendt til CTRC ambulatoriet for Dual Energy x-Ray Absorptiometry (DEXA) for at bestemme estimeret total kropsfedtmåling. Efter DEXA vil raske forsøgspersoner blive udskrevet til hjemmet; NAFLD-personer vil blive indlagt på CTRC til leverbiopsi, hvis det er nødvendigt.

Konklusionen på de metaboliske undersøgelser i uge 0 markerer afslutningen på undersøgelsen for kontrolpersoner, mens NAFLD-personer vil blive påbegyndt med E-vitamin eller placebobehandling på dette tidspunkt. Alle forsøgspersoner vil få et måltid og evalueret for stabilitet (vitale tegn inden for normale grænser) før udskrivelse til hjemmet. Den samlede mængde blod indsamlet til undersøgelser med faste natten over vil være mindre end 325 ml.

Opfølgningsbesøg (uge 4, 8, 12) Forsøgspersonerne vil besøge forskningssygeplejersken og/eller Dr. Browning for at overvåge overholdelse af vitamin E/placebo-regimet. Ved hvert opfølgningsbesøg vil forsøgspersoner få opsamlet blod (ca. 10 ml.) efter tabel 1. Derudover vil hver frivillig have en MRS til at måle leverens triglyceridindhold.

Fænotypebesøg (uge 16) Dette er en gentagelse af fænotypebesøget i uge -1.

Overnight Fast (Uge 17) Dette er en gentagelse af nattens faste i uge 0. Alle procedurer, inklusive isotopundersøgelserne, vil være de samme.