Berberiinin lisäravinteiden, sprinttiväliharjoittelun ja immuunitoiminnon tutkimus

Active Comparator: Pelkästään Berberiini Ryhmä (BO)

BO-tutkimuksen osallistujat nauttivat kaupallisesti saatavilla olevaa berberiinilisää (500 mg, 3 kertaa päivässä aterioiden yhteydessä) 2 viikon ajan, joka on säilytetty identtisissä vegaanikapseleissa, ja heitä ohjeistetaan ylläpitämään päivittäisiä toimintojaan ja ruokavaliotaan.

Ravintolisä: Berberiini

Käyttö kaupallisesti saatavaa Berberiini-valmista annoksella 500 mg, kolme kertaa päivässä aterioiden yhteydessä, yhteisannoksena 1500 mg/päivä.

Muut nimet:

• Berberiinihydrokloridi

Placebo Comparator: Pelkkä lumelääkeryhmä (PO)

Osallistujat PO:ssa kuluttavat placebokapseleita (riisijauho, 3 kertaa päivässä aterioiden kanssa), jotka säilytetään identtisissä vegaanikapseleissa 2 viikon ajan, ja heitä ohjeistetaan ylläpitämään päivittäisiä toimintojaan ja ruokavalioitaan.

Muut: Placebo

Placebokapseleiden, jotka koostuvat riisijauhosta, nauttiminen annostuksella 3 kapselia päivässä aterioiden yhteydessä.

Active Comparator: Sprint-intervalliharjoitus + Berberiini-ryhmä (SB)

Osallistujat SB:ssä nauttivat kaupallisesti saatavilla olevaa Berberiini-lisäravinnetta (500 mg, 3 kertaa päivässä aterioiden yhteydessä), joka on varastoitu identtisiin vegaanisiin kapseleihin, ja he suorittavat 6 sprinttiväliharjoitusistuntoa 2 viikon ajan.

Ravintolisä: Berberiini

Käyttö kaupallisesti saatavaa Berberiini-valmista annoksella 500 mg, kolme kertaa päivässä aterioiden yhteydessä, yhteisannoksena 1500 mg/päivä.

Muut nimet:

• Berberiinihydrokloridi

Muut: Sprinttivälitreeni

Useita sarjoja maksimaalisia 30 sekunnin sprinttejä, välissä 4 minuutin levon/aktiivista palautumista, pyöräergometrillä 6 sessioiden aikana 2-viikon interventiossa. Jokaisen sarjan vastus lasketaan 7,5 % osaksi osallistujan ruumiismassasta. Jokaisen sessio sarjat ovat seuraavat: (1) 4 sarjaa, (2) 5 sarjaa, (3) 6 sarjaa, (4) 6 sarjaa, (5) 7 sarjaa, (6) 4 sarjaa.

Muut nimet:

• ISTUA

Placebo Comparator: Sprint Interval Training + Placebo Group (SP)

SP-tutkimukseen osallistuvat kuluttavat placebokapseleita (riisijauhoa, 3 kertaa päivässä aterioiden yhteydessä), jotka on säilytetty identtisissä vegaanisissa kapseleissa, ja he suorittavat 6 sprinttiväliharjoitusistuntoa kahden viikon aikana.

Muut: Placebo

Placebokapseleiden, jotka koostuvat riisijauhosta, nauttiminen annostuksella 3 kapselia päivässä aterioiden yhteydessä.

Muut: Sprinttivälitreeni

Useita sarjoja maksimaalisia 30 sekunnin sprinttejä, välissä 4 minuutin levon/aktiivista palautumista, pyöräergometrillä 6 sessioiden aikana 2-viikon interventiossa. Jokaisen sarjan vastus lasketaan 7,5 % osaksi osallistujan ruumiismassasta. Jokaisen sessio sarjat ovat seuraavat: (1) 4 sarjaa, (2) 5 sarjaa, (3) 6 sarjaa, (4) 6 sarjaa, (5) 7 sarjaa, (6) 4 sarjaa.

Muut nimet:

• ISTUA

Monosyytit

Kokoveren yksittäissolujen suspensio, 200 µL, värjätään CD14:lle (anti-human CD14-FITC) ja CD16:lle (anti-human CD16-APC) (BioLegend, San Diego CA) punasolujen lysaamisen jälkeen 1X Red Blood Cell Lysis Buffer -liuoksella (BioLegend, San Diego CA) ja Fc-reseptorien estämisen jälkeen Fc-Blocker -liuoksella (BioLegend, San Diego CA). Valmistetut näytteet analysoidaan Attune NxT virtaussytometrillä (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) fiksauksen ja permeabilisaation jälkeen.

Monosyyttien tuottama solunsisäinen IL-6

100 µL soluja jaotellaan 12 x 75 mm putkiin yhdessä 150 µL Cyto-Fast™ Fix/Perm-liuoksen (BioLegend, San Diego CA) kanssa, minkä jälkeen seurotetaan 20 minuuttia huoneenlämmössä. Sitten lisätään 1 mL 1X Cyto-Fast™ Perm Wash -liuosta (BioLegend, San Diego CA), sentrifugoidaan 350xg 5 minuuttia ja poistetaan ylösnoste, toistetaan kahdesti. Solut värjätään sitten optimipitoisuuksilla PE anti-human IL-6 -vasta-ainetta (BioLegend, San Diego CA), joka valmistetaan 100 µL pääseoksena 1X Cyto-Fast™ Perm Wash -liuoksen kanssa, ja seurotetaan 20 minuuttia huoneenlämmössä pimeässä. Sitten solut pestään 1 mL 1X Cyto-Fast™ Perm Wash -liuoksella, sentrifugoidaan 350xg 5 minuuttia. Poista ylösnoste, lisää 1 mL Cell Staining Buffer -liuosta (BioLegend, San Diego CA), sentrifugoi 350xg 5 minuuttia. Poista ylösnoste, suspendoi solut uudelleen 600 µL Cell Staining Buffer -liuokseen (BioLegend, San Diego CA) ja analysoi Attune NxT -laitteella (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA).

C-reaktiivinen proteiini

Noin 60 ml kokoverttä kerätään seeruminerotinputkiin (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, USA), annetaan hyytyä 30 minuuttia huoneenlämmössä ja sen jälkeen sentrifugoidaan 2000 RPM:n nopeudella 15 minuuttia. Seerumi siirretään pipetillä 1,5 ml mikroputkiin (Eppendorf AG, Hamburg, Saksa) ja säilytetään välittömästi -80 °C pakastimessa. CRP:n seerumipitoisuus määritetään kaupallisesti saatavalla entsyymiliitännäisellä immunosorbenttitestillä (ALPCO Diagnostics, Salem, NH, USA). Mikrolevyt luetaan ELx800 BioTek mikrolevylukijalla (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA) suositellulla 450 nanometrin aallonpituudella.

Interleukiini-6 (IL-6)

Noin 60 ml kokoverta kerätään seeruminerotinputkiin (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, USA), annetaan hyytyä 30 minuuttia huoneenlämmössä ja sentrifugoidaan 2000 RPM:n nopeudella 15 minuutin ajan. Seerumi pipetoidaan 1,5 ml mikrokeskiputkiin (Eppendorf AG, Hamburg, Saksa) ja säilytetään välittömästi -80 °C pakastimessa. IL-6:n seerumpitoisuudet määritetään kaupallisesti saatavilla olevalla entsyymiliitotestillä (BioLegend, San Diego CA). Mikrolevyt luetaan ELx800 BioTek-mikrolevylukijalla (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA) suositellulla 450 nanometrin aallonpituudella.

Anaerobinen teho

Osallistujat suorittavat anaerobisen kunnon mittauksen Wingate-anaerobisen tehotestin avulla polkupyöräergometrillä (Monark Ergomedic 894E, Monark, Varberg, Ruotsi). Osallistujat lämmittävät 60–75 kierrosta minuutissa (RPM) omavalintaisella vastuksella 5 minuutin ajan. Lämmittelyn päätyttyä vastus lasketaan nollaan, ja osallistujaa ohjeistetaan aloittamaan polkeminen maksimaalisella polkemistiheydellä. Kun osallistujat saavuttavat maksimaalisen polkemistiheytensä, polkupyöräergometriin lisätään 7,5 % osallistujan kehon painosta, ja testi alkaa. Osallistujat polkevat yhteensä 30 sekuntia 7,5 % kehon painosta vastaavalla vastuksella. 30 sekunnin maksimitestin päättyessä osallistujat polkevat vielä 5 minuuttia omavalintaisella vastuksella jäähdytykseen. Mittaukset huippuanaerobisesta tehosta, keskimääräisestä anaerobisesta tehosta, suhteellisesta huippuanaerobisesta tehosta, kokonaistyöstä, väsymisindeksistä ja maksimisykkeestä tallennetaan.

Masennus-, ahdistus- ja stressiasteikot (DASS-21)

Osallistujia pyydetään täyttämään paperiversio 21-kysymyksisestä Depression Anxiety and Stress Scale (DASS-21) -mittarista. DASS-21 koostuu 21 kysymyksestä, jotka käyttävät 0-3 Likert-asteikkoa arvioidakseen osallistujan subjektiivista mielenterveyttä ja stressitilaa, jossa "0" tarkoittaa "Ei koskenut minua lainkaan" ja "3" tarkoittaa "Koski minua erittäin paljon tai suurimman osan ajasta." DASS-21 sisältää 3 alatestiä, jotka arvioivat masennusta, ahdistusta ja stressiä, joissa kussakin alatessissä on 7 kysymystä, jossa korkea pistemäärä 28+ osoittaa "Erittäin vakavia" masennustasoja, korkea pistemäärä 20+ osoittaa "Erittäin vakavia" ahdistustasoja ja korkea pistemäärä 34+ osoittaa "Erittäin vakavia" stressitasoja, kun taas matalat pistemäärät 0-9 osoittavat "Normaaleja" masennustasoja, pistemäärät 0-7 osoittavat "Normaaleja" ahdistustasoja ja pistemäärät 0-14 osoittavat "Normaaleja" stressitasoja.

Laiha kehon massa

Laiha kehonmassa (LBM) arvioidaan käyttämällä ilman siirtopletysmografiaa kalibroidulla BODPOD-laitteella (COSMED USA Inc., Concord, CA).
Osallistujia ohjeistetaan riisumaan kengät, sukat, korut ja kaikki ylimääräiset vaatteet peruskerroksen lisäksi.
Osallistujille annetaan sitten uimalakki ja kehonkoostumuksen analysointi suoritetaan valmistajan ohjeiden mukaisesti.

Rasvaprosentti

Rasvaprosentti (BF%) arvioidaan käyttämällä ilman siirtymäpletyzmografiaa kalibroidulla BODPOD-laitteella (COSMED USA Inc., Concord, CA). Osallistujia ohjeistetaan riisumaan kengät, sukat, korut ja kaikki muut vaatteet aluskerroksen lisäksi. Osallistujille annetaan sitten uimalakki ja kehon koostumuksen analysointi suoritetaan valmistajan ohjeiden mukaisesti.

Psykologisen hyvinvoinnin asteikko (PWB)

Osallistujia pyydetään täyttämään psykologisen hyvinvoinnin asteikon (PWB) verkkoversio. PWB on 18-kysymyksinen, 6-minuuttinen mitta, joka arvioi kuutta hyvinvoinnin ja onnellisuuden ala-asteikkoa: Autonomia, Ympäristön hallinta, Henkilökohtainen kasvu, Positiiviset suhteet muihin, Elämän tarkoitus ja Itsensä hyväksyminen. Heille annetaan ohjeet arvioida, kuinka vahvasti he ovat eri mieltä tai samaa mieltä kustakin ala-asteikosta 7-portaisella Likert-asteikolla, jossa pistemäärä 1 tarkoittaa "täysin samaa mieltä" ja pistemäärä 7 tarkoittaa "täysin eri mieltä". Autonomian, ympäristön hallinnan, henkilökohtaisen kasvun, positiivisten suhteiden muihin, elämän tarkoituksen ja itsensä hyväksymisen ala-asteikkojen pistemäärät lasketaan yhteen, jolloin korkeammat pisteet osoittavat korkeampaa psykologisen hyvinvoinnin tasoa kussakin kategoriassa, vaikka pistemäärien välisiä luokituksia ei anneta.

Piperin väsymysasteikko (PFS)

Osallistujia pyydetään täyttämään Piper Fatigue Scale (PFS) -väsymysmittarin verkkoversio. PFS on 22-kysymyksinen väsymysseulontatyökalu, joka käyttää 0–10 visuaalista analogiaskaalaa, jossa pistemäärä 0 tarkoittaa "vähäistä tai ei lainkaan väsymystä" ja pistemäärä 10 tarkoittaa "maksimaalisen väsymyksen" oireita. Lisäksi on 5 kysymystä väsymysoireiden ja syiden laadulliseen karakterisointiin. Kysely on jaettu neljään alatesta: käyttäytyminen (6 kohdetta), affekti (5 kohdetta), sensorinen (5 kohdetta) ja kognitio/tunnetila (6 kohdetta). Alatestien pistemäärät saadaan jakamalla alatestikohteiden pistemäärät alatestikohteiden lukumäärällä. Samaa menetelmää käytetään kokonaispistemäärän laskemiseen, jossa korkeammat pistemäärät osoittavat enemmän väsymystä.

Pittsburghin unenlaatuindeksi (PSQI)

Osallistujia pyydetään täyttämään Pittsburghin unenlaadun indeksin (PSQI) verkkoversio. PSQI on 19 kysymyksen itse raportoitu unenlaadun työkalu, joka on jaettu 7 alaluokkaan pisteytystä varten, kuten subjektiivinen unenlaatu, unen saantiaika, unen kesto, tavallinen unen tehokkuus, unihäiriöt, unilääkkeiden käyttö ja päiväaikainen toimintahäiriö. Kunkin alaluokan pisteytys on seuraava: Unen kesto (0 = parempi, 3 = huonompi), Unihäiriöt (0 = parempi, 3 = huonompi), Unen saantiaika (0 = parempi, 3 = huonompi), Päiväaikainen toimintahäiriö (0 = parempi, 3 = huonompi), Unen tehokkuus (0 = parempi, 3 = huonompi), Unen laatu (0 = parempi, 3 = huonompi), Unilääkkeet (0 = parempi, 3 = huonompi). Kokonaispisteitä varten kunkin alaluokan pisteet lasketaan yhteen, jossa kokonaispisteet ≤ 5 liittyvät "hyvään unenlaatuun", kun taas pisteet ≥ 5 liittyvät "huonoon unenlaatuun".

Immuunistatustutkimus (ISQ)

Osallistujia pyydetään täyttämään Immuntilakyselyn (ISQ) verkkoversio. ISQ koostuu 7 kysymyksestä, jotka arvioivat vastaajan edellisen vuoden immuunitasoa kysymällä tiettyjen immuunijärjestelmään liittyvien oireiden esiintymisestä. ISQ auttaa määrittämään osallistujan koetun immuunikyvyn perustuen edellisen 12 kuukauden aikana esiintyneisiin tautioireisiin. ISQ käyttää 0-4 Likert-asteikkoa näiden oireiden esiintymisen arvioimiseen, jossa 0 tarkoittaa "Ei koskaan" ja 4 tarkoittaa "Aina (melkein)." Raaka-arvot lasketaan yhteen ja muunnetaan lopulliseksi pistemääräksi, jossa loppupistemäärä 0 tarkoittaa "erittäin heikkoa koettua immuunitasoa", kun taas loppupistemäärä 10 tarkoittaa "erinomaista koettua immuunitasoa". Loppupistemäärät alle 6 luokitellaan alentuneeksi koetuksi immuunitoiminnaksi.

Gastrointestinalisten oireiden kyselylomake (GSQ)

Osallistujia pyydetään täyttämään suolistovaiva-kyselyn (GSQ) verkkoversio. GSQ on 29 kysymyksen itse raportoitu suolistovaivojen seulontatyökalu, joka on jaettu kahteen pisteytysalaluokkaan: toinen käsittelee tänään koettuja suolistovaivoja ja toinen kahden viimeisen viikon aikana koettuja suolistovaivoja. Kyselyn lopussa on myös kaksi avointa kysymystä, joista toinen kuvaa muita kyselyssä käsittelemättömiä suolistovaivoja ja toinen käsittelee normaalia ruoan kulutusta. Suolistovaivojen esiintymisen pisteytys perustuu 4-pisteiseen Likert-asteikkoon, jossa 0 pistettä tarkoittaa "olematonta" oiretta ja 3 pistettä tarkoittaa oireen "vaikeaa" esiintymistä ja tiheyttä. Tätä kyselyä käytetään yleisten suolistovaivojen esiintymistiheyden ja vaikeusasteen kuvaamiseen.

Aikuisten syömiskäyttäytymisen kyselylomake (AEBQ)

Osallistujia pyydetään täyttämään verkkopohjainen versio Adult Eating Behavior Questionnaire (AEBQ) -kyselystä (Hunot ym., 2016). AEBQ on 35-kysymyksinen itsearviointityökalu, joka on suunniteltu arvioimaan yksilöllisiä eroja syömiskäyttäytymisessä kahdeksan erillisen ruokahalupiirteen osalta: Ruoan nauttiminen, Tunteellinen ylisyönti, Tunteellinen alisyönti, Ruokien valikoivuus, Ruokaan reagoiminen, Hitaasti syöminen, Nälkä, Kylläisyyden reagoiminen. Jokainen kysymys arvioidaan 5-portaisella Likert-asteikolla, jossa pistemäärä 1 tarkoittaa "täysin eri mieltä" ja pistemäärä 5 tarkoittaa "täysin samaa mieltä". Korkeammat pisteet osoittavat huonompia syömistapoja (tunteellinen ylisyönti ja tunteellinen alisyönti) tai parempia ruokailutapoja (ruokaan reagoiminen, ruoan nauttiminen, kylläisyyden reagoiminen, ruokien valikoivuus ja hitaasti syöminen).