Effet de la vitamine E sur la stéatose hépatique non alcoolique

Procédures d'étude (sujets sains et NAFLD/NASH) Dépistage (semaine -2) Avant le début de la chronologie, tous les participants potentiels à l'étude seront évalués par une infirmière de recherche pour obtenir un consentement éclairé, un bref historique médical, la taille, le poids, la masse corporelle index, tour de taille/hanche, signes vitaux, environ 20 ml. de sang pour les laboratoires de dépistage et d'urine pour analyse. Les sujets NAFLD/NASH sans sérologies hépatiques disponibles auront 25 ml de sang supplémentaires prélevés. Cette visite prendra environ 60 minutes et comprendra un questionnaire de dépistage pour les antécédents familiaux de maladie, les activités de la vie quotidienne (AVQ) et la consommation d'alcool. Les sujets diabétiques retiendront également leur agent diabétique oral avant le travail de laboratoire de dépistage à jeun.

Visite d'enseignement : (Semaine -2 ou avant la semaine -1) : Une infirmière de recherche donnera aux sujets diabétiques un cours de recyclage de 30 minutes sur le diabète qui comprendra les signes et les symptômes de l'hyperglycémie et de l'hypoglycémie. Un livret pédagogique sera remis à chaque sujet diabétique. Certains patients diabétiques de type 2 (T2DM) qui ne prennent que des médicaments par voie orale ne vérifient pas régulièrement leur glycémie. Si le patient n'a pas de glucomètre, nous fournirons un glucomètre, des fournitures et des instructions d'utilisation à nos volontaires diabétiques lors de leur participation à l'étude.

Avant le début du régime standardisé, les sujets maintiendront leur routine alimentaire normale. Pendant trois à quatre jours avant les procédures du protocole, les sujets seront soumis à un régime alimentaire standardisé fourni par la cuisine métabolique du CTRC. De plus, les participants s'abstiendront de faire de l'exercice physique au moins 3 jours avant les procédures. De plus, les participants au T2DM retiendront leurs agents diabétiques oraux pendant 3 à 4 jours avant les procédures du protocole.

Phénotypage (semaine -1) Les participants seront invités à noter leur consommation d'aliments et de boissons pendant trois jours avant cette visite. Ce journal alimentaire sera transmis au diététicien du Centre de recherche translationnelle clinique (CTRC) pour le calcul des protéines, des glucides et des lipides afin de calculer un plan de repas sur mesure de 3,5 jours à consommer juste avant le jeûne nocturne.

Il sera demandé aux participants de ne rien manger ni boire après minuit avant cette visite en préparation des procédures d'étude de la journée.

Les participants diabétiques retiendront leurs agents diabétiques oraux pendant 3 jours avant la visite de phénotypage et le jour de la visite. Pendant ce temps, ils seront invités à vérifier leur glycémie 30 minutes avant chaque repas et au coucher tous les jours et informeront l'infirmière de recherche ou le médecin de l'étude si leur glycémie est inférieure à 70 mg/dl ou supérieure à 250 mg/dl.

Les participants arriveront au Centre de recherche en imagerie avancée (AIRC) vers 8h30. Au cours de la matinée, les participants auront des mesures de graisse hépatique dans le scanner à résonance magnétique (RM) de 3 Tesla (3T) et une mesure de leur quotient respiratoire (QR) à l'aide d'un calorimètre indirect. Immédiatement après l'analyse, deux cathéters intraveineux seront placés en préparation de l'étude insuline/clamp : un cathéter veineux antécubital pour infuser du dextrose et de l'insuline et un cathéter veineux dorsal pour le prélèvement sanguin. La main sera conservée dans une boîte chaude à 70 °C pour l'artérialisation du sang veineux. Trois 10 ml. des prises de sang seront obtenues pour la mesure de la glycémie de base, la préparation de la perfusion d'insuline et l'analyse de la chimie du sang. Vers 11 h 30, une perfusion continue amorcée d'insuline humaine ordinaire sera lancée pour une durée de 2 heures. Une perfusion de dextrose à 20 % sera démarrée après 4 minutes de perfusion d'insuline et ajustée pour maintenir l'euglycémie. Une petite quantité de sang (1 ml) sera prélevée toutes les 5 minutes pendant 2 heures pour surveiller la concentration plasmatique de glucose. La quantité totale de sang requise pour l'ensemble de la procédure est d'environ 80 ml. Un échantillon d'urine sera prélevé pour la détermination des pertes de glucose urinaire dans l'état post-absorptif. Environ 3 volontaires sains subiront une mesure supplémentaire de la graisse hépatique après le clamp à insuline pour déterminer si des changements sont évidents à partir du test. Le participant recevra ensuite un repas et sera déchargé de l'AIRC. La durée de cette visite est d'environ 7 heures.

Jeûne de nuit (semaine 0) Les participants diabétiques retiendront leurs agents antidiabétiques oraux pendant 4 jours avant la visite de jeûne de nuit et le jour de la visite. Pendant ce temps, ils seront invités à vérifier leur glycémie 30 minutes avant le petit-déjeuner et au coucher tous les jours et informeront l'infirmière de recherche ou le médecin de l'étude si leur glycémie est inférieure à 70 mg/dl ou supérieure à 250 mg/dl.

Quatre jours avant les études métaboliques, les participants commenceront un régime alimentaire sur mesure fourni par la cuisine métabolique du CTRC. La veille des études sur le jeûne, tous les participants prendront le dernier repas à midi et commenceront le jeûne.

Le lendemain, ils arriveront au Centre de recherche en imagerie avancée pour une spectroscopie par résonance magnétique (SRM) du foie. Oxyde de deutérium (alias eau lourde), le premier isotope stable, sera administré selon le poids du participant en trois doses fractionnées.

Les participants recevront du propionate [U-13C] marqué au carbone 13 (trois doses de 400 mg administrées par voie orale pendant 1 heure). Au cours de l'étude, les sujets recevront également 0,5 % d'eau lourde ad libitum. Les sujets subiront une mesure de leur quotient respiratoire (QR) à l'aide d'un calorimètre indirect juste avant le protocole de perfusion. Les sujets auront ensuite un cathéter intraveineux placé et une perfusion des isotopes stables marqués au carbone 13 [3,4-13C2]glucose, marqués au carbone 13 [1,2-13C]acétoacétate et marqués au carbone 13 [3,4- 13C]3-hydroxybutyrate initié en deux heures. Pendant cette période, 5 ml. des prélèvements sanguins auront lieu toutes les heures pour déterminer les taux plasmatiques d'acides gras non estérifiés (AGNE), de cétones, de glucose, d'insuline et de glucagon. Deux heures après le début de la perfusion, un flacon de 50 ml. une prise de sang sera effectuée pour obtenir des échantillons pour la détermination spectroscopique du taux de cétogenèse et d'oxydation du citrate dans le cycle de l'acide citrique (TCA). À la fin des procédures d'étude, la perfusion d'isotopes stables sera arrêtée et les participants seront envoyés à la clinique externe du CTRC pour une absorptiométrie à rayons X à double énergie (DEXA) afin de déterminer la mesure estimée de la graisse corporelle totale. Après la DEXA, les sujets sains seront renvoyés chez eux ; Les sujets NAFLD seront admis au CTRC pour une biopsie hépatique, si nécessaire.

La conclusion des études métaboliques à la semaine 0 marque la fin de l'étude pour les sujets témoins, tandis que les sujets NAFLD seront initiés à la vitamine E ou à la thérapie placebo à ce stade. Tous les sujets recevront un repas et seront évalués pour leur stabilité (signes vitaux dans les limites normales) avant leur retour à domicile. La quantité totale de sang prélevé pour les études de jeûne nocturne sera inférieure à 325 ml.

Visites de suivi (semaines 4, 8, 12) Les sujets rendront visite à l'infirmière de recherche et/ou au Dr Browning pour surveiller l'observance du régime vitamine E/placebo. À chaque visite de suivi, les sujets auront du sang prélevé (environ 10 ml). selon le tableau 1. De plus, chaque volontaire aura un MRS pour mesurer la teneur en triglycérides du foie.

Visite de phénotype (semaine 16) Il s'agit d'une répétition de la visite de phénotype à la semaine -1.

Jeûne nocturne (semaine 17) Il s'agit d'une répétition du jeûne nocturne de la semaine 0. Toutes les procédures, y compris les études isotopiques, seront les mêmes.