Efeito da vitamina E na doença hepática gordurosa não alcoólica

Procedimentos do estudo (sujeitos saudáveis ​​e NAFLD/NASH) Triagem (Semana -2) Antes do início do cronograma, todos os participantes potenciais do estudo serão avaliados por uma enfermeira de pesquisa para obter consentimento informado, um breve histórico médico, altura, peso, massa corporal índice, circunferência da cintura/quadril, sinais vitais, aproximadamente 20mls. de sangue para exames laboratoriais e urina para análise. Sujeitos NAFLD/NASH sem sorologias hepáticas disponíveis terão 25 ml adicionais de sangue coletado. Esta visita levará aproximadamente 60 minutos e incluirá um questionário de triagem para histórico familiar de doenças, atividades da vida diária (AVD) e consumo de álcool. Indivíduos diabéticos também reterão seu agente diabético oral antes do teste de laboratório de triagem em jejum.

Visita de Ensino: (Semana -2 ou antes da semana -1): Uma enfermeira pesquisadora ministrará aos diabéticos um curso de atualização de 30 minutos sobre diabetes que incluirá os sinais e sintomas de hiper e hipoglicemia. Será entregue uma apostila didática para cada sujeito diabético. Alguns pacientes diabéticos tipo 2 (T2DM) apenas em medicação oral não verificam regularmente o açúcar no sangue. Se o paciente não tiver um glicosímetro, forneceremos um glicosímetro, suprimentos e instruções de uso por nossos voluntários diabéticos do estudo durante sua participação no estudo.

Antes do início da dieta padronizada, os indivíduos manterão sua rotina alimentar normal. Durante três a quatro dias antes dos procedimentos do protocolo, os indivíduos serão colocados em uma dieta padronizada fornecida pela cozinha metabólica do CTRC. Além disso, os participantes deverão abster-se de exercícios físicos pelo menos 3 dias antes dos procedimentos. Além disso, os participantes com DM2 suspenderão seus agentes diabéticos orais por 3-4 dias antes dos procedimentos do protocolo.

Fenotipagem (Semana -1) Os participantes serão solicitados a anotar o consumo de alimentos e bebidas três dias antes desta visita. Este registro alimentar será entregue ao nutricionista do Centro de Pesquisa Clínica Translacional (CTRC) para cálculo de proteínas, carboidratos e gorduras, a fim de calcular um plano de refeição personalizado de 3,5 dias a ser consumido imediatamente antes do jejum noturno.

Os participantes serão solicitados a não comer ou beber nada depois da meia-noite antes desta visita, em preparação para os procedimentos de estudo do dia.

Os participantes diabéticos suspenderão seus agentes diabéticos orais por 3 dias antes da visita de fenotipagem e no dia da visita. Durante esse período, eles serão instruídos a verificar a glicose no sangue 30 minutos antes de cada refeição e na hora de dormir diariamente e notificarão a enfermeira da pesquisa ou o médico do estudo se o nível de glicose no sangue estiver abaixo de 70 mg/dl ou acima de 250 mg/dl.

Os participantes chegarão ao Centro de Pesquisa de Imagem Avançada (AIRC) aproximadamente às 8h30. Durante a manhã, os participantes terão medições de gordura hepática no scanner de Ressonância Magnética (MR) de 3 Tesla (3T) e medição de seu quociente respiratório (RQ) usando um calorímetro indireto. Imediatamente após a varredura, dois cateteres intravenosos serão colocados em preparação para o estudo de insulina/pinça: um cateter de veia antecubital para infundir dextrose e insulina e um cateter de veia dorsal da mão para amostragem de sangue. A mão será mantida em caixa quente a 70°C para arterialização do sangue venoso. Três 10ml. coletas de sangue serão obtidas para a medição do nível de glicose basal, preparação de infusão de insulina e análise química do sangue. Aproximadamente às 11h30, uma infusão contínua de insulina humana regular será iniciada com a duração de 2 horas. Uma infusão de dextrose 20% será iniciada após 4 minutos de infusão de insulina e ajustada para manter a euglicemia. Uma pequena quantidade de sangue (1 ml) será coletada a cada 5 minutos por 2 horas para monitorar a concentração de glicose no plasma. A quantidade total de sangue necessária para todo o procedimento é de aproximadamente 80 ml. Uma amostra de urina será coletada para determinação das perdas urinárias de glicose no estado pós-absortivo. Aproximadamente 3 voluntários saudáveis ​​farão uma medição adicional da gordura hepática após o clamp de insulina para determinar se as alterações são evidentes no teste. O participante receberá uma refeição e será liberado do AIRC. A duração desta visita é de aproximadamente 7 horas.

