Mikrobiomin ei-invasiivisen diagnoosityökalun kehittäminen (ERA-niMIC)
Ei-invasiivisen diagnoosityökalun kehittäminen mikrobiotan analysoimiseksi hedelmättömien potilaiden lisääntymistulosten parantamiseksi.
Vaikka endometriumin kudosta on perinteisesti pidetty vapaana bakteereista, viimeaikaiset tutkimukset ovat dokumentoineet kohdun limakalvon mikrobiomin olemassaolon. Tutkimusryhmämme suorittamassa pilottitutkimuksessa kohdun limakalvon mikro-organismit analysoitiin kohdun limakalvon nestenäytteistä (EF) seuraavan sukupolven sekvensointia (NGS) käyttäen. Aiemmin julkaistujen tutkimusten mukaisesti kohdun limakalvo koostuu normaaleissa olosuhteissa pääasiassa erilaisista aineista. Lactobacillus-suvun lajit. Lisäksi todettiin, että muiden patogeenisten bakteerien, kuten Streptococcus ja/tai Gardnerella, läsnäolo voi muuttaa kohdun limakalvon mikrobiomia ja häiritä kohdun ympäristöä, mikä vaikuttaa implantaationopeuteen ja raskauden onnistumiseen.
Tämän hankkeen tavoitteena on validoida lisääntymisikäisten naisten kohdun limakalvon mikrobiomi ja yrittää vahvistaa endometriumin mikrobiomin ja lisääntymistulosten välistä suhdetta potilailla, jotka saavat avustettua lisääntymishoitoa (ART). Endometrium Receptivity Analysis (ERA) -työkalun käyttö yhdessä kohdun limakalvoflooran analyysin kanssa ennen alkionsiirtoa mahdollistaa endometriumin patogeenien läsnäolon vaikutusta implantaatioon reseptiivisillä potilailla.
Siksi tämän projektin painopiste on ei-invasiivisen diagnoosityökalun kehittäminen ja kliininen validointi mikrobiotan analysoimiseksi ja mikrobiomitutkimuksen lisääminen ERA-analyysiin.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Alkion istutus on lajin selviytymiselle kriittinen prosessi, joka on suhteellisen tehoton varsinkin ihmisillä. Keskeisiä elementtejä ovat alkio, äidin kohdun limakalvo ja niiden välinen ristikommunikaatio eri tieteellisistä näkökulmista. Endometriumin vastaanottavuus kuvaa fenotyyppiä, joka mahdollistaa alkion kiinnittymisen ja istukan tapahtumisen. Koska tarvitaan tarkka ja objektiivinen molekyylidiagnostinen testi kohdun limakalvon vastaanoton suhteen, kehitettiin Endometrium Receptivity Analysis (ERA). ERA-testi on mukautettu ekspressiomikromatriisi, joka tunnistaa yksilöllisen implantaatioikkunan (WOI) transkriptomisen ilmentymisprofiilin allekirjoituksen. Sen kliininen käyttökelpoisuus on osoitettu potilailla, joilla on epäonnistunut implantaatio ja joista 25 %:lla on siirtynyt WOI, joka tulee raskaaksi, kun alkionsiirto on suoritettu ERA:n ennustamalla oikealla WOI:lla. Tämä toimenpide vaatii kuitenkin kohdun limakalvon biopsian (EB), joka on tämän diagnoositestin suurin haittapuoli, koska alkionsiirtoa joudutaan lykkäämään seuraavaan kiertoon ja myös potilaille mahdollisesti aiheutuvia epämukavuutta. Tästä syystä suoritettiin edellinen pilottitutkimus sen vahvistamiseksi, voidaanko kohdun limakalvon reseptiivisyys ennustaa non-invasiivisilla menetelmillä kohdun limakalvon (EF) näytteissä. ERA-testin geenipaneelia tutkittiin kohdun limakalvobiopsioista saaduista epiteelisoluista ja stroomasoluista sekä EF:stä yksittäissolutasolla eristetyistä soluista, mikä osoitti, että EF:n tärkeimmät solut luokitellaan yhdessä epiteelipopulaation kanssa.
