Oxalat og citrat hos mennesker - respons på citrat

Administration af oral citrat uden oxalat er det næste trin til at bestemme en potentiel transporterbinding hos mennesker som mekanismen, der driver oxalat- og citratforeningen. Vi måler fraktioneret udskillelse af oxalat og citrat. Begge filtreres frit af glomerulus og enten udskilles eller reabsorberes (oxalat) eller bare reabsorberes (citrat). Vi vil være i stand til at vurdere urinudskillelser, der er opdelt fra bidraget fra den filtrerede belastning og efterfølgende tubulushåndtering ved anvendelse af fraktioneret udskillelse.

Eksperimentelt design: Undersøgelser vil blive udført i University of Chicago Medicine (UCM) Clinical Research Center (CRC).

Informeret samtykkeproces: Emner vil blive taget gennem den informerede samtykkeproces af mig selv eller studieforskningsassistenten. Emner får rigelig tid til at diskutere og stille spørgsmål. Ingen undersøgelsesaktiviteter vil forekomme, efter at emnet har underskrevet samtykkeformularen.

I NSF (n = 12) og Caox SF (n = 12) skal du give en kaliumcitratbelastning og måle både urin og serumoxalat og citrat over seks timer. Primært slutpunkt (hypotese 1A) ændres fra baseline i fraktioneret udskillelse af oxalat justeret for ændring i fraktioneret udskillelsescitrat efter oxalatbelastning. Sekundært slutpunkt (hypotese 1B) skal sammenligne ændring i fraktioneret udskillelse af oxalat justeret til fraktioneret udskillelsesoxalat i calcium SF versus NSF.

Begrundelse: Der er en sammenhæng mellem urinoxalat og citratudskillelse. Vi har afsluttet en undersøgelse af at give en oxalatbelastning til calcium SF og NSF og fandt, at citrat går op efter en oxalatbelastning, og ændringen i oxalat og citrat var korreleret. Hvis dette skyldes en specifik virkning af oxalat- og citrattransport i den proksimale tubule, skal administration af en oral citratbelastning føre til øget urinoxalatudskillelse, og denne stigning kan variere mellem NSF og SF. Derfor vil 1A: en oral citratbelastning øge fraktioneret udskillelse af oxalat; og 1B: vil hæve fraktioneret udskillelse af oxalat mere i NSF end i ikke-overvægtig SF. Hvis det er sandt, antyder dette et link på niveauet for proksimal tubulustransportør (SLC26A6/NADC1) -funktion. Hvis falske, andre mekanismer såsom kostvariation, skal være ansvarlige

Undersøgelsespopulation og rekruttering: Tilmeld i alt 24 forsøgspersoner (12 NSF, 12 SF) med lige antal efter sex i de første to år eller tildelingen. NSF -kontroller rekrutteres fra vores eksisterende gruppe af tidligere forskningsdeltagere og fra forskningskamp og de nye normale forskningsdeltagerressourcer fra UCM Institute for Translational Medicine. Forskningskamp og den nye normale er ressourcer til at finde personer, der er interesseret i at deltage i forskningsundersøgelser. Forespørgsler kan bruges til at identificere støtteberettigede kontroller. Kvalificerede NSF-kontroller afslutter et hjem 24-timers baseline urinopsamling derhjemme for at screene for enhver alvorlig syre-base eller oxalat abnormaliteter. SF-deltagere (som alle har 24-timers data til rådighed) vil blive rekrutteret fra UCM Nyren Stone Clinic (både nuværende og depot for tidligere patienter). UCM -nyrestensklinikken er en stor klinik med over 50 års patienter. Vores gruppe har en lang historie med succesfuldt rekruttering af forskningsdeltagere fra denne kilde.

Inkluderingskriterier:

SF: Alder 18-70, Historie om mindst en calciumbaseret nyresten NSF: 18-70 år, ingen historie med nyresten, 24-timers urinoxalat inden for laboratorium normale (<50 mg/dag) ekskluderingskriterier: Historie om primært urinsyre, cystein eller struvitsten. Historie om svær syre-base abnormitet, meget lav (mindre end 100 mg/dag) eller meget høj (større end 1500 mg/dag) urincitrat. Eventuelle kontroller eller SF -deltagere, der ikke kan stoppe vanddrivende medicin eller alkalitilskud i løbet af undersøgelsesperioden. Kronisk nyresygdom (glomerulær filtreringshastighed <75 ml/min/1,73m2.

NSF og SF med ekstreme niveauer af urincitrat vil blive udelukket fra denne lille indledende undersøgelse for at reducere heterogenitet og fjerne fokus fra ekstreme citratniveauer.

Protokol: Denne protokol blev udviklet og tilpasset baseret på tidligere offentliggjorte metoder, 40-42 samt en afsluttet IRB (21-1349) godkendt undersøgelse af en oxalatbelastning hos lignende deltagere. Vi vælger SF -patienter både på og ikke på alkali -tilskud. De på alkali -tilskud bliver bedt om at afbryde i to uger før studiedagen. For alle patienter, en uge før studiedagen, afholdes alt C -vitamin, multivitaminer, calciumtilskud og diuretika. Holding af diuretika og alkali -tilskud vil blive udført i diskussion med patientens primære nefrolog eller primærplejelæge for at diskutere sikkerhed ved at stoppe disse medicin i undersøgelsesperioden. En dag før studiedagen udfylder deltagerne 24-timers urinopsamling og spørgeskema for madfrekvens derhjemme. På studiedagen bliver deltagerne optaget på CRC i en fastende tilstand. Tre baseline urin- og blodprøver opsamles, og højde og vægt måles. Deltager forbruger en oral kaliumcitrat (40 meq) belastning. Gentag tidsbestemt urin (hvert 45 minut) og blodprøver (hvert 45 minut) opnås i 6 timer efter oral oxalatbelastning. Blodsamlinger vil være ca. 8 ml blod pr. Tegning (i alt 9 blodtræk). Alle deltagere forbliver fastende indtil studiets afslutning. Patienten får 500 cc vand i starten af ​​studiet, og vandindtagelse i resten af ​​undersøgelsen vil være tilladt ad lib. Ved afslutningen af ​​undersøgelsen vil alle deltagere blive tilbudt en bokset frokost.

Urin- og serummålinger: 24-timers og tidsbestemte urinsamlinger afsluttes. Instruktioner til hjemmet 24-timers urinsamlinger vil blive leveret. Urin vil blive analyseret for oxalat og citrat såvel som andre nyrestone -risikofaktorkemier, herunder urinvolumen, calcium, pH, urinsyre, natrium, kalium, chlorid, magnesium, fosfor, urinstof, sulfat, ammonium og kreatinin. Overmætning af calciumoxalat, calciumphosphat og urinsyre beregnes ved hjælp af Equil2.43,44 Disse yderligere assays giver data til fremtidig undersøgelse. Serumnatrium, kalium, chlorid, bicarbonat, calcium, fosfor, magnesium, kreatinin og calcium, citrat og oxalat måles. Alle urin- og serummålinger udføres på UCM Nyren Stone Laboratory undtagen plasmaoxalat, som måles ved University of Alabama-Birmingham (UAB). Serum og urin fryses ved -80 ° C og opbevares til potentielle senere assays.

Klinisk variabel indsamling: Kliniske variabler vil omfatte alder, køn, højde, vægt, kropsmasseindeks, kroniske medicinske tilstande og medicin. Kliniske variabler indsamles fra den elektroniske sundhedsrekord og verificeres i interview af mig eller forskningsassistenten.

Statistisk analyse: Ændring i urinoxalat, urincitrat og fraktionerede udskillelser af citrat og oxalat fra baseline (tid 1) til hvert tidspunkt beregnes for hver deltager. Beskrivende statistikker og t-tests vil blive brugt til at demonstrere ændringen i urincitrat og fraktioneret udskillelse af citrat ved ændring i oxalat i hver periode for alle deltagere og mellem SF og NSF. Niveauerne af urinoxalat og citrat og fraktioneret udskillelse af citrat og oxalat vil blive tegnet over tid. Langsgående metoder vil blive anvendt til at udføre regressionsmodellering af forbindelsen af ​​urinoxalat med urincitrat for alle patienter og stratificeret af SF -status. Variabler, der skal overvejes til multivariat analyse, inkluderer kliniske (køn, kropsmasseindeks) og urin (GI anion) variabler.

Prøvestørrelse og statistisk effekt: Prøvestørrelse er baseret på foreløbige data og effekt til at detektere en forskel mellem SF- og NSF -deltagere for gennemsnitlig ændring i citrat (mmol)/kreatinin pr. Oxalat (mmol)/creatinin (mmol). Foreløbige data viser, at ændringen i citrat (mmol)/kreatinin pr. Oxalat (mmol)/kreatinin (mmol) var 3,0 (SD 1,5) for NSF og 0,3 (SD 0,1) for SF -deltagere i multivariate modeller. Indstilling af alfa = 0,05 og effekt 80%, se tabel 2 for den gennemsnitlige forskel, der kan detekteres i citrat (mmol)/kreatinin (mmol) pr. 1 mmol oxalat/skabelse (mmol) mellem SF og NSF. Vi tilmelder 12 SF -patienter og 12 NSF -kontroller (i alt = 24).