Wpływ witaminy E na niealkoholowe stłuszczenie wątroby

Procedury badania (osoby zdrowe i osoby z NAFLD/NASH) Badanie przesiewowe (tydzień -2) Przed rozpoczęciem harmonogramu wszyscy potencjalni uczestnicy badania zostaną ocenieni przez pielęgniarkę badawczą w celu uzyskania świadomej zgody, krótkiej historii medycznej, wzrostu, masy ciała, masy ciała wskaźnik, obwód talii/bioder, parametry życiowe, około 20 ml. krwi do badań przesiewowych i moczu do analizy. Osobom z NAFLD/NASH bez dostępnych badań serologicznych wątroby zostanie pobrane dodatkowe 25 ml krwi. Wizyta ta zajmie około 60 minut i będzie obejmowała kwestionariusz przesiewowy dotyczący historii choroby w rodzinie, czynności życia codziennego (ADL) i spożycia alkoholu. Pacjenci z cukrzycą również wstrzymają przyjmowanie doustnego środka przeciwcukrzycowego przed badaniem laboratoryjnym na czczo.

Wizyta dydaktyczna: (Tydzień -2 lub przed tygodniem -1): Pielęgniarka prowadząca badania przeprowadzi osoby z cukrzycą 30-minutowy kurs przypominający o cukrzycy, który obejmie oznaki i objawy hiperglikemii i hipoglikemii. Każdemu pacjentowi z cukrzycą zostanie przekazana broszura instruktażowa. Niektórzy pacjenci z cukrzycą typu 2 (T2DM) przyjmujący wyłącznie leki doustne nie kontrolują regularnie poziomu cukru we krwi. Jeśli pacjent nie ma glukometru, zapewnimy glukometr, materiały eksploatacyjne i instrukcje obsługi naszym ochotnikom do badania cukrzycy podczas ich udziału w badaniu.

Przed rozpoczęciem standaryzowanej diety, pacjenci będą utrzymywać swoją normalną rutynę żywieniową. Przez trzy do czterech dni przed procedurami protokołu pacjenci będą poddani standardowej diecie dostarczanej przez kuchnię metaboliczną CTRC. Ponadto uczestnicy zobowiązują się do powstrzymania się od ćwiczeń fizycznych na co najmniej 3 dni przed zabiegami. Ponadto uczestnicy T2DM wstrzymają przyjmowanie doustnych środków przeciwcukrzycowych na 3-4 dni przed procedurami protokołu.

Fenotypowanie (Tydzień -1) Uczestnicy zostaną poproszeni o zapisanie spożycia żywności i napojów przez trzy dni przed wizytą. Ten dziennik żywności zostanie przekształcony w dietetyka w Clinical Translational Research Center (CTRC) w celu obliczenia białek, węglowodanów i tłuszczów w celu obliczenia dostosowanego 3,5-dniowego planu posiłków do spożycia tuż przed nocnym postem.

Uczestnicy zostaną poproszeni o powstrzymanie się od jedzenia i picia po północy przed wizytą w ramach przygotowań do codziennych procedur badawczych.

Uczestnicy z cukrzycą wstrzymają przyjmowanie doustnych środków przeciwcukrzycowych na 3 dni przed wizytą fenotypowania i dniem wizyty. W tym czasie zostaną poinstruowani, aby codziennie sprawdzać poziom glukozy we krwi 30 minut przed każdym posiłkiem i przed snem oraz powiadomią pielęgniarkę lub lekarza prowadzącego badanie, jeśli poziom glukozy we krwi spadnie poniżej 70 mg/dl lub przekroczy 250 mg/dl.

Uczestnicy przybędą do Advanced Imaging Research Center (AIRC) około godziny 8:30. Rano uczestnicy będą mieli pomiary tłuszczu wątrobowego za pomocą skanera rezonansu magnetycznego (MR) o mocy 3 tesli (3T) oraz pomiar współczynnika oddechowego (RQ) za pomocą kalorymetru pośredniego. Bezpośrednio po badaniu dwa cewniki dożylne zostaną umieszczone w ramach przygotowań do badania insuliny/klamry: cewnik do żyły łokciowej do podawania dekstrozy i insuliny oraz cewnik do żyły grzbietowej dłoni do pobierania krwi. Ręka będzie trzymana w gorącym pojemniku w temperaturze 70°C w celu arterializacji krwi żylnej. Trzy 10 ml. zostaną pobrane próbki krwi do podstawowego pomiaru poziomu glukozy, przygotowania wlewu insuliny i analizy chemicznej krwi. Około godziny 11:30 zostanie rozpoczęty ciągły wlew zwykłej insuliny ludzkiej trwający 2 godziny. Wlew 20% dekstrozy zostanie rozpoczęty po 4 minutach wlewu insuliny i dostosowany do utrzymania euglikemii. Niewielka ilość krwi (1 ml) będzie pobierana co 5 minut przez 2 godziny w celu monitorowania stężenia glukozy w osoczu. Całkowita ilość krwi wymagana do całej procedury to około 80 ml. Zostanie pobrana próbka moczu w celu określenia utraty glukozy z moczem w stanie poabsorpcyjnym. Około 3 zdrowych ochotników zostanie poddanych dodatkowemu pomiarowi tłuszczu w wątrobie po zacisku insulinowym, aby określić, czy w teście widoczne są zmiany. Następnie uczestnik otrzyma posiłek i zostanie zwolniony z AIRC. Czas trwania tej wizyty to około 7 godzin.

Post na noc (tydzień 0) Uczestnicy z cukrzycą wstrzymają przyjmowanie doustnych środków przeciwcukrzycowych na 4 dni przed wizytą na post na noc iw dniu wizyty. W tym czasie zostaną poinstruowani, aby codziennie sprawdzać poziom glukozy we krwi 30 minut przed śniadaniem i przed snem oraz powiadomią pielęgniarkę lub lekarza prowadzącego badanie, jeśli poziom glukozy we krwi spadnie poniżej 70 mg/dl lub przekroczy 250 mg/dl.

Cztery dni przed badaniami metabolicznymi uczestnicy rozpoczną indywidualną dietę zapewnioną przez kuchnię metaboliczną CTRC. Dzień przed badaniem postu wszyscy uczestnicy zjedzą ostatni posiłek w południe i rozpoczną post.

Następnego dnia przybędą do Advanced Imaging Research Center na spektroskopię rezonansu magnetycznego wątroby (MRS). Tlenek deuteru (tzw. ciężka woda), pierwszy stabilny izotop, zostanie podany w zależności od wagi uczestnika w trzech dawkach podzielonych.

Uczestnicy otrzymają propionian [U-13C] znakowany węglem-13 (trzy dawki 400 mg podane doustnie w ciągu 1 godziny). Podczas badania badani będą również otrzymywać ad libitum 0,5% ciężkiej wody. Pacjenci zostaną poddani pomiarowi współczynnika oddechowego (RQ) przy użyciu kalorymetru pośredniego tuż przed protokołem infuzji. Pacjentom zostanie następnie umieszczony cewnik dożylny i podany wlew stabilnych izotopów znakowanych węglem-13 [3,4-13C2]glukozy, znakowanych węglem-13 [1,2-13C]acetylooctanu i znakowanych węglem-13 [3,4- 13C]3-hydroksymaślan inicjowany przez dwie godziny. W tym okresie 5 ml. pobieranie krwi będzie odbywać się co godzinę w celu określenia poziomu niezestryfikowanych kwasów tłuszczowych (NEFA), ciał ketonowych, glukozy, insuliny i glukagonu w osoczu. Po dwóch godzinach od rozpoczęcia infuzji należy podać 50 ml. zostanie wykonane pobranie krwi w celu pobrania próbek do spektroskopowego określenia szybkości ketogenezy i utleniania cytrynianów w cyklu kwasu cytrynowego (TCA). Po zakończeniu procedur badawczych infuzja stabilnych izotopów zostanie zatrzymana, a uczestnicy zostaną wysłani do ambulatorium CTRC na absorpcjometrię rentgenowską podwójnej energii (DEXA) w celu określenia szacunkowego pomiaru całkowitej tkanki tłuszczowej. Po DEXA osoby zdrowe zostaną wypisane do domu; Pacjenci z NAFLD zostaną przyjęci do CTRC w celu wykonania biopsji wątroby, jeśli zajdzie taka potrzeba.

Zakończenie badań metabolicznych w tygodniu 0 oznacza koniec badania dla osób z grupy kontrolnej, podczas gdy osoby z NAFLD zostaną w tym momencie rozpoczęte podawaniem witaminy E lub placebo. Wszyscy pacjenci otrzymają posiłek i ocenią stabilność (oznaki życiowe w granicach normy) przed wypisaniem do domu. Całkowita ilość krwi pobranej do badań na czczo przez noc będzie mniejsza niż 325 ml.

Wizyty kontrolne (tygodnie 4, 8, 12) Uczestnicy odwiedzą pielęgniarkę badawczą i/lub dr Browninga, aby monitorować przestrzeganie reżimu witaminy E/placebo. Podczas każdej wizyty kontrolnej pacjentom zostanie pobrana krew (około 10 ml). zgodnie z tabelą 1. Dodatkowo każdy ochotnik będzie miał MRS do pomiaru zawartości trójglicerydów w wątrobie.

Wizyta fenotypowa (tydzień 16) Jest to powtórka wizyty fenotypowej w tygodniu -1.

Post na noc (tydzień 17) Jest to powtórzenie postu na noc w tygodniu 0. Wszystkie procedury, w tym badania izotopowe, będą takie same.