Oxalato e citrato em humanos - resposta ao citrato

A administração de citrato oral sem oxalato é o próximo passo para determinar uma ligação potencial de transportador em humanos como o mecanismo que impulsiona a associação de oxalato e citrato. Mediremos a excreção fracionária de oxalato e citrato. Ambos são filtrados livremente pelo glomérulo e secretados ou reabsorvidos (oxalato) ou apenas reabsorvidos (citrato). Seremos capazes de avaliar excreções de urina particionadas da contribuição da carga filtrada e do manuseio subsequente dos túbulos usando excreção fracionária.

Projeto experimental: Estudos serão realizados no Centro de Pesquisa Clínica da Universidade de Chicago (UCM) (CRC).

Processo de consentimento informado: Os sujeitos serão levados através do processo de consentimento informado por mim ou pelo assistente de pesquisa do estudo. Os sujeitos terão tempo suficiente para discutir e fazer perguntas. Nenhuma atividade de estudo ocorrerá até que o sujeito assine o formulário de consentimento.

Em NSF (n = 12) e Caox SF (n = 12), dê uma carga de citrato de potássio e meça o oxalato de urina e sérico e citrato ao longo de seis horas. O endpoint primário (Hipótese 1a) é a mudança da linha de base na excreção fracionária de oxalato ajustado para alteração no citrato de excreção fracionária após a carga de oxalato. O endpoint secundário (Hipótese 1B) deve comparar a mudança na excreção fracionária de oxalato ajustado ao oxalato de excreção fracionária no cálcio SF versus NSF.

Justificativa: Existe uma associação entre oxalato de urina e excreção de citrato. Concluímos um estudo de dar uma carga de oxalato a SF e NSF de cálcio e descobrimos que o citrato aumenta após a carga de oxalato e a mudança de oxalato e citrato foi correlacionada. Se isso ocorrer devido a um efeito específico do transporte de oxalato e citrato no túbulo proximal, a administração de uma carga de citrato oral deve levar ao aumento da excreção de oxalato de urina, e esse aumento pode diferir entre NSF e SF. Portanto, 1a: uma carga de citrato oral aumentará a excreção fracionária de oxalato; e 1b: aumentará a excreção fracionária de oxalato mais na NSF do que em SF não obesas. Se verdadeiro, isso sugere um link no nível do transportador de túbulos proximal (SLC26A6/NADC1). Se falso, outros mecanismos como a variação alimentar, devem ser responsáveis

População e recrutamento do estudo: Inscreva -se um total de 24 indivíduos (12 NSF, 12 sf) com números iguais por sexo nos dois primeiros anos ou pelo prêmio. Os controles da NSF serão recrutados em nosso grupo existente de participantes anteriores de pesquisas e da partida de pesquisa e dos novos recursos normais dos participantes da pesquisa do Instituto UCM de Medicina Translacional. A partida de pesquisa e os novos normais são recursos para encontrar indivíduos interessados ​​em participar de estudos de pesquisa. As consultas podem ser usadas para identificar controles elegíveis. Os controles elegíveis da NSF completarão uma coleta de urina basal de 24 horas em casa em casa para rastrear qualquer anormalidade ácida ou oxalato grave. Os participantes do SF (todos os quais têm dados de 24 horas disponíveis) serão recrutados na Clínica de Pedra Rim do UCM (atual e repositório de pacientes anteriores). A clínica de pedra renal UCM é uma grande clínica com mais de 50 anos de pacientes. Nosso grupo tem uma longa história de recrutar com sucesso os participantes da pesquisa dessa fonte.

Critérios de inclusão:

SF: Idade 18-70, História de pelo menos uma pedra renal à base de cálcio NSF: 18-70 anos, sem histórico de pedra renal, oxalato de urina 24 horas no laboratório normal (<50mg/dia) Critérios de exclusão: história de ácido úrico, cisteína ou estruvita. História de anormalidade ácida grave, muito baixa (menos de 100 mg/dia) ou muito alta (maior que 1500 mg/dia) citrato de urina. Quaisquer controles ou participantes de SF que não possam interromper a medicação diurética ou suplementação de álcalis durante o período do estudo. Doença renal crônica (taxa de filtração glomerular <75 ml/min/1,73m2.

NSF e SF com níveis extremos de citrato de urina serão excluídos deste pequeno estudo inicial para reduzir a heterogeneidade e remover o foco dos extremos dos níveis de citrato.

Protocolo: Este protocolo foi desenvolvido e adaptado com base em metodologias publicadas anteriormente, 40-42, bem como um IRB concluído (21-1349) aprovado pelo estudo de uma carga de oxalato em participantes semelhantes. Selecionaremos pacientes com SF e não na suplementação alcalina. Aqueles em suplementação alcalina serão solicitados a interromper duas semanas antes do dia do estudo. Para todos os pacientes, uma semana antes do dia do estudo, todas as vitamina C, multivitaminas, suplementos de cálcio e diuréticos serão realizadas. A realização de diuréticos e suplementação alcalina será feita em discussão com o nefrologista primário do paciente ou médico de atenção primária para discutir a segurança na interrupção desses medicamentos para o período do estudo. Um dia antes do dia do estudo, os participantes concluirão o questionário de coleta de urina e frequência de alimentos 24 horas em casa. No dia do estudo, os participantes serão admitidos na CRC em um estado de jejum. Três espécimes basais de urina e sangue serão coletados e a altura e o peso serão medidos. O participante consumirá uma carga oral de citrato de potássio (40 meq). Repita a urina cronometrada (a cada 45 minutos) e as amostras de sangue (a cada 45 minutos) serão obtidas por 6 horas após a carga de oxalato oral. As coleções de sangue serão de aproximadamente 8 ml de sangue por sorteio (total de 9 coleta de sangue). Todos os participantes permanecerão em jejum até a conclusão do estudo. O paciente receberá 500 cc de água no início do estudo e a ingestão de água durante o restante do estudo será permitido ad LIB. Na conclusão do estudo, todos os participantes receberão um almoço em caixa.

Medições de urina e soro: as coleções de urina 24 horas e cronometradas serão concluídas. As instruções para coleções de urina em casa 24 horas serão fornecidas. A urina será analisada quanto a oxalato e citrato, bem como outras químicas dos fatores de risco de pedra renal, incluindo volume de urina, cálcio, pH, ácido úrico, sódio, potássio, cloreto, magnésio, fósforo, uréia, sulfato, amônio e creatinina. A supersaturação do oxalato de cálcio, fosfato de cálcio e ácido úrico será calculado usando o Equil2.43,44 Esses ensaios adicionais fornecerão dados para estudos futuros. Serão medidos sódio sérico, potássio, cloreto, bicarbonato, cálcio, fósforo, magnésio, creatinina e cálcio, citrato e oxalato. Todas as medidas de urina e sérico serão realizadas no Laboratório de Pedra Rim de UCM, exceto o oxalato plasmático, que será medido na Universidade do Alabama-Birmingham (UAB). O soro e a urina serão congelados a -80 ° C e armazenados para testes posteriores em potencial.

Coleção de variáveis ​​clínicas: as variáveis ​​clínicas incluirão idade, sexo, altura, peso, índice de massa corporal, condições médicas crônicas e medicamentos. As variáveis ​​clínicas serão coletadas do registro eletrônico de saúde e verificadas na entrevista por mim ou pelo assistente de pesquisa.

Análise estatística: Mudança no oxalato de urina, citrato de urina e excreções fracionárias de citrato e oxalato da linha de base (tempo 1) para cada ponto no tempo será calculado para cada participante. Estatísticas descritivas e testes T serão usados ​​para demonstrar a mudança no citrato da urina e na excreção fracionária de citrato por alteração no oxalato em cada período para todos os participantes e entre SF e NSF. Os níveis de oxalato de urina e citrato e excreções fracionárias de citrato e oxalato serão representadas ao longo do tempo. Os métodos longitudinais serão usados ​​para realizar a modelagem de regressão da associação de oxalato de urina pelo citrato de urina para todos os pacientes e estratificado pelo status de SF. As variáveis ​​a serem consideradas para análise multivariada incluem variáveis ​​clínicas (sexo, índice de massa corporal) e urinário (ânion gi).

Tamanho da amostra e potência estatística: O tamanho da amostra é baseado em dados preliminares e potência para detectar uma diferença entre os participantes de SF e NSF para alteração média em citrato (MMOL)/creatinina por oxalato (mmol)/creatinina (MMOL). Dados preliminares mostram que a alteração no citrato (mmol)/creatinina por oxalato (mmol)/creatinina (mmol) foi de 3,0 (DP 1,5) para NSF e 0,3 (DP 0,1) para participantes de SF em modelos multivariados. Configurando alfa = 0,05 e potência 80%, consulte a Tabela 2 para a diferença média que pode ser detectada em citrato (mmol)/creatinina (mmol) por oxalato/criação/criação (mmol) entre SF e NSF. Inscreveremos 12 pacientes com SF e 12 controles NSF (total = 24).