Vliv vitaminu E na nealkoholické ztučnění jater

Screening studijních postupů (zdraví a NAFLD/NASH subjekty) Screening (týden -2) Před zahájením časové osy budou všichni potenciální účastníci studie hodnoceni výzkumnou sestrou, aby získali informovaný souhlas, stručnou anamnézu, výšku, váhu, tělesnou hmotnost index, obvod pasu/boky, vitální funkce, přibližně 20 ml. krve pro screeningové laboratoře a moči pro analýzu. Subjektům NAFLD/NASH bez dostupných jaterních sérologií bude odebráno dalších 25 ml krve. Tato návštěva bude trvat přibližně 60 minut a bude zahrnovat screeningový dotazník pro rodinnou anamnézu onemocnění, aktivity každodenního života (ADL) a spotřebu alkoholu. Diabetičtí jedinci si také vynechají perorální diabetickou látku před laboratorním screeningem nalačno.

Výuková návštěva: (Týden -2 nebo před týdnem -1): Výzkumná sestra poskytne diabetikům 30minutový opakovací kurz o diabetu, který bude zahrnovat známky a příznaky hyper a hypoglykémie. Každému diabetikovi bude předána výuková brožura. Někteří pacienti s diabetem 2. typu (T2DM) užívající pouze perorální léky si pravidelně nekontrolují hladinu cukru v krvi. Pokud pacient nemá glukometr, poskytneme glukometr, zásoby a návod k použití našim dobrovolníkům z diabetické studie během jejich účasti ve studii.

Před zahájením standardizované stravy budou subjekty udržovat svou normální dietní rutinu. Po dobu tří až čtyř dnů před procedurami protokolu budou subjekty nasazeny na standardizovanou stravu poskytovanou metabolickou kuchyní CTRC. Dále se účastníci zdrží fyzického cvičení minimálně 3 dny před procedurami. Účastníci T2DM také přestanou podávat perorální diabetické přípravky po dobu 3-4 dnů před procedurami protokolu.

Fenotypizace (1. týden) Účastníci budou požádáni, aby zapsali spotřebu jídla a nápojů za tři dny před touto návštěvou. Tento deník jídla se změní na dietologa v Centru klinického translačního výzkumu (CTRC) pro výpočet bílkovin, sacharidů a tuků, aby bylo možné vypočítat přizpůsobený 3,5denní jídelníček, který se má konzumovat těsně před nočním půstem.

Účastníci budou požádáni, aby po půlnoci před touto návštěvou nic nejedli ani nepili v rámci přípravy na denní studijní procedury.

Diabetičtí účastníci přestanou podávat perorální diabetické přípravky po dobu 3 dnů před návštěvou fenotypizace a dnem návštěvy. Během této doby budou instruováni, aby si denně kontrolovali glykémii 30 minut před každým jídlem a před spaním, a oznámí výzkumné sestře nebo studijnímu lékaři, pokud je jejich hladina glukózy v krvi nižší než 70 mg/dl nebo vyšší než 250 mg/dl.

Účastníci dorazí do Advanced Imaging Research Center (AIRC) přibližně v 8:30. Během dopoledne bude účastníkům změřen jaterní tuk na 3 Tesla (3T) skeneru magnetické rezonance (MR) a měření jejich respiračního kvocientu (RQ) pomocí nepřímého kalorimetru. Bezprostředně po skenování budou umístěny dva intravenózní katétry jako příprava na studii inzulin/svorka: antekubitální žilní katétr pro infuzi dextrózy a inzulinu a dorzální ruční katétr pro odběr krve. Ruka bude uchovávána v horkém boxu při 70 °C pro arterializaci žilní krve. Tři 10 ml. budou získány odběry krve pro měření základní hladiny glukózy, přípravu infuze inzulinu a biochemickou analýzu krve. Přibližně v 11:30 bude zahájena kontinuální infuze běžného lidského inzulínu po dobu 2 hodin. Infuze 20% dextrózy bude zahájena po 4 minutách infuze inzulínu a upravena tak, aby byla zachována euglykémie. Malé množství krve (1 ml) bude odebíráno každých 5 minut po dobu 2 hodin pro sledování koncentrace glukózy v plazmě. Celkové množství krve potřebné pro celou proceduru je přibližně 80 ml. Bude odebrán vzorek moči pro stanovení ztrát glukózy v moči v postabsorpčním stavu. Přibližně 3 zdravým dobrovolníkům bude po inzulinové svorke provedeno dodatečné měření jaterního tuku, aby se zjistilo, zda jsou z testu zřejmé změny. Účastník poté dostane jídlo a bude propuštěn z AIRC. Délka této návštěvy je přibližně 7 hodin.

Jednodenní hladovění (Týden 0) Diabetičtí účastníci přestanou podávat perorální diabetické léky po dobu 4 dnů před návštěvou přes noc a dnem návštěvy. Během této doby budou instruováni, aby si denně kontrolovali glykémii 30 minut před snídaní a před spaním, a pokud je jejich hladina glukózy v krvi nižší než 70 mg/dl nebo vyšší než 250 mg/dl, upozorní výzkumnou sestru nebo studijního lékaře.

Čtyři dny před metabolickými studiemi zahájí účastníci dietu na míru poskytovanou metabolickou kuchyní CTRC. Den před studiem půstu budou mít všichni účastníci poslední jídlo v poledne a začnou půst.

Následující den dorazí do Advanced Imaging Research Center pro jaterní magnetickou rezonanční spektroskopii (MRS). Oxid deuterium (také znám jako těžká voda), první stabilní izotop, bude podáván podle hmotnosti účastníka ve třech dílčích dávkách.

Účastníci obdrží [U-13C]propionát značený uhlíkem-13 (tři 400 mg dávky podané ústy během 1 hodiny). Během studie bude subjektům také podáváno 0,5 % těžké vody ad libitum. Subjekty podstoupí měření jejich respiračního kvocientu (RQ) pomocí nepřímého kalorimetru těsně před infuzním protokolem. Subjektům bude poté zaveden intravenózní katetr a infuze stabilních izotopů uhlíkem-13 značených [3,4-13C2]glukóza, uhlíkem-13 značeného [1,2-13C]acetoacetátu a uhlíkem-13 značeného [3,4- 13C]3-hydroxybutyrát iniciován během dvou hodin. Během této doby se 5 ml. odběry krve budou probíhat každou hodinu za účelem stanovení hladin neesterifikovaných mastných kyselin (NEFA), ketonů, glukózy, inzulínu a glukagonu v plazmě. Dvě hodiny po zahájení infuze se přidá 50 ml. bude proveden odběr krve za účelem získání vzorků pro spektroskopické stanovení rychlosti ketogeneze a oxidace citrátu v cyklu kyseliny citrónové (TCA). Po dokončení studijních postupů bude infuze stabilního izotopu zastavena a účastníci budou odesláni do ambulance CTRC na duální energetickou rentgenovou absorpciometrii (DEXA), kde se určí odhadované měření celkového tělesného tuku. Po DEXA budou zdraví jedinci propuštěni domů; Subjekty NAFLD budou v případě potřeby přijaty do CTRC pro biopsii jater.

Závěr metabolických studií v týdnu 0 značí konec studie pro kontrolní subjekty, zatímco u subjektů s NAFLD bude v tomto časovém bodě zahájena léčba vitaminem E nebo placebem. Všem subjektům bude před propuštěním domů podáno jídlo a vyhodnocena stabilita (vitální známky v normálních mezích). Celkové množství krve odebrané pro studie nalačno přes noc bude menší než 325 ml.

Následné návštěvy (4., 8., 12. týden) Subjekty navštíví výzkumnou sestru a/nebo Dr. Browninga, aby sledovali dodržování režimu vitamín E/placebo. Při každé následné návštěvě bude subjektům odebrána krev (přibližně 10 ml). podle tabulky 1. Kromě toho bude mít každý dobrovolník MRS pro měření obsahu triglyceridů v játrech.

Návštěva fenotypu (16. týden) Toto je opakování návštěvy fenotypu v týdnu -1.

Půst přes noc (17. týden) Toto je opakování nočního hladovění v týdnu 0. Všechny postupy, včetně izotopových studií, budou stejné.