Toisaalta, jotta voitaisiin paremmin ymmärtää mekanismeja, jotka yhdistävät kohdun limakalvon vastaanottavuuden ja/tai alkion istutuksen muuttuneeseen kohdun limakalvon mikrobiomiin, suoritettiin toinen pilottitutkimus kohdun limakalvon mikrobiomin koostumuksen määrittämiseksi bakteerin 16S ribosomaalisen analyysin jälkeen. NGS:n RNA. Mielenkiintoista on, että potilailla, joilla oli reseptiivinen kohdun limakalvo ja jotka diagnosoitiin Endometrial Receptivity Array (ERA) -testillä ja joilla oli patogeenejä sisältävä endometriumin mikrobiomi tai joita ei hallitsevat Lactobacillus-suvun bakteerit (NLD), implantaatio osoitti merkittävästi vähemmän (23,1 % vs 60,7 % p = 0,02). raskaus (33,3 % vs 70,6 %, p = 0,03), käynnissä oleva raskaus alkionsiirtoa kohden (13,3 % vs 58,8 %, p = 0,03) ja elävänä syntymä (6,7 % vs 58,8 %, p = 0,002) verrattuna terveisiin. kohdun limakalvon mikrobiomi, jota hallitsee Lactobacillus (LD). Lisäksi tämä suhde oli paljon merkittävämpi, kun löydetyt patogeeniset lajit kuuluivat Gardnerella- ja Streptococcus-sukuun. Tämä on linjassa muiden julkaistujen tutkimusten kanssa, jotka analysoivat kohdun limakalvon patogeenien vaikutusta IVF-hoidoissa ja korostavat bakteeriyhteisöjen tutkimuksen merkitystä lisääntymisterveydelle.
Nämä alustavat tulokset huomioon ottaen tämän tutkimuksen tavoitteena on validoida suuremmassa otosjoukossa endometriumin mikrobiomin epätasapainon ja ART-hoitoa saavien potilaiden lisääntymismenestyksen heikkenemisen välinen suhde. Tätä varten kokeen suunnittelua parannetaan seuraavilla alueilla: (i) suurempaa näytekokoa analysoidaan edellisessä kohdun limakalvon mikrobiomia koskevassa pilottitutkimuksessa saatujen tulosten validoimiseksi, (ii) parinäytteet kohdun limakalvon nesteestä ja kohdun limakalvosta. biopsiasta analysoidaan mikrobiprofiili sen selvittämiseksi, liittyykö näytetyyppiin bakteerien vaihtelua, (iii) kohdun limakalvon mikrobiota arvioidaan samanaikaisesti ERA:n kanssa tämän työkalun lisädiagnoosina ja (iv) kohdun limakalvon analyysi. mikrobiota suoritetaan bakteerien metagenomien sekvensoinnin edistyneimmällä teknologialla, jotta jokaisesta näytteestä tunnistettujen mikro-organismien tietoja voidaan laajentaa.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Buenos Aires, Argentiina, C1425DGQ
- Pregna Medicina Reproductiva
-
-
Santa Fe
-
Rosario, Santa Fe, Argentiina
- Gestanza Medicina Reproductiva
-
-
-
-
-
Madrid, Espanja, 28036
- ProcreaTec
-
-
Malaga
-
Fuengirola, Malaga, Espanja, 29640
- Clinica Fertia
-
-
-
-
Osaka Prefecture
-
Osaka, Osaka Prefecture, Japani, 557-0045
- Oak Clinic Sumiyoshi
-
-
-
-
British Columbia
-
Burnaby, British Columbia, Kanada, V5G 4X7
- Pacific Center for Reproductive Medicine
-
-
-
-
Selangor
-
Petaling Jaya, Selangor, Malesia, 47810
- Alpha Fertility Center
-
-
-
-
-
Mexico City, Meksiko, 11000
- New Hope Fertility Center
-
-
-
-
-
Istanbul, Turkki
- Bahceci Fulya IVF Center
-
-
-
-
Connecticut
-
Norwalk, Connecticut, Yhdysvallat, 06861
- RMA Connecticut
-
-
Florida
-
Margate, Florida, Yhdysvallat, 33063
- IVF Florida
-
-
Missouri
-
Chesterfield, Missouri, Yhdysvallat, 63005
- Missouri Center for Reproductive Medicine (MCRM Fertility)
-
-
Washington
-
Arlington, Washington, Yhdysvallat, 22203
- Dominion Fertility
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- In vitro -hedelmöitys (IVF) / intrasytoplasminen siittiöinjektio (ICSI) tai OVODON-injektio ERA-indikaatiolla, preimplantaatiogeeniseulonta (PGS) -indikaatiolla tai ilman, joille siirretään alkion jäädytetyillä blastokystivaiheen alkioilla (päivä 5/päivä 6) hormonikorvaushoitojakso (HRT).
- Äidin ikä: ≤40 vuotta (IVF/ICSI-potilaat)
- Äidin ikä: ≤50 vuotta (OVODONATION-potilaat)
- Painoindeksi (BMI): 18,5 - 30 kg / m2 (molemmat mukaan lukien)
- Negatiiviset serologiset testit ihmisen immuunikatovirukselle (HIV), hepatiitti B -virukselle (HBV), hepatiitti C -virukselle (HCV), nopealle plasmareagiinille (RPR) kupan varalta
- Naiset, joilla on säännöllinen kuukautiskierto (3-4 / 26-35 päivää)
- Siittiöiden pitoisuus: > 2 miljoonaa siittiötä/ml
Poissulkemiskriteerit:
- Potilaat, jotka ovat kantaneet kohdunsisäistä laitetta viimeisen 3 kuukauden aikana
- Potilaat, joille on määrätty antibiootteja viimeisen 3 kuukauden aikana ennen näytteenottoa. (Voidaan hyväksyä ne tapaukset, joissa potilas on aiemmin saanut ennaltaehkäiseviä antibiootteja munasarjapunktioon stimulaatiosyklin aikana keskuksen normaalin kliinisen käytännön mukaisesti. Tämän antibiootin antamisen tulisi olla vähintään 1 kuukausi ennen näytteenottoa).
- Adnexaaliset tai kohdun patologiat kohdun epämuodostumina, jotka voivat vaikuttaa implantaationopeuteen (esim. polyypit, intramuraalinen myooma ≥ 4 cm tai submukosaalinen, septum, hydrosalpinx jne.). Potilaat, joilla on jokin aiemmin kuvatuista patologioista (ennen tai jälkeen niiden sisällyttämisen), saavat osallistua tähän tutkimukseen, kunhan heidät hoidetaan kirurgisesti ennen tutkimustoimenpiteitä.
- Vakavien tai hallitsemattomien bakteeri-, sieni- tai virusinfektioiden esiintyminen, jotka voivat päätutkijan mielestä häiritä potilaan osallistumista tutkimukseen tai tutkimustulosten arviointia.
- Mikä tahansa sairaus tai lääketieteellinen tila, joka on epävakaa tai voi vaarantaa potilaan turvallisuuden ja noudattaa tutkimusta.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Havaintomallit: Kohortti
- Aikanäkymät: Tulevaisuuden
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
LD-mikrobiomi, joka on vastaanottavainen ERA-testille
ERA-testillä reseptiiviset potilaat, joiden kohdun limakalvon mikrobiota koostuu pääasiassa Lactobacillus-suvun eri lajeista, jotka on määritetty NGS-sekvensoinnilla.
|
Samana päivänä, jona EB:n ERA on indikoitu, 5. päivänä hormonikorvaushoitosyklissä, jossa on 5 päivää progesteronia, yleisen kliinisen käytännön mukaisesti EF-näyte imetään välittömästi ennen EB:tä ERA:n varalta.
Tätä EF-näytettä käytetään mikrobiomin ei-invasiiviseen diagnoosiin, ja myös pientä osaa endometriumin kudoksesta, joka on saatu ERA:lla kohdun limakalvon reseptiivisyysdiagnoosiin, käytetään kontrollina kohdun limakalvon mikrobiomin tutkimuksessa.
