HER2-kohdistetun mahasyövän hoidon arviointi ja seurantajärjestelmän perustaminen ja todentaminen

1. Tausta Kiinassa esiintyy runsaasti ruoansulatuskanavan syöpää. Ihmisen epidermaalinen kasvutekijäreseptori-2 (HER2) on transmembraanireseptorin kaltainen proteiini, joka sitoutuu solukalvoon. Sillä on tyrosiinikinaasiaktiivisuutta ja se osallistuu solujen kasvuun, aktivaatioon ja lisääntymiseen aktivoimalla alavirran signalointireittejä. HER2:n positiivinen ilmentyminen mahasyövässä määriteltiin patologiseksi immunohistokemiaksi HER2 (3+) tai HER2 (2+), jossa kala havaitsi geenin monistumista. HER2-positiivinen määrä kiinalaisilla mahasyöpäpotilailla on noin 12-13 %. Tehokas kemoterapia yhdistettynä anti-HER2-kohdennettuun terapiaan HER2-positiivisen edenneen mahasyövän hoidossa oli 47 %, ja keskimääräinen eloonjäämisaika pidennettiin 13,8 kuukauteen. HER2:n heterogeenisyys vaikuttaa kuitenkin suoraan anti-HER2-hoidon lopputulokseen. Siksi biopsiapatologiaan verrattuna on kiireellistä tutkia ei-invasiivisia, systeemisiä ja toistettavia menetelmiä systeemisten leesioiden HER2-tilan arvioimiseksi. PET on lyhenne sanoista positroniemissiotomografia. 18F-FDG:n käytöllä kasvaimessa on kuitenkin joitain rajoituksia, kuten vääriä positiivisia tai vääriä negatiivisia, jotka eivät pysty tehokkaasti erottamaan kasvainta ja tulehdusta. Patologiset tai fysiologiset tekijät, kuten paikallinen verenkierto, happipitoisuus ja nekroosi, vaikuttavat helposti kasvaimen 18F-FDG:n ottoon. Viime vuosina tutkijat ovat omistautuneet uusien spesifisten kasvainkuvausaineiden kehittämiseen, joista ihmisen epidermaalisen kasvutekijän reseptorin 2 (HER2) kuvantamisaine on tutkimuksen hotspot.

Affibody, joka tunnetaan myös nimellä "keinotekoinen vasta-aine", on eräänlainen muokattu tukirakenneproteiini, joka perustuu ei-immuuniproteiiniaffiniteettiligandeihin. Verrattuna vasta-aineeseen pienikokoisella affibodylla on joitain ainutlaatuisia etuja: 1) Sillä on pieni molekyylipaino ja yksinkertainen rakenne, joka voidaan syntetisoida ja modifioida peptidisyntetisaattorilla. 2) Sillä on korkea selektiivisyys ja affiniteetti, mutta alhainen epäspesifinen sitoutumisnopeus. 3) Sillä on vahva kudosten läpäisevyys. Affibody kerääntyy nopeasti kasvaimiin ja erittyy nopeasti normaaleista elimistä (verestä, lihasta jne.). Ja korkeakontrastisia kuvia voitiin saada vasta muutaman tunnin kuluttua annosta. Viime vuosina HER2-kohdistetun affibodyn (ZHER2:342) ja sen analogien (ZHER2:2891 ja ZHER2:2395) käyttö kasvainmolekyylikuvauksessa on alkanut kiinnittää ihmisten huomion. Gabriela Kramer-Marek vertasi 18F-FBEM-cys-ZHER2:342:n ja 18F-FDG:n kuvantamiskykyä nude-hiirillä, joilla oli MDA-MB-231-kasvain ja keuhkojen etäpesäke. 18F-FBEM-cys-ZHER2:342 kohdisti onnistuneesti HER2-positiivisiin keuhkoetäpesäkkeisiin, kun taas 18F-FDG ei havainnut etäpesäkkeitä perifeerisen tulehduksen ja normaaleiden kudosten häiritsemille.

68Ga on uudenlainen positroninuklidi, jota tuottaa 68Ge-68Ga-generaattori. Emänuklidi 68Ge on pitkäikäinen radioisotooppi, jonka puoliintumisaika on 271 päivää ja jota voidaan säilyttää generaattorissa noin vuoden ajan.