Jejum Noturno (Semana 0) Os participantes diabéticos suspenderão seus agentes diabéticos orais por 4 dias antes da visita do Jejum Noturno e no dia da visita. Durante esse período, eles serão instruídos a verificar a glicemia 30 minutos antes do café da manhã e na hora de dormir diariamente e notificarão a enfermeira da pesquisa ou o médico do estudo se o nível de glicemia estiver abaixo de 70 mg/dl ou acima de 250 mg/dl.

Quatro dias antes dos estudos metabólicos, os participantes iniciarão uma dieta personalizada fornecida pela cozinha metabólica do CTRC. No dia anterior aos estudos de jejum, todos os participantes farão a última refeição ao meio-dia e iniciarão o jejum.

No dia seguinte, eles chegarão ao Centro de Pesquisa de Imagem Avançada para uma Espectroscopia de Ressonância Magnética (ERM) hepática. Óxido de deutério (também conhecido como água pesada), o primeiro isótopo estável, será administrado de acordo com o peso do participante em três doses fracionadas.

Os participantes receberão propionato [U-13C] marcado com carbono-13 (três doses de 400 mg administradas por via oral durante 1 hora). Durante o estudo, os indivíduos também receberão 0,5% de água pesada ad libitum. Os indivíduos serão submetidos à medição de seu quociente respiratório (RQ) usando um calorímetro indireto imediatamente antes do protocolo de infusão. Os indivíduos terão então um cateter intravenoso colocado e uma infusão dos isótopos estáveis ​​marcados com carbono-13 [3,4-13C2]glicose, [1,2-13C]acetoacetato marcado com carbono-13 e marcado com carbono-13 [3,4- 13C]3-hidroxibutirato iniciado ao longo de duas horas. Durante este período, 5 ml. coletas de sangue ocorrerão a cada hora para determinar os níveis plasmáticos de ácidos graxos não esterificados (NEFA), cetonas, glicose, insulina e glucagon. Duas horas após o início da infusão, 50 ml. Será realizada coleta de sangue para obtenção de amostras para determinação espectroscópica da taxa de cetogênese e oxidação do citrato no ciclo do ácido cítrico (TCA). Após a conclusão dos procedimentos do estudo, a infusão de isótopos estáveis ​​será interrompida e os participantes serão enviados ao ambulatório CTRC para Absorciometria de Raios X de Energia Dupla (DEXA) para determinar a medição de gordura corporal total estimada. Após o DEXA, os indivíduos saudáveis ​​receberão alta para casa; Indivíduos com DHGNA serão internados no CTRC para biópsia hepática, se necessário.

A conclusão dos estudos metabólicos na semana 0 marca o fim do estudo para indivíduos de controle, enquanto os indivíduos com DHGNA serão iniciados em terapia com vitamina E ou placebo neste momento. Todos os indivíduos receberão uma refeição e serão avaliados quanto à estabilidade (sinais vitais dentro dos limites normais) antes da alta para casa. A quantidade total de sangue coletada para estudos de jejum noturno será inferior a 325 mls.

Visitas de Acompanhamento (Semanas 4, 8, 12) Os participantes visitarão a enfermeira da pesquisa e/ou o Dr. Browning para monitorar a conformidade com o regime de vitamina E/placebo. Em cada visita de acompanhamento, os indivíduos terão sangue coletado (aproximadamente 10mls). por Tabela 1. Além disso, cada voluntário terá uma MRS para medir o conteúdo de triglicerídeos no fígado.

Visita do fenótipo (semana 16) Esta é uma repetição da visita do fenótipo na semana -1.

Jejum Noturno (Semana 17) Esta é uma repetição do jejum noturno na Semana 0. Todos os procedimentos, incluindo os estudos de isótopos, serão os mesmos.