Potilaat, joilla on reseptiivinen kohdun limakalvo, jatkavat ART-hoitoaan kliinisen vakioprotokollan mukaisesti.
Potilaat, joilla on ei-reseptiivinen kohdun limakalvo, noudattavat ERA-testistä johdettua suositusta valita päivä toiselle EB-näytteelle, jossa EF-näytteen otto toistetaan.
Lopuksi EF:n vastaanottavuus ja mikrobiomitulokset korreloivat kohdun limakalvon kudoksessa ja näiden potilaiden lisääntymistuloksissa alkionsiirron jälkeen.
|
|
NLD-mikrobiomi, joka on vastaanottavainen ERA-testille
Reseptiiviset potilaat ERA-testillä, joilla on kohdun limakalvon mikrobiota, joka koostuu erilaisista patogeenisistä bakteereista, kuten Streptococcus ja Gardnerella, tai joita ei hallitse Lactobacillus-suvun bakteerit, määritetty NGS-sekvensoinnilla.
|
Samana päivänä, jona EB:n ERA on indikoitu, 5. päivänä hormonikorvaushoitosyklissä, jossa on 5 päivää progesteronia, yleisen kliinisen käytännön mukaisesti EF-näyte imetään välittömästi ennen EB:tä ERA:n varalta.
Tätä EF-näytettä käytetään mikrobiomin ei-invasiiviseen diagnoosiin, ja myös pientä osaa endometriumin kudoksesta, joka on saatu ERA:lla kohdun limakalvon reseptiivisyysdiagnoosiin, käytetään kontrollina kohdun limakalvon mikrobiomin tutkimuksessa.
Potilaat, joilla on reseptiivinen kohdun limakalvo, jatkavat ART-hoitoaan kliinisen vakioprotokollan mukaisesti.
Potilaat, joilla on ei-reseptiivinen kohdun limakalvo, noudattavat ERA-testistä johdettua suositusta valita päivä toiselle EB-näytteelle, jossa EF-näytteen otto toistetaan.
Lopuksi EF:n vastaanottavuus ja mikrobiomitulokset korreloivat kohdun limakalvon kudoksessa ja näiden potilaiden lisääntymistuloksissa alkionsiirron jälkeen.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Uuden ei-invasiivisen endometriumimikrobiomin (EM) diagnoositestin kehittäminen hedelmättömille potilaille
Aikaikkuna: 24 kuukautta
|
Bakteeri-DNA-analyysi Next Generation Sequencing (NGS) -menetelmällä käyttämällä kohdun limakalvon nestettä EM-diagnoosissa.
Tämä mitataan kunkin bakteeri-DNA:n prosenttiosuudella EF-näytteissä
|
24 kuukautta
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Elävä syntyvyys
Aikaikkuna: 40 viikkoa
|
Syntyneiden vauvojen määrä alkionsiirtoa kohden
|
40 viikkoa
|
|
Implantaationopeus
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Implantoitujen alkioiden lukumäärä siirrettyjen alkioiden kokonaismäärää kohti
|
12 viikkoa
|
|
Kliiniset keskenmenot
Aikaikkuna: 20 viikkoa
|
Kliinisten keskenmenojen määrä raskauksien kokonaismäärää kohti
|
20 viikkoa
|
|
Kohdunulkoiset raskaudet
Aikaikkuna: 20 viikkoa
|
Kohdunulkoisten raskauksien määrä raskauksien kokonaismäärää kohden
|
20 viikkoa
|
|
Raskausaste
Aikaikkuna: 20 viikkoa
|
Raskauksien määrä alkionsiirtoa kohden
|
20 viikkoa
|
|
Biokemialliset raskaudet
Aikaikkuna: 20 viikkoa
|
Biokemiallisten raskauksien määrä raskauksien kokonaismäärää kohti
|
20 viikkoa
|
|
Jatkuva raskausaste
Aikaikkuna: 40 viikkoa
|
Meneillään olevien raskauksien määrä alkionsiirtoa kohden
|
40 viikkoa
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Opintojen puheenjohtaja: Carlos Simón, MD PhD, Igenomix
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- IGX1-MIC-CS-17-05
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .