Efecto de la vitamina E en la enfermedad del hígado graso no alcohólico

Procedimientos del estudio (sujetos sanos y con NAFLD/NASH) Detección (semana -2) Antes del inicio del cronograma, todos los participantes potenciales del estudio serán evaluados por una enfermera de investigación para obtener el consentimiento informado, un breve historial médico, altura, peso, masa corporal índice, circunferencia de cintura/cadera, signos vitales, aproximadamente 20 ml. de sangre para laboratorios de detección y orina para análisis. A los sujetos con NAFLD/NASH sin serologías hepáticas disponibles se les extraerán 25 ml adicionales de sangre. Esta visita durará aproximadamente 60 minutos e incluirá un cuestionario de detección de antecedentes familiares de enfermedades, actividades de la vida diaria (ADL) y consumo de alcohol. Los sujetos diabéticos también retendrán su agente diabético oral antes del análisis de laboratorio en ayunas.

Visita de enseñanza: (Semana -2 o antes de la semana -1): una enfermera de investigación brindará a los sujetos diabéticos un curso de actualización de 30 minutos sobre diabetes que incluirá los signos y síntomas de hiper e hipoglucemia. Se entregará un cuadernillo didáctico a cada sujeto diabético. Algunos pacientes con diabetes tipo 2 (T2DM) que solo toman medicamentos orales no controlan regularmente su nivel de azúcar en la sangre. Si el paciente no tiene un glucómetro, le proporcionaremos un glucómetro, suministros e instrucciones de uso a nuestros voluntarios diabéticos del estudio durante su participación en el estudio.

Antes del inicio de la dieta estandarizada, los sujetos mantendrán su rutina dietética normal. Durante tres o cuatro días antes de los procedimientos del protocolo, los sujetos seguirán una dieta estandarizada proporcionada por la cocina metabólica del CTRC. Además, los participantes se abstendrán de realizar ejercicio físico al menos 3 días antes de los procedimientos. Además, los participantes con DM2 retendrán sus agentes diabéticos orales durante 3 o 4 días antes de los procedimientos del protocolo.

Fenotipado (Semana -1) Se les pedirá a los participantes que anoten el consumo de alimentos y bebidas durante los tres días anteriores a esta visita. Este registro de alimentos se entregará al dietista del Centro de Investigación Clínica Traslacional (CTRC) para el cálculo de proteínas, carbohidratos y grasas a fin de calcular un plan de comidas personalizado de 3,5 días que se consumirá justo antes del ayuno nocturno.

Se les pedirá a los participantes que no coman ni beban nada después de la medianoche anterior a esta visita en preparación para los procedimientos del estudio del día.

Los participantes diabéticos no tomarán sus agentes diabéticos orales durante 3 días antes de la visita de fenotipado y el día de la visita. Durante este tiempo, se les indicará que controlen su nivel de glucosa en sangre 30 minutos antes de cada comida y a la hora de acostarse todos los días y notificarán a la enfermera de investigación o al médico del estudio si su nivel de glucosa en sangre es inferior a 70 mg/dl o superior a 250 mg/dl.

Los participantes llegarán al Centro de Investigación de Imágenes Avanzadas (AIRC) aproximadamente a las 8:30 a. m. Durante la mañana, los participantes tendrán mediciones de grasa hepática en el escáner de Resonancia Magnética (MR) de 3 Tesla (3T) y medición de su cociente respiratorio (RQ) usando un calorímetro indirecto. Inmediatamente después de la exploración, se colocarán dos catéteres intravenosos en preparación para el estudio de insulina/pinza: un catéter en la vena antecubital para infundir dextrosa e insulina y un catéter en la vena dorsal de la mano para tomar muestras de sangre. La mano se mantendrá en una caja caliente a 70 °C para la arterialización de la sangre venosa. Tres de 10 ml. se obtendrán extracciones de sangre para la medición del nivel de glucosa inicial, la preparación de la infusión de insulina y el análisis químico de la sangre. Aproximadamente a las 11:30 a. m., se iniciará una infusión continua cebada de insulina humana regular durante 2 horas. Se iniciará una infusión de dextrosa al 20 % después de 4 minutos de infusión de insulina y se ajustará para mantener la euglucemia. Se extraerá una pequeña cantidad de sangre (1 ml) cada 5 minutos durante 2 horas para controlar la concentración de glucosa en plasma. La cantidad total de sangre necesaria para todo el procedimiento es de aproximadamente 80 ml. Se recolectará una muestra de orina para la determinación de las pérdidas de glucosa urinaria en el estado posterior a la absorción. Aproximadamente 3 voluntarios sanos tendrán una medición adicional de la grasa hepática después de la pinza de insulina para determinar si los cambios son evidentes a partir de la prueba. Luego se le dará una comida al participante y se le dará de alta del AIRC. La duración de esta visita es de aproximadamente 7 horas.

Ayuno nocturno (semana 0) Los participantes diabéticos no tomarán sus agentes diabéticos orales durante 4 días antes de la visita de ayuno nocturno y el día de la visita. Durante este tiempo, se les indicará que controlen su glucosa en sangre 30 minutos antes del desayuno y antes de acostarse todos los días y notificarán a la enfermera de investigación o al médico del estudio si su nivel de glucosa en sangre es inferior a 70 mg/dl o superior a 250 mg/dl.

Cuatro días antes de los estudios metabólicos, los participantes comenzarán una dieta personalizada proporcionada por la cocina metabólica de CTRC. El día anterior a los estudios de ayuno, todos los participantes tendrán la última comida al mediodía y comenzarán a ayunar.

Al día siguiente llegarán al Centro de Investigación de Imágenes Avanzadas para una Espectroscopía de Resonancia Magnética (MRS) del hígado. Óxido de deuterio (a.k.a. agua pesada), el primer isótopo estable, se administrará de acuerdo con el peso del participante en tres dosis divididas.

Los participantes recibirán propionato [U-13C] marcado con carbono 13 (tres dosis de 400 mg administradas por vía oral durante 1 hora). Durante el estudio, a los sujetos también se les administrará agua pesada al 0,5 % ad libitum. Los sujetos se someterán a la medición de su cociente respiratorio (RQ) usando un calorímetro indirecto justo antes del protocolo de infusión. Luego, a los sujetos se les colocará un catéter intravenoso y se les administrará una infusión de isótopos estables marcados con carbono 13 [3,4-13C2]glucosa, [1,2-13C]acetoacetato marcado con carbono-13 y [3,4-C2] marcado con carbono-13. 13C]3-hidroxibutirato iniciado durante dos horas. Durante este período, 5 ml. Se realizarán extracciones de sangre cada hora para determinar los niveles plasmáticos de ácidos grasos no esterificados (NEFA), cetonas, glucosa, insulina y glucagón. A las dos horas del inicio de la infusión, se administran 50 ml. se realizará una extracción de sangre para obtener muestras para la determinación espectroscópica de la tasa de cetogénesis y oxidación de citrato en el ciclo del ácido cítrico (TCA). Al finalizar los procedimientos del estudio, se detendrá la infusión de isótopos estables y se enviará a los participantes a la clínica ambulatoria de CTRC para realizar absorciometría de rayos X de energía dual (DEXA) para determinar la medición estimada de la grasa corporal total. Tras la DEXA, los sujetos sanos serán dados de alta a domicilio; Los sujetos con NAFLD serán admitidos en CTRC para una biopsia de hígado, si es necesario.

La conclusión de los estudios metabólicos en la semana 0 marca el final del estudio para los sujetos de control, mientras que los sujetos con NAFLD comenzarán con la terapia con vitamina E o placebo en este momento. A todos los sujetos se les dará una comida y se evaluará su estabilidad (signos vitales dentro de los límites normales) antes del alta a casa. La cantidad total de sangre recolectada para los estudios en ayunas durante la noche será inferior a 325 ml.

Visitas de seguimiento (semanas 4, 8, 12) Los sujetos visitarán a la enfermera de investigación y/o al Dr. Browning para controlar el cumplimiento del régimen de vitamina E/placebo. En cada visita de seguimiento, se recolectará sangre de los sujetos (aproximadamente 10 ml). según la Tabla 1. Además, cada voluntario tendrá un MRS para medir el contenido de triglicéridos en el hígado.

Visita de fenotipo (semana 16) Esta es una repetición de la visita de fenotipo en la semana -1.

Ayuno nocturno (semana 17) Esta es una repetición del ayuno nocturno de la semana 0. Todos los procedimientos, incluidos los estudios de isótopos, serán los mismos.