Wirkung von Vitamin E auf die nichtalkoholische Fettlebererkrankung

Studienverfahren (gesunde und NAFLD/NASH-Probanden) Screening (Woche -2) Vor Beginn des Zeitplans werden alle potenziellen Studienteilnehmer von einer Forschungskrankenschwester bewertet, um eine Einverständniserklärung, eine kurze Anamnese, Größe, Gewicht und Körpermasse zu erhalten Index, Taillen-/Hüftumfang, Vitalfunktionen, ca. 20 ml. von Blut für Screening-Labors und Urin für die Analyse. NAFLD/NASH-Patienten ohne verfügbare Leberserologien werden zusätzlich 25 ml Blut entnommen. Dieser Besuch dauert etwa 60 Minuten und umfasst einen Screening-Fragebogen zur familiären Vorgeschichte von Krankheiten, Aktivitäten des täglichen Lebens (ADL) und Alkoholkonsum. Diabetiker werden auch ihr orales diabetisches Mittel vor der Fasten-Screening-Laborarbeit zurückhalten.

Unterrichtsbesuch: (Woche -2 oder vor Woche -1): Eine Forschungskrankenschwester gibt Diabetikern einen 30-minütigen Auffrischungskurs über Diabetes, der die Anzeichen und Symptome von Hyper- und Hypoglykämie umfasst. Zu jedem Diabetiker wird eine Lehrbroschüre ausgehändigt. Einige Patienten mit Typ-2-Diabetes (T2DM), die nur orale Medikamente einnehmen, kontrollieren ihren Blutzucker nicht regelmäßig. Wenn der Patient kein Blutzuckermessgerät hat, stellen wir unseren Freiwilligen der Diabetesstudie während ihrer Studienteilnahme ein Blutzuckermessgerät, Zubehör und Gebrauchsanweisungen zur Verfügung.

Vor Beginn der standardisierten Ernährung werden die Probanden ihre normale Ernährungsroutine beibehalten. Für drei bis vier Tage vor den Protokollverfahren werden die Probanden auf eine standardisierte Diät gesetzt, die von der CTRC-Stoffwechselküche bereitgestellt wird. Darüber hinaus verzichten die Teilnehmer mindestens 3 Tage vor den Eingriffen auf körperliche Betätigung. Außerdem werden T2DM-Teilnehmer ihre oralen diabetischen Mittel 3-4 Tage vor den Protokollverfahren zurückhalten.

Phänotypisierung (Woche -1) Die Teilnehmer werden gebeten, den Verzehr von Speisen und Getränken für drei Tage vor diesem Besuch aufzuschreiben. Dieses Ernährungsprotokoll wird dem Ernährungsberater des Clinical Translational Research Center (CTRC) zur Berechnung von Proteinen, Kohlenhydraten und Fetten vorgelegt, um einen maßgeschneiderten 3,5-Tage-Speiseplan zu berechnen, der kurz vor dem nächtlichen Fasten verzehrt werden soll.

Die Teilnehmer werden gebeten, vor diesem Besuch nach Mitternacht nichts zu essen oder zu trinken, um sich auf die Studienverfahren des Tages vorzubereiten.

Diabetiker werden ihre oralen diabetischen Wirkstoffe 3 Tage vor dem Phänotypisierungsbesuch und am Tag des Besuchs zurückhalten. Während dieser Zeit werden sie angewiesen, ihren Blutzucker 30 Minuten vor jeder Mahlzeit und täglich vor dem Schlafengehen zu überprüfen und die Forschungskrankenschwester oder den Studienarzt zu benachrichtigen, wenn ihr Blutzuckerspiegel unter 70 mg/dl oder über 250 mg/dl liegt.

Die Teilnehmer treffen gegen 8:30 Uhr am Advanced Imaging Research Center (AIRC) ein. Am Vormittag werden bei den Teilnehmern Leberfettmessungen im 3 Tesla (3T) Magnetresonanz (MR)-Scanner und Messungen ihres respiratorischen Quotienten (RQ) mit einem indirekten Kalorimeter durchgeführt. Unmittelbar nach dem Scan werden zwei intravenöse Katheter zur Vorbereitung der Insulin-Klemmen-Studie platziert: ein antecubitaler Venenkatheter zur Infusion von Dextrose und Insulin und ein dorsaler Handvenenkatheter zur Blutentnahme. Zur Arterialisierung des venösen Blutes wird die Hand in einer Hotbox bei 70 °C aufbewahrt. Drei 10ml. Blutabnahmen werden für die Grundlinienmessung des Glukosespiegels, die Vorbereitung des Insulininfusats und die Analyse der Blutchemie durchgeführt. Um ca. 11:30 Uhr wird für die Dauer von 2 Stunden mit einer geprimten kontinuierlichen Infusion von normalem Humaninsulin begonnen. Eine Infusion mit 20 % Dextrose wird nach 4 Minuten Insulininfusion begonnen und angepasst, um die Euglykämie aufrechtzuerhalten. Zur Überwachung der Plasmaglukosekonzentration wird 2 Stunden lang alle 5 Minuten eine kleine Menge Blut (1 ml) entnommen. Die Gesamtmenge an Blut, die für das gesamte Verfahren benötigt wird, beträgt etwa 80 ml. Zur Bestimmung des Glukoseverlusts im Urin im postabsorptiven Zustand wird eine Urinprobe entnommen. Bei ungefähr 3 gesunden Freiwilligen wird nach der Insulinklemme eine zusätzliche Messung des Leberfetts durchgeführt, um festzustellen, ob Veränderungen durch den Test erkennbar sind. Der Teilnehmer erhält dann eine Mahlzeit und wird aus dem AIRC entlassen. Die Dauer dieses Besuchs beträgt ca. 7 Stunden.