68Ga on helppo saada, ja erittäin puhdas 68Ga voidaan päivittää 4 tunnin kuluttua, mikä mahdollistaa usean kuvantamisen samana päivänä. 68Ga:n fyysinen puoliintumisaika on 68 minuuttia, ja 89 % hajoamisprosessista on positronihajoamista, Emax on 1,92 MeV ja loput 11 % on elektronien sieppausta. Syklotroniin verrattuna 68Ge-68Ga-generaattori on pienikokoinen, ei vaadi erityistä säteilysuojarakennetta ja sillä on alhaisemmat vaatimukset laitteiden käyttö- ja huoltohenkilöstölle. 18F:ään verrattuna 68Ga:n etuna on alhainen hinta, yksinkertainen valmistus ja nopea etiketöinti. Siksi 68Ga:lla leimatulla HER2-affiniteettikoettimella on suuri merkitys HER2-statuksen in vivo -seurannassa. 68Ga-leimatun affiniteettikoettimen 68Ga-ABY-002 (68Ga-DOTA-ZHER2:342-pep) valmisti Uppsalan yliopisto Ruotsissa. Tulos osoitti, että 68Ga-ABY-002 havaitsi onnistuneesti rintasyövän keuhkometastaaseja. Maksametastaasien havaitsemisvaikutus ei kuitenkaan ollut hyvä normaalin vatsakudoksen, etenkään maksan taustan, suurelle sisäänotolle.

2. Keskustemme työ ja olosuhteet 68Ga-HER2-affibody-BCH valmisteli Pekingin yliopistollisen syöpäsairaalan isotooppilääketieteen osasto. Aika on vain 30 minuuttia ja saanto on 80 % ± 5 %. Radiokemiallinen puhtaus oli yli 95 %. Mikro-PET-kuvaus osoitti suurta imeytymistä kasvaimiin, joissa oli munasarjasyöpä ja rintasyöpä. Kätevän synteesin ja hyvän kuvantamissuorituskyvyn vuoksi 68Ga-HER2-affibody-BCH:ta odotetaan olevan laajalti käytetty HER2-positiivisten kasvainten kliinisen diagnoosin, erilaistumisen ja tehokkuuden havaitsemisessa.

3. 68Ga-HER2-affibody-BCH:n biojakauma ja kuvantaminen malleissa

1. 68Ga-HER2-affibody-BCH:n biojakauma normaaleissa hiirissä Normaalit ICR-hiiret (20-25 g) jaettiin satunnaisesti 7 ryhmään, joissa kussakin ryhmässä oli 6 hiirtä, puoliksi uros ja puoliksi naaras. Hiiret nukutettiin isofluraanilla (2-3 %). Injektoitu 1,66 MBq 68Ga-HER2-affibody-BCH:ta (0,2 ml) häntälaskimon kautta. Sitten hiiret tapettiin eri ajankohtina (5, 10, 30, 60, 90, 120, 240 minuuttia) injektion jälkeen. Kiinnostavat elimet leikattiin ja poistettiin. Kunkin elimen radioaktiivisuus ja paino mitattiin gammalaskimella ja laskettiin radioaktiivisuusprosentti elimen massayksikköä kohti.

   68Ga-HER2-affibody-BCH:n biojakaumatutkimus normaaleissa hiirissä osoitti: 68Ga-HER2-affibody-BCH poistui nopeasti ja radioaktiivisuus veressä oli vain 0,27 % ID/g 120 minuutin injektion jälkeen. 68Ga-HER2-affibody-BCH:n otto munuaisissa oli korkea, mikä viittaa siihen, että koetin erittyi pääasiassa virtsateiden kautta; Koettimella oli alhainen imeytyminen maksaan, ja aineenvaihduntanopeus oli nopea; Alkuperäinen aivojen otto oli vain 0,87 % ID/g. Radioaktiivisuuden alkuperäinen sisäänotto luuhun oli alhainen ja väheni injektioajan myötä, mikä osoitti, että 68Ga-HER2-affibody-BCH oli stabiili in vivo. Eläinten biojakaumatutkimuksen aikana kaikkien hiirten elintoiminnot ja käyttäytyminen eivät muuttuneet merkittävästi.

