Ihmisillä oksalaatti ja sitraatti - vaste sitraatille

Oraalisen sitraatin antaminen ilman oksalaattia on seuraava vaihe potentiaalisen kuljettajan sidoksen määrittämiseksi ihmisillä mekanismina, joka johtaa oksalaattia ja sitraattiyhdistystä. Mittaamme oksalaatin ja sitraatin murto -osan erittymisen. Glomerulus suodattaa molemmat vapaasti ja joko erittyy tai imeytyä (oksalaatti) tai vain imeytyneitä (sitraatti). Pystymme arvioimaan virtsan erittymisiä, jotka on jaettu suodatetun kuorman ja sitä seuraavan tubulan käsittelyn vaikutuksesta käyttämällä fraktiota erittymistä.

Kokeellinen suunnittelu: Tutkimukset tehdään Chicagon yliopiston lääketieteen (UCM) kliinisessä tutkimuskeskuksessa (CRC).

Tietoinen suostumusprosessi: Itse tai tutkimusapulaisten tietoisen suostumusprosessin kautta otetaan tietoisen suostumusprosessin kautta. Koehenkilöille annetaan runsaasti aikaa keskustella ja kysyä kysymyksiä. Mitään tutkimustoimintaa ei tapahdu vasta, kun kohde on allekirjoittanut suostumuslomakkeen.

NSF: ssä (n = 12) ja Caox SF (n = 12) anna kaliumsitraattikuormitus ja mittaa sekä virtsan että seerumin oksalaatin ja sitraatin kuuden tunnin aikana. Ensisijainen päätetapahtuma (hypoteesi 1A) on muutos lähtötasosta oksalaatin fraktiossa erittymisessä, joka on säädetty murto -erittymisen sitraatin muutokseen oksalaattikuormituksen jälkeen. Toissijainen päätepiste (hypoteesi 1B) on verrata oksalaatin fraktiota erittymisen muutoksia, jotka on säädetty fraktionaaliseen erittymiseen oksalaattiin kalsium SF: ssä verrattuna NSF: ään.

Perusteet: Virtsan oksalaatin ja sitraatin erittymisen välillä on yhteys. Olemme suorittaneet tutkimuksen oksalaattikuormituksen antamisesta kalsium SF: lle ja NSF: lle ja havainneet, että sitraatti nousee oksalaattikuormituksen jälkeen ja oksalaatin ja sitraatin muutos korreloi. Jos tämä johtuu oksalaatin ja sitraatin kuljetuksen spesifisestä vaikutuksesta proksimaalisessa tubuluksessa, oraalisen sitraattikuorman antamisen pitäisi johtaa virtsan oksalaatin erittymiseen lisääntyneeseen, ja tämä lisääntyminen voi vaihdella NSF: n ja SF: n välillä. Siksi 1a: oraalinen sitraattikuorma lisää oksalaatin fraktiota; ja 1b: oksalaatin fraktionaalista erittymistä enemmän NSF: ssä kuin ei-yleisessä SF: ssä. Jos totta, tämä ehdottaa linkkiä proksimaalisen tubuluksen kuljettajan (SLC26A6/NADC1) funktion tasolla. Jos vääriä, muiden mekanismien, kuten ruokavalion variaatio, on oltava vastuussa

Tutkimuspopulaatio ja rekrytointi: Ilmoittaudu yhteensä 24 henkilöä (12 NSF, 12 SF) yhtä suuria lukuja sukupuolen mukaan kahden ensimmäisen vuoden aikana tai palkinnolla. NSF: n valvonta rekrytoidaan nykyiseltä aiempien tutkimuksen osallistujien ryhmiltämme ja Research -ottelusta ja UCM: n translaatiolääketieteen instituutin uusista normaaleista tutkimuksen osallistujaresursseista. Tutkimusottelu ja uudet normaalit ovat resursseja löytää henkilöitä, jotka ovat kiinnostuneita osallistumisesta tutkimuksiin. Kyselyjä voidaan käyttää tukikelpoisten ohjausten tunnistamiseen. Tukikelpoiset NSF-kontrollit suorittavat yhden kodin 24 tunnin lähtötason virtsankeräyksen kotonaan kaikille vakaville happo-emäs- tai oksalaattien poikkeavuuksille. SF: n osallistujat (joilla kaikilla on 24 tunnin tiedot saatavilla) rekrytoidaan UCM-munuaiskiviklinikasta (sekä aiempien potilaiden virran että arkisto). UCM -munuaiskiviklinikka on suuri klinikka, jolla on yli 50 vuotta potilaita. Ryhmämme on pitkä historia tutkiessaan tutkimuksen osallistujia tästä lähteestä.

Sisällyttämiskriteerit:

SF: Ikä 18-70, vähintään yhden kalsiumpohjaisen munuaiskiven NSF: n historia: ikä 18–70, ei ollut munuaiskiven historiaa, 24 tunnin virtsan oksalaattia laboratoriossa Normaali (<50 mg/päivä) poissulkemiskriteerit: pääasiassa urakahapon, kysteiinin tai struvite-kivien historia. Vakavan happo-emästen poikkeavuuden historia, erittäin matala (alle 100 mg/päivä) tai erittäin korkea (yli 1500 mg/päivä) virtsasitraatti. Kaikki kontrollit tai SF -osallistujat, jotka eivät pysty lopettamaan diureettisia lääkkeitä tai alkalilisäainetta tutkimusjakson aikana. Krooninen munuaissairaus (glomerulaarinen suodatusaste <75 ml/min/1,73 m2.

NSF ja SF, jolla on äärimmäiset virtsasitraatin tasot, jätetään tämän pienen alkuperäisen tutkimuksen ulkopuolelle heterogeenisyyden vähentämiseksi ja keskittymisen poistamiseksi sitraattitasojen äärimmäisyyksistä.

Protokolla: Tämä protokolla kehitettiin ja mukautettiin aikaisemmin julkaistujen menetelmien perusteella 40-42 sekä täytetyn IRB: n (21-1349) hyväksytty tutkimus oksalaattikuormituksesta samanlaisissa osallistujissa. Valitsemme SF -potilaat sekä alkali -lisäravinteena. Alkalilisäaineiden edustajia pyydetään lopettamaan kaksi viikkoa ennen opiskelupäivää. Kaikille potilaille viikkoa ennen opiskelupäivää pidetään kaikki C -vitamiini-, multivitamiinit, kalsiumlisät ja diureettit. Diureettien ja alkalilisäaineiden pitäminen käydään keskustelussa potilaan ensisijaisen nefrologin tai perusterveydenhuollon lääkärin kanssa keskustelemaan turvallisuudesta näiden lääkkeiden lopettamisessa tutkimusjaksoon. Yhtenä päivänä ennen opiskelupäivää osallistujat täyttävät 24 tunnin virtsan keräämisen ja ruokataajuuskyselyn kotona. Opintopäivänä osallistujat otetaan CRC: hen paastotilassa. Kolme lähtötason virtsan ja verinäytteen kerätään ja korkeus ja paino mitataan. Osallistuja kuluttaa suun kautta otettavan kaliumsitraatin (40 meq). Toista ajoitettua virtsaa (45 minuutin välein) ja verinäytteet (45 minuutin välein) saadaan 6 tunniksi suun oksalaatin kuormituksen jälkeen. Verikokoelmat ovat noin 8 ml: n verta arvonnasta kohti (yhteensä 9 verenvetoa). Kaikki osallistujat pysyvät paastoamisessa tutkimuksen valmistumiseen saakka. Potilaalle annetaan 500 cm3 vettä tutkimuksen alussa ja veden saannissa koko tutkimuksen koko ajan sallitaan. Tutkimuksen päätyttyä kaikille osallistujille tarjotaan laatikko lounas.

Virtsan ja seerumin mittaukset: 24 tunnin ja ajoitetut virtsan kokoelmat saadaan päätökseen. Ohjeet kodin 24 tunnin virtsakokoelmiin annetaan. Virtsa määritetään oksalaatin ja sitraatin sekä muiden munuaisten kiviriskitekijöiden kemiat, mukaan lukien virtsan tilavuus, kalsium, pH, virtsahappo, natrium, kalium, kloridi, magnesium, fosfori, urea, sulfaatti, ammonium ja kreatiniini. Kalsiumoksalaatin, kalsiumfosfaatin ja virtsahappojen ylikyllästys lasketaan EquIL2.43,44: n avulla Nämä ylimääräiset määritykset tarjoavat tietoja tulevaa tutkimusta varten. Seerumin natrium, kalium, kloridi, bikarbonaatti, kalsium, fosfori, magnesium, kreatiniini ja kalsium, sitraatti ja oksalaatti mitataan. Kaikki virtsan ja seerumin mittaukset suoritetaan UCM-munuaiskivilaboratoriossa paitsi plasman oksalaattia, joka mitataan Alabama-Birminghamin yliopistossa (UAB). Seerumi ja virtsa jäädytetään -80 ° C: ssa ja säilytetään potentiaalisia myöhempiä määrityksiä varten.

Kliinisen muuttujan keräys: Kliiniset muuttujat sisältävät iän, sukupuolen, korkeuden, painon, kehon massaindeksin, krooniset sairaudet ja lääkkeet. Kliiniset muuttujat kerätään elektronisesta terveyskertomuksesta ja todennetaan minä tai tutkimusassistentin haastattelussa.

Tilastollinen analyysi: Virtsan oksalaatin, virtsan sitraatin ja sitraatin ja oksalaatin fraktiofraktioiden erittymisten muutos lähtötasosta (aika 1) jokaiselle aikapisteelle lasketaan jokaiselle osallistujalle. Kuvailevia tilastoja ja t-testejä käytetään osoittamaan virtsasitraatin muutos ja sitraatin fraktiota erittyminen oksalaatin muutoksella jokaisella ajanjaksolla kaikille osallistujille sekä SF: n ja NSF: n välillä. Virtsan oksalaatin ja sitraatin tasot sekä sitraatin ja oksalaatin fraktiotavat erittymiset kuvaavat ajan myötä. Pitkittäismenetelmiä käytetään virtsan sitraatin virtsan oksalaatin assosiaation regressiomallinnuksen suorittamiseen kaikille potilaille ja stratifioitu SF -tilalla. Monimuuttuja -analyysiin otettavat muuttujat sisältävät kliiniset (sukupuoli, kehon massaindeksi) ja virtsa (GI -anion) muuttujat.

Näytteen koko ja tilastollinen teho: Näytteen koko perustuu alustaviin tietoihin ja voimaan havaita SF- ja NSF -osallistujien välinen ero sitraatin (MMOL)/kreatiniinin keskimääräisen muutoksen suhteen oksalaattia kohti (MMOL)/kreatiniini (MMOL). Alustavat tiedot osoittavat, että sitraatin (MMOL)/kreatiniinin muutos oksalaattia kohti (MMOL)/kreatiniini (MMOL) oli 3,0 (SD 1,5) NSF: lle ja 0,3 (SD 0,1) SF -osallistujille monimuuttuja -malleissa. ALPHA = 0,05 ja 80%: n tehon asettaminen, katso taulukko 2 keskiarvosta, joka voidaan havaita sitraatissa (mmol)/kreatiniinissa (mmol)/1 mmol oksalaattia/luomista (mmol) SF: n ja NSF: n välillä. Ilmoittaamme 12 SF -potilasta ja 12 NSF -kontrollia (yhteensä = 24).