Oxalaat en citraat bij mensen - reactie op citraat

Toediening van orale citraat zonder oxalaat is de volgende stap om een ​​potentiële transporterbinding bij mensen te bepalen als het mechanisme dat de oxalaat- en citraatvereniging stimuleert. We zullen fractionele uitscheiding van oxalaat en citraat meten. Beide worden vrijelijk gefilterd door de glomerulus en worden afgescheiden of opnieuw geabsorbeerd (oxalaat) of gewoon opnieuw geabsorbeerd (citraat). We zullen in staat zijn om urine -excreties te beoordelen die zijn verdeeld uit de bijdrage van de gefilterde belasting en de daaropvolgende tubuleafhandeling met behulp van fractionele excretie.

Experimenteel ontwerp: studies zullen worden uitgevoerd in het Clinical Research Center (UCM) van de University of Chicago Medicine (CRC).

Geïnformeerd toestemmingsproces: onderwerpen worden door mijzelf of de onderzoeksassistent van de studie door het geïnformeerde toestemmingsproces genomen. Onderwerpen krijgen voldoende tijd om te bespreken en vragen te stellen. Er zullen geen studieactiviteiten plaatsvinden totdat nadat het onderwerp het toestemmingsformulier heeft ondertekend.

Geef in NSF (n = 12) en CAOX SF (n = 12) een kaliumcitraatbelasting en meet zowel urine- als serumoxalaat en citraat gedurende zes uur. Primair eindpunt (hypothese 1a) is verandering ten opzichte van de uitgangswaarde in fractionele excretie van oxalaat aangepast voor verandering in fractioneel excretie citraat na oxalaatbelasting. Secundair eindpunt (hypothese 1b) is om verandering in fractionele excretie van oxalaat te vergelijken, aangepast aan fractionele excretie -oxalaat in calcium SF versus NSF.

Rationale: er is een verband tussen urine -oxalaat en citraatuitscheiding. We hebben een onderzoek voltooid om een ​​oxalaatbelasting aan calcium SF en NSF te geven en hebben vastgesteld dat citraat omhoog gaat na een oxalaatbelasting en de verandering in oxalaat en citraat was gecorreleerd. Als dit te wijten is aan een specifiek effect van oxalaat- en citraattransport in de proximale buis, dan moet toediening van een orale citraatbelasting leiden tot verhoogde urine -oxalaatuitscheiding, en deze toename kan verschillen tussen NSF en SF. Daarom zal 1A: een orale citraatbelasting verhoogt de fractionele uitscheiding van oxalaat; en 1B: zal fractionele uitscheiding van oxalaat meer in NSF verhogen dan in niet-obese SF. Indien waar, suggereert dit een link op het niveau van proximale tubule transporter (SLC26A6/NADC1) functie. Als onwaar, moeten andere mechanismen zoals voedingsvariatie verantwoordelijk zijn

Studiepopulatie en werving: Schrijf in totaal 24 onderwerpen in (12 NSF, 12 SF) in met gelijke cijfers door seks gedurende de eerste twee jaar of de prijs. NSF -controles zullen worden aangeworven bij onze bestaande groep van eerdere onderzoeksdeelnemers en van onderzoekscontrole en de nieuwe Normal Research Deelnemersbronnen van het UCM Institute for Translational Medicine. Research Match en The New Normal zijn middelen voor het vinden van personen die geïnteresseerd zijn in deelname aan onderzoeksstudies. Er kunnen vragen worden gebruikt om in aanmerking komende controles te identificeren. In aanmerking komende NSF-bedieningselementen voltooien één thuis 24-uurs baseline urinecollectie thuis om te screenen op ernstige zuur-base of oxalaatafwijkingen. SF-deelnemers (die allemaal 24-uurs gegevens beschikbaar hebben) zullen worden aangeworven uit de UCM Nier Stone Clinic (zowel de huidige als de repository van eerdere patiënten). De UCM Nier Stone Clinic is een grote kliniek met meer dan 50 jaar patiënten. Onze groep heeft een lange geschiedenis van het succesvol werven van onderzoeksdeelnemers uit deze bron.

Inclusiecriteria:

SF: Leeftijd 18-70, Geschiedenis van ten minste één op calcium gebaseerde niersteen NSF: leeftijd 18-70, geen geschiedenis van niersteen, 24-uurs urine-oxalaat binnen laboratorium normale (<50 mg/dag) uitsluitingscriteria: geschiedenis van voornamelijk urinezuur, cysteïne of struvietstenen. Geschiedenis van ernstige zuur-base afwijking, zeer laag (minder dan 100 mg/dag) of zeer hoog (groter dan 1500 mg/dag) urinecitraat. Controles of SF -deelnemers die niet kunnen stoppen met diuretische medicatie of alkali -suppletie voor het verloop van de studieperiode. Chronische nierziekte (glomerulaire filtratiesnelheid <75 ml/min/1.73m2.

NSF en SF met extreme niveaus van urinecitraat zullen worden uitgesloten van deze kleine initiële studie om heterogeniteit te verminderen en de focus te verwijderen uit de uitersten van citraatspiegels.