2. 68Ga-HER2-affibody-BCH:n mikro-PET-kuvaus mahasyövän PDX-malleissa PDX-malli tunnetaan "potilaiden uusiutuvien näytteiden elävänä näytepankina". Professori Shen ja hänen tiiminsä perustivat ensimmäistä kertaa parhaan laajamittaisen kehittyneen mahasyövän PDX-mallikirjaston prekliiniseen tutkimukseen. Alustavat tulokset osoittavat, että PDX-mallilla on ainutlaatuisia etuja mikro-PET-kuvauksessa 68Ga-HER2-affibody-BCH:lla.

4. 68Ga-HER2-affibody-BCH:n alustava tutkimus mahasyöpäpotilailla Prekliinisen tutkimuksen tulosten mukaan 68Ga-HER2-affibody on eettisen komitean hyväksymä (hyväksyntänumero 2018kt61) ja sitä on alun perin sovellettu HER2:ssa edenneen mahasyöpää sairastavien potilaiden kuvantaminen. Aiemmat tulokset osoittivat, että HER2-positiivisilla potilailla, joilla oli edennyt mahasyöpä, 68Ga-HER2-affibody oli tehokas 2 tuntia suonensisäisen injektion jälkeen.Tulos oli paras, eikä haittavaikutuksia esiintynyt. 68Ga-HER2-affibody PET/CT-kuvaus voi heijastaa suoraan HER2:n heterogeenisyyttä samassa leesiossa sekä primaaristen ja metastaattisten leesioiden välillä. 13 HER2-negatiivisesta potilaasta kahdella potilaalla oli positiivinen 68Ga-HER2-affibody PET/CT-kuvaus, ja 2 potilaalla oli tiettyjä etuja anti-HER2-hoidon jälkeen. Niistä 68Ga-HER2-affibody on herkempi kuin 18F-FDG, joka ei ole herkkä sinettirengassolukarsinooman / Lauren-tyyppisen diffuusin mahasyövän kuvantamiseen. Lisäksi neljälle HER2-positiiviselle potilaalle tehtiin dynaaminen seuranta hoidon aikana. Tulokset osoittivat, että 68Ga-HER2-affibody PET / CT saattoi selvästi osoittaa peritoneaalisia kyhmyjä potilailla, joilla oli vatsakalvon etäpesäke ilman RECIST-standardin mukaisia ​​kohdeleesioita. Samaan aikaan havaittiin, että dynaamiset muutokset 68Ga-HER2-affibody SUVmax:ssa ennen hoitoa ja sen jälkeen liittyivät vasteeseen anti-HER2-hoitoon.

5.

1. Tavoite: Vertaa 68Ga-HER2-affibodyn ja 18F-FDG:n diagnostista tehokkuutta HER2-positiivisten kasvainpotilaiden pahanlaatuisen erilaistumisen ja vaiheen määrittämisessä sekä tutkia tarkemmin 68Ga-HER2-affinomaisen PET/CT:n kuvantamista potilailla, joilla on edennyt mahasyöpä ja HER2:n monistuminen tämän populaation perifeerisessä veressä HER2:n heterogeenisyyden voittamiseksi ja anti-HER2-hoidon mahdollisten edunsaajien tutkimiseksi. Samalla se tarjoaa perustan anti-HER2-hoidon arvioinnille.
2. Merkitys: Lemmikkieläinten yleisimmin käytetty kasvainkuvausaine on 18F-deoksiglukoosi (18F-FDG), joka heijastaa kasvainsolujen glukoosiaineenvaihduntaa. Sen sovelluksessa kasvaimessa on kuitenkin joitain puutteita. Patologiset tai fysiologiset tekijät, kuten paikallinen verenvirtaus, happipitoisuus ja nekroosi, vaikuttavat helposti kasvaimen 18F-FDG:n ottoon. Viime vuosina tutkijat ovat sitoutuneet kehittämään uusia spesifisiä kasvainkuvausaineita kasvaimen diagnostisen nopeuden parantamiseksi. Ihmisen epidermaalisen kasvutekijäreseptorin 2 (HER2) kuvantamisaine on tutkimuksen hotspot. Ihmisen epidermaalinen kasvutekijäreseptori-2 (HER2) on transmembraanireseptorin kaltainen proteiini, joka sitoutuu solukalvoon. Sillä on tyrosiinikinaasiaktiivisuutta ja se osallistuu solujen kasvuun, aktivaatioon ja lisääntymiseen aktivoimalla alavirran signalointireittejä. Tutkimukset ovat osoittaneet, että HER2 ei ilmenty normaaleissa kudoksissa, mutta se ilmentyy voimakkaasti rintasyövissä, mahasyövissä, kohdunkaulan syövissä ja muissa pahanlaatuisissa kasvaimissa. Se on yksi tuumoridiagnoosin ja -hoidon erityiskohteista. Tämä projekti tarjoaa kliinisesti saatavilla olevan PET-molekyylikoettimen 68Ga-HER2-affibody BCH, joka kohdistuu HER2:een kasvaindiagnoosin ja yksilöllisen hoidon tarkkuuden parantamiseksi. 6. Toteutussuunnitelma 6.1 Kokeilusuunnittelu: yksi keskus, satunnaistettu, avoin, itsekontrollitutkimus. 6.2 Tapauksen valintakriteerit: 1) gastroesofageaalisen liitoskohdan adenokarsinooma, jota ei voida leikata tai metastaattinen patologialla ja kuvantamisella vahvistettu; 2) Koehenkilöillä oli mitattavissa olevia vaurioita recist1.1:n mukaisesti tai ei-mitattavissa olevia, mutta arvioitavissa olevia vaurioita; 3) HER2 (1 +) tai HER2 (2 +) tai HER2 (3 +) löydettiin primaarisista tai metastaattisista leesioista; 4) Ikä: yli 18 vuotta vanha; 5) ECOG oli 0-2; 6) Vapaaehtoinen osallistuminen ja kirjallinen tietoinen suostumus; poissulkemiskriteerit: 1) sisällyttämiskriteerit eivät täyttyneet; 2) Maksan ja munuaisten toiminta oli epänormaalia; 3) sydämen vajaatoiminta; 4) raskaana olevien, raskaana olevien ja imettävien naisten valmistaminen; 5) Et pysty makaamaan selällään 30 minuuttiin; 6) Ne, jotka kieltäytyivät osallistumasta kliiniseen tutkimukseen; 7) oikeustoimikelpoiset tai joiden lääketieteelliset tai eettiset syyt vaikuttavat tutkimuksen jatkamiseen; 8) Kieltäytyä toimittamasta kudos- tai hematologisia näytteitä.

6.3 Näytteen koko ja annostus: maaliskuusta 2021 maaliskuuhun 2023 otetaan mukaan 30 koehenkilöä. Kaikkien koehenkilöiden piti saada 18F-FDG ja 68ga-her2affibody BCH suonensisäinen injektio ja PET/CT-kuvaus määritetyn ajan kuluessa.

6.4 Testausprosessi:

1. Potilaat seulottiin, 68Ga-HER2-affibody PET/CT suoritettiin, 18F-FDG PET/CT-kuvaus suoritettiin eri päivinä viikon sisällä ja otettiin 8 ml verta HER2:n kopioluvun havaitsemiseksi ääreisverestä;
2. Mukaan otettiin potilaat, joilla oli 68Ga-HER2-affibody PET/CT-positiivisia vaurioita tai perifeerisen veren HER2-kopiolukupositiivisia leesioita;
3. Hoidon jälkeen teho arvioitiin 6 syklin välein;
4. 68Ga-HER2-affibody PET/CT ja HER2:n kopioluku ääreisveressä tutkittiin uudelleen 6 viikkoa hoidon jälkeen;
5. Hoidon edistymisen vahvistamisen jälkeen 68Ga-HER2-affibody PET/CT ja HER2:n kopiomäärä perifeerisestä verestä tarkistettiin uudelleen;
6. Potilaista kerättiin radionuklidikuvia ennustemallin luomiseksi. HER2:n ilmentymisen johdonmukaisuus ja ero 68Ga-HER2-affibodyn PET/CT:n ja HER2-kopioluvun ilmentymisen kanssa perifeerisessä veressä arvioitiin. Arvioitiin myös korrelaatio anti-HER2-hoidon tehokkuuden ja 68Ga-HER2-affibodyn PET/CT-ekspression dynaamisten muutosten välillä.