Fasten über Nacht (Woche 0) Diabetiker werden ihre oralen diabetischen Wirkstoffe 4 Tage vor dem Besuch mit Fasten über Nacht und am Tag des Besuchs zurückhalten. Während dieser Zeit werden sie angewiesen, ihren Blutzucker täglich 30 Minuten vor dem Frühstück und vor dem Schlafengehen zu überprüfen und die Forschungskrankenschwester oder den Studienarzt zu benachrichtigen, wenn ihr Blutzuckerspiegel unter 70 mg/dl oder über 250 mg/dl liegt.

Vier Tage vor den Stoffwechselstudien beginnen die Teilnehmer mit einer maßgeschneiderten Diät, die von der Stoffwechselküche des CTRC bereitgestellt wird. Am Tag vor den Fastenstudien nehmen alle Teilnehmer mittags die letzte Mahlzeit ein und beginnen mit dem Fasten.

Am nächsten Tag werden sie im Advanced Imaging Research Center für eine Magnetresonanzspektroskopie (MRS) der Leber ankommen. Deuteriumoxid (alias schweres Wasser), das erste stabile Isotop, wird je nach Gewicht des Teilnehmers in drei Teildosen verabreicht.

Die Teilnehmer erhalten mit Kohlenstoff-13 markiertes [U-13C]-Propionat (drei 400-mg-Dosen, die über 1 Stunde oral verabreicht werden). Während der Studie erhalten die Probanden außerdem 0,5 % schweres Wasser ad libitum. Die Probanden werden kurz vor dem Infusionsprotokoll einer Messung ihres respiratorischen Quotienten (RQ) unter Verwendung eines indirekten Kalorimeters unterzogen. Den Probanden wird dann ein intravenöser Katheter gelegt und eine Infusion der stabilen Isotope Kohlenstoff-13-markierter [3,4-13C2]Glucose, Kohlenstoff-13-markierter [1,2-13C]Acetoacetat und Kohlenstoff-13-markierter [3,4- 13C]3-Hydroxybutyrat initiiert über zwei Stunden. Während dieser Zeit werden 5 ml. stündlich werden Blutentnahmen durchgeführt, um die Plasmaspiegel von unveresterten Fettsäuren (NEFA), Ketonen, Glukose, Insulin und Glukagon zu bestimmen. Zwei Stunden nach Beginn der Infusion werden 50 ml. Blutentnahmen werden durchgeführt, um Proben für die spektroskopische Bestimmung der Geschwindigkeit der Ketogenese und Citratoxidation im Zitronensäure(TCA)-Zyklus zu erhalten. Nach Abschluss der Studienverfahren wird die stabile Isotopeninfusion gestoppt und die Teilnehmer werden zur Dual-Energy-Röntgen-Absorptiometrie (DEXA) in die Ambulanz des CTRC geschickt, um die geschätzte Gesamtkörperfettmessung zu bestimmen. Nach der DEXA werden gesunde Probanden nach Hause entlassen; NAFLD-Patienten werden bei Bedarf zur Leberbiopsie in das CTRC aufgenommen.

Der Abschluss der Stoffwechselstudien in Woche 0 markiert das Ende der Studie für Kontrollpersonen, während NAFLD-Personen zu diesem Zeitpunkt mit einer Vitamin-E- oder Placebo-Therapie begonnen werden. Alle Probanden erhalten eine Mahlzeit und werden vor der Entlassung nach Hause auf Stabilität (Vitalfunktionen innerhalb normaler Grenzen) untersucht. Die Gesamtmenge an Blut, die für nächtliche Fastenstudien entnommen wird, beträgt weniger als 325 ml.

Nachsorgebesuche (Wochen 4, 8, 12) Die Probanden besuchen die Forschungskrankenschwester und/oder Dr. Browning, um die Einhaltung des Vitamin E/Placebo-Regimes zu überwachen. Bei jedem Nachsorgebesuch wird den Probanden Blut abgenommen (ca. 10 ml). gemäß Tabelle 1. Zusätzlich wird jeder Freiwillige ein MRS haben, um den Triglyceridgehalt der Leber zu messen.

Phänotyp-Besuch (Woche 16) Dies ist eine Wiederholung des Phänotyp-Besuchs in Woche –1.

Fasten über Nacht (Woche 17) Dies ist eine Wiederholung des Fastens über Nacht in Woche 0. Alle Verfahren, einschließlich der Isotopenstudien, sind gleich.