Protocol: dit protocol is ontwikkeld en aangepast op basis van eerder gepubliceerde methoden, 40-42 en een voltooide IRB (21-1349) goedgekeurde studie van een oxalaatbelasting bij vergelijkbare deelnemers. We zullen SF -patiënten zowel aan en niet op alkali -suppletie selecteren. Degenen met alkali -suppletie zullen worden gevraagd om twee weken vóór de studiedag te stoppen. Voor alle patiënten, een week voorafgaand aan de studiedag, zullen alle vitamine C, multivitamines, calciumsupplementen en diuretica worden gehouden. Het vasthouden van diuretica en alkali -suppletie zal worden gedaan in discussie met de primaire nefroloog van de patiënt of arts voor eerstelijnszorg om de veiligheid te bespreken bij het stoppen van deze medicijnen voor de studieperiode. Eén dag voorafgaand aan de studiedag zullen deelnemers thuis 24-uurs urinecollectie en voedselfrequentievragenlijst invullen. Op de studiedag worden de deelnemers in een nuchtere toestand toegelaten tot de CRC. Drie baseline urine- en bloedmonsters worden verzameld en lengte en gewicht wordt gemeten. Deelnemer verbruikt een oraal kaliumcitraat (40 mEQ) belasting. Herhaal getimede urine (elke 45 minuten) en bloedspecimens (elke 45 minuten) worden 6 uur na de orale oxalaatbelasting verkregen. Bloedcollecties zullen ongeveer 8 ml bloed per trekking zijn (totaal van 9 bloedtekens). Alle deelnemers blijven vasten tot de voltooiing van de studie. Patiënt krijgt gedurende de rest van het onderzoek 500 cc water aan het begin van de studie en de waterinname, wordt toegestaan ​​AD LIB. Bij de voltooiing van de studie krijgen alle deelnemers een lunch met doos aangeboden.

Urine- en serummetingen: 24-uurs en getimede urinecollecties worden voltooid. Instructies voor thuis 24-uurs urinecollecties worden verstrekt. Urine zal worden getest op oxalaat en citraat en andere niersteenrisicofactor chemie, waaronder urinevolume, calcium, pH, urinezuur, natrium, kalium, chloride, magnesium, fosfor, ureum, sulfaat, ammonium en creatinine. Oververzadiging van calciumoxalaat, calciumfosfaat en urinezuur zal worden berekend met behulp van Equil2.43,44 Deze aanvullende testen zullen gegevens bieden voor toekomstig onderzoek. Serum natrium, kalium, chloride, bicarbonaat, calcium, fosfor, magnesium, creatinine en calcium, citraat en oxalaat worden gemeten. Alle urine- en serummetingen worden uitgevoerd in het UCM Nier Stone Laboratory behalve plasma-oxalaat dat zal worden gemeten aan de University of Alabama-Birmingham (UAB). Serum en urine worden bevroren bij -80 ° C en worden opgeslagen voor potentiële latere testen.

Klinische variabele verzameling: klinische variabelen omvatten leeftijd, geslacht, lengte, gewicht, body mass index, chronische medische aandoeningen en medicijnen. Klinische variabelen worden verzameld uit het elektronische gezondheidsdossier en geverifieerd in een interview door mij of de onderzoeksassistent.

Statistische analyse: verandering in urine -oxalaat, urinecitraat en fractionele uitscheiding van citraat en oxalaat uit basislijn (tijd 1) tot elk tijdstip wordt berekend voor elke deelnemer. Beschrijvende statistieken en t-tests zullen worden gebruikt om de verandering in urinecitraat en fractionele uitscheiding van citraat aan te tonen door verandering in oxalaat na elke periode voor alle deelnemers en tussen SF en NSF. De niveaus van urine -oxalaat en citraat en fractionele uitscheiding van citraat en oxalaat zullen in de loop van de tijd worden ingangigd. Longitudinale methoden zullen worden gebruikt om regressiemodellering van de associatie van urineoxalaat door urinecitraat uit te voeren voor alle patiënten en gestratificeerd door SF -status. Variabelen die in aanmerking moeten komen voor multivariate analyse omvatten klinische (geslacht, body mass index) en urine (GI anion) variabelen.

Steekproefgrootte en statistisch vermogen: de steekproefgrootte is gebaseerd op voorlopige gegevens en vermogen om een ​​verschil tussen SF- en NSF -deelnemers te detecteren voor gemiddelde verandering in citraat (mmol)/creatinine per oxalaat (mmol)/creatinine (mmol). Voorlopige gegevens laten zien dat de verandering in citraat (mmol)/creatinine per oxalaat (mmol)/creatinine (mmol) 3,0 (SD 1,5) was voor NSF en 0,3 (SD 0,1) voor SF -deelnemers in multivariate modellen. Alfa = 0,05 en vermogen 80%instellen, zie de tabel 2 voor het gemiddelde verschil dat kan worden gedetecteerd in citraat (mmol)/creatinine (mmol) per 1 mmol oxalaat/creatie (mmol) tussen SF en NSF. We zullen 12 SF -patiënten en 12 NSF -controles inschrijven (totaal = 24).