Влияние витамина Е на неалкогольную жировую болезнь печени

Процедуры исследования (здоровые субъекты и субъекты с НАЖБП/НАСГ) Скрининг (неделя -2) До начала временной шкалы все потенциальные участники исследования будут оценены медсестрой-исследователем для получения информированного согласия, краткого медицинского анамнеза, роста, веса, массы тела. индекс, окружность талии/бедра, показатели жизненно важных функций, примерно 20 мл. крови для скрининга лабораторий и мочи для анализа. У пациентов с НАЖБП/НАСГ, у которых нет доступных серологических анализов печени, будет взято дополнительно 25 мл крови. Этот визит займет около 60 минут и будет включать анкету для скрининга семейной истории болезни, повседневной активности (ADL) и употребления алкоголя. Субъекты, страдающие диабетом, также воздерживаются от приема перорального диабетического средства до лабораторных исследований натощак.

Учебный визит: (неделя -2 или до недели -1): медсестра-исследователь проведет 30-минутный курс повышения квалификации по диабету, который будет включать признаки и симптомы гипер- и гипогликемии. Учебный буклет будет дан каждому диабетическому предмету. Некоторые пациенты с диабетом 2 типа (СД2), принимающие только пероральные препараты, не проверяют уровень сахара в крови регулярно. Если у пациента нет глюкометра, мы предоставим глюкометр, расходные материалы и инструкции для использования нашими добровольцами, страдающими диабетом, во время их участия в исследовании.

До начала стандартизированной диеты субъекты будут поддерживать свой обычный режим питания. За три-четыре дня до протокольных процедур субъекты будут переведены на стандартизированную диету, предоставленную метаболической кухней CTRC. Кроме того, участники будут воздерживаться от физических упражнений как минимум за 3 дня до процедур. Кроме того, участники с СД2 не будут принимать пероральные диабетические препараты за 3-4 дня до протокольных процедур.

Фенотипирование (неделя -1) Участникам будет предложено записать потребление продуктов питания и напитков за три дня до этого визита. Этот журнал питания будет передан диетологу Центра клинических трансляционных исследований (CTRC) для расчета белков, углеводов и жиров, чтобы рассчитать индивидуальный план питания на 3,5 дня, который следует употреблять непосредственно перед ночным голоданием.

Участников попросят ничего не есть и не пить после полуночи до этого визита в рамках подготовки к дневным процедурам исследования.

Участники с диабетом воздержатся от приема пероральных диабетических средств за 3 дня до визита для фенотипирования и в день визита. В течение этого времени они будут проинструктированы проверять уровень глюкозы в крови за 30 минут до каждого приема пищи и перед сном ежедневно и будут уведомлять медсестру-исследователя или врача-исследователя, если их уровень глюкозы в крови ниже 70 мг/дл или выше 250 мг/дл.

Участники прибудут в Исследовательский центр перспективных изображений (AIRC) примерно в 8:30 утра. Утром участники будут измерять жир печени с помощью магнитно-резонансного (МР) сканера 3 Тесла (3Т) и измерять их дыхательный коэффициент (RQ) с помощью непрямого калориметра. Сразу же после сканирования будут установлены два внутривенных катетера для подготовки к исследованию инсулина/зажима: катетер в локтевой вене для инфузии декстрозы и инсулина и катетер в дорсальной вене руки для забора крови. Рука будет храниться в горячем боксе при 70 ° C для артериализации венозной крови. Три по 10 мл. будут взяты образцы крови для измерения исходного уровня глюкозы, приготовления инфузата инсулина и биохимического анализа крови. Примерно в 11:30 начнется непрерывная инфузия обычного человеческого инсулина в течение 2 часов. Инфузия 20% декстрозы будет начата через 4 минуты инфузии инсулина и скорректирована для поддержания эугликемии. Небольшое количество крови (1 мл) будет браться каждые 5 минут в течение 2 часов для контроля концентрации глюкозы в плазме. Общее количество крови, необходимое для всей процедуры, составляет примерно 80 мл. Образец мочи будет собран для определения потерь глюкозы с мочой в постабсорбционном состоянии. Приблизительно у 3 здоровых добровольцев будет проведено дополнительное измерение жира в печени после инсулинового клэмпа, чтобы определить, очевидны ли изменения в тесте. Затем участнику дадут еду и выпишут из AIRC. Продолжительность посещения около 7 часов.

Ночное голодание (неделя 0) Участники, страдающие диабетом, воздержатся от приема пероральных диабетических средств за 4 дня до посещения ночного голодания и в день посещения. В течение этого времени им будет предписано проверять уровень глюкозы в крови за 30 минут до завтрака и перед сном ежедневно, и они будут уведомлять медсестру-исследователя или врача-исследователя, если их уровень глюкозы в крови ниже 70 мг/дл или выше 250 мг/дл.

За четыре дня до метаболических исследований участники перейдут на индивидуальную диету, предоставленную метаболической кухней CTRC. За день до исследования голодания все участники в полдень завершат последний прием пищи и начнут голодание.

На следующий день они прибудут в Исследовательский центр перспективной визуализации для магнитно-резонансной спектроскопии (МРС) печени. Оксид дейтерия (он же тяжелая вода), первый стабильный изотоп, будет вводиться в зависимости от веса участника в три приема.

Участники получат меченный углеродом-13 пропионат [U-13C] (три дозы по 400 мг перорально в течение 1 часа). Во время исследования испытуемым также будут давать 0,5% тяжелой воды без ограничений. Субъекты будут подвергаться измерению их дыхательного коэффициента (RQ) с использованием непрямого калориметра непосредственно перед протоколом инфузии. Затем субъектам введут внутривенный катетер и введут стабильные изотопы, меченные углеродом-13, [3,4-13C2]глюкоза, меченый углеродом-13 [1,2-13C]ацетоацетат и меченный углеродом-13 [3,4- 13C]3-гидроксибутират инициируется в течение двух часов. В этот период 5 мл. забор крови будет производиться каждый час для определения уровня неэтерифицированных жирных кислот (НЭЖК), кетонов, глюкозы, инсулина и глюкагона в плазме. Через два часа после начала инфузии 50 мл. будет проведен забор крови для получения образцов для спектроскопического определения скорости кетогенеза и окисления цитрата в цикле лимонной кислоты (TCA). По завершении процедур исследования инфузия стабильных изотопов будет остановлена, и участники будут отправлены в амбулаторную клинику CTRC для двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DEXA) для определения приблизительного измерения общего жира в организме. После DEXA здоровые субъекты будут выписаны домой; Субъекты НАЖБП будут госпитализированы в CTRC для биопсии печени, если это необходимо.

Завершение метаболических исследований на неделе 0 знаменует окончание исследования для контрольных субъектов, в то время как субъекты с НАЖБП в этот момент времени будут начинать терапию витамином Е или плацебо. Всем субъектам дадут еду и оценят на стабильность (жизненные показатели в пределах нормы) перед выпиской домой. Общее количество крови, собранной для исследований натощак в течение ночи, будет менее 325 мл.

Последующие визиты (недели 4, 8, 12) Субъекты будут посещать медсестру-исследователя и/или доктора Браунинг, чтобы контролировать соблюдение режима приема витамина Е/плацебо. При каждом последующем посещении у субъектов будет собираться кровь (приблизительно 10 мл). по таблице 1. Кроме того, у каждого добровольца будет MRS для измерения содержания триглицеридов в печени.

Посещение фенотипа (неделя 16) Это повторение посещения фенотипа на неделе -1.

Ночное голодание (неделя 17) Это повторение ночного голодания на неделе 0. Все процедуры, включая изотопные исследования, будут такими же.