Studie om Berberintillskott, Sprintintervallträning och Immunfunktion

Aktiv komparator: Berberine Endast-grupp (BO)

Deltagarna i BO kommer att konsumera ett kommersiellt tillgängligt Berberin-tillskott (500 mg, 3 gånger dagligen med måltider) i 2 veckor, förvarat i identiska veganska kapslar och instruerade att behålla dagliga aktiviteter och kostvanor.

Kosttillskott: Berberin

Intag av ett kommersiellt tillgängligt Berberintillskott i en dosering av 500 mg, tre gånger per dag tillsammans med måltider, för en total dosering av 1500 mg/dag.

Andra namn:

• Berberinhydroklorid

Placebo-jämförare: Placebogrupp (PO)

Deltagarna i PO kommer att inta placebokapslar (rismjöl, 3x dagligen med måltider) förvarade i identiska veganska kapslar i 2 veckor och instrueras att behålla sina dagliga aktiviteter och kostvanor.

Övrig: Placebo

Intag av placebokapslar bestående av rismjöl med en dosering av 3 kapslar per dag tillsammans med måltider.

Aktiv komparator: Sprintintervallträning + Berberingrupp (SB)

Deltagare i SB kommer att konsumera ett kommersiellt tillgängligt Berberin-tillskott (500mg, 3 gånger dagligen vid måltider) förvarat i identiska veganska kapslar och kommer att genomgå 6 Sprint Intervallträningspass under 2 veckor.

Kosttillskott: Berberin

Intag av ett kommersiellt tillgängligt Berberintillskott i en dosering av 500 mg, tre gånger per dag tillsammans med måltider, för en total dosering av 1500 mg/dag.

Andra namn:

• Berberinhydroklorid

Övrig: Sprintintervallträning

Flera omgångar av maximala ansträngningar med 30-sekunderssprinter, med 4 minuters vila/aktiv återhämtning mellan varje omgång, på cykelergometer under 6 sessioner under den 2-veckorslånga interventionen. Motståndet för varje omgång beräknas till 7,5 % av deltagarens kroppsvikt. Omgångarna för varje session är följande: (1) 4 omgångar, (2) 5 omgångar, (3) 6 omgångar, (4) 6 omgångar, (5) 7 omgångar, (6) 4 omgångar.

Andra namn:

• SITTA

Placebo-jämförare: Sprintintervallträning + Placebogrupp (SP)

Deltagarna i SP kommer att konsumera placebo-kapslar (rismjöl, 3 gånger dagligen med måltider) förvarade i identiska veganska kapslar och kommer att genomgå 6 sprintintervallträningssessioner under 2 veckor.

Övrig: Placebo

Intag av placebokapslar bestående av rismjöl med en dosering av 3 kapslar per dag tillsammans med måltider.

Övrig: Sprintintervallträning

Flera omgångar av maximala ansträngningar med 30-sekunderssprinter, med 4 minuters vila/aktiv återhämtning mellan varje omgång, på cykelergometer under 6 sessioner under den 2-veckorslånga interventionen. Motståndet för varje omgång beräknas till 7,5 % av deltagarens kroppsvikt. Omgångarna för varje session är följande: (1) 4 omgångar, (2) 5 omgångar, (3) 6 omgångar, (4) 6 omgångar, (5) 7 omgångar, (6) 4 omgångar.

Andra namn:

• SITTA

Monocytantal

Helblodssuspension av enskilda celler, 200 µL, kommer att färgas för CD14 (anti-human CD14-FITC) och CD16 (anti-human CD16-APC) (BioLegend, San Diego CA) efter lys av röda blodkroppar med 1X Red Blood Cell Lysis Buffer (BioLegend, San Diego CA) och blockering av Fc-receptorer med Fc-Blocker (BioLegend, San Diego CA). Preparerade prover kommer att analyseras på en Attune NxT flowcytometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) efter fixering och permeabilisering.

Monocytproduktion av intracellulär IL-6

100 µL celler aliquoterades i 12 x 75 mm tuber tillsammans med 150 µL Cyto-Fast™ Fix/Perm Solution (BioLegend, San Diego CA) och sedan inkuberades i 20 minuter vid rumstemperatur. Sedan tillsattes 1 mL 1X Cyto-Fast™ Perm Wash Solution (BioLegend, San Diego CA), centrifugerades vid 350xg i 5 minuter och supernatantet kastades, upprepades två gånger. Cellerna färgades sedan med optimala koncentrationer av PE anti-human IL-6-antikropp (BioLegend, San Diego CA) beredd som en masterblandning på 100 µL med 1X Cyto-Fast™ Perm Wash och inkuberades i 20 minuter vid rumstemperatur i mörker. Sedan tvättades cellerna med 1 mL 1X Cyto-Fast™ Perm Wash och centrifugerades vid 350xg i 5 minuter. Kasta supernatantet, tillsätt 1 mL Cell Staining Buffer (BioLegend, San Diego CA) och centrifugera vid 350xg i 5 minuter. Kasta supernatantet, resuspendera cellerna i 600 µL Cell Staining Buffer (BioLegend, San Diego CA) och kör på Attune NxT (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA).

C-reaktivt protein

Ungefär 60 mL helblod kommer att samlas in i serumseparatorrör (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, USA), får koagulera i 30 minuter vid rumstemperatur och centrifugeras sedan vid 2000 RPM i 15 minuter. Serumet kommer att pipetteras in i 1,5 mL mikrocentrifugrör (Eppendorf AG, Hamburg, Tyskland) och omedelbart förvaras i en -80 °C-frys. Serumkoncentrationer av CRP kommer att bestämmas med ett kommersiellt tillgängligt enzymkopplat immunadsorberande test (ALPCO Diagnostics, Salem, NH, USA). Mikroplattor kommer att läsas med en ELx800 BioTek mikroplatteläsare (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA) vid den rekommenderade våglängden på 450 nanometer.

Interleukin-6 (IL-6)

Ungefär 60 mL helblod kommer att samlas in i serumsepareringsrör (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, USA), får koagulera i 30 minuter vid rumstemperatur, och centrifugeras sedan vid 2000 varv per minut i 15 minuter. Serumet pipetteras in i 1,5 mL mikrocentrifugrör (Eppendorf AG, Hamburg, Tyskland) och omedelbart förvaras i en -80 °C frys. Serumkoncentrationer av IL-6 kommer att bestämmas med ett kommersiellt tillgängligt enzymkopplat immunosorbent assay (BioLegend, San Diego CA). Mikroplattor kommer att läsas med en ELx800 BioTek mikroplatteläsare (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA) vid den rekommenderade våglängden 450 nanometer.

Anaerob effekt

Deltagarna kommer att genomföra ett test av anaerob kondition med Wingates anaeroba effekttest på en cykelergometer (Monark Ergomedic 894E, Monark, Varberg, Sverige). Deltagarna kommer att värma upp mellan 60-75 varv per minut (RPM) med ett självvalt motstånd i 5 minuter. Efter uppvärmningen sänks motståndet till 0, och deltagaren instrueras sedan att börja trampa med maximal kadens. När deltagarna når sin maximala trampkadens kommer 7,5% av deltagarens kroppsvikt att läggas till cykelergometern, och testet börjar. Deltagarna kommer att cykla i totalt 30 sekunder med ett motstånd på 7,5% av kroppsvikten. Efter det 30 sekunder långa maximaltestet kommer deltagarna att cykla ytterligare 5 minuter med ett självvalt motstånd för att svalna. Mätningar av toppanaerob effekt, genomsnittlig anaerob effekt, relativ toppanaerob effekt, totalt arbete, trötthetsindex och maximal hjärtfrekvens kommer att registreras.

Depressions-, ångest- och stressskalor (DASS-21)

Deltagarna kommer att ombedas att fylla i en pappersversion av Depression Anxiety and Stress Scale (DASS-21), som består av 21 frågor. DASS-21 består av 21 frågor som använder en Likert-skala från 0 till 3 för att bedöma deltagarens subjektiva psykiska hälsa och stressnivå, där "0" indikerar "Stämde inte alls in på mig" och "3" indikerar "Stämde in på mig mycket eller för det mesta". DASS-21 innehåller 3 delskalor som bedömer depression, ångest och stress, bestående av 7 frågor för varje delskala, där ett högt poäng på 28+ indikerar "extremt svår" nivå av depression, ett högt poäng på 20+ indikerar "extremt svår" nivå av ångest och ett högt poäng på 34+ indikerar "extremt svår" nivå av stress, medan låga poäng på 0–9 indikerar "normal" nivå av depression, poäng på 0–7 indikerar "normal" nivå av ångest och poäng på 0–14 indikerar "normal" nivå av stress.

Mager kroppsmassa

Lean body mass (LBM) kommer att utvärderas med luftförskjutningspletyzmografi med hjälp av en kalibrerad BODPOD (COSMED USA Inc., Concord, CA). Deltagarna kommer att instrueras att ta av sig skor, strumpor, smycken och allt extra kläder utöver sitt underställ. Deltagarna kommer sedan att få en baddräktsmössa att bära och kroppssammansättningsanalys kommer att utföras enligt tillverkarens riktlinjer.

Kroppsfettprocent

Kroppsfettprocent (BF%) kommer att utvärderas med hjälp av luftförskjutningspletyysmografi med en kalibrerad BODPOD (COSMED USA Inc., Concord, CA). Deltagarna kommer att få instruktioner om att ta av sig skor, strumpor, smycken och allt extra kläder utom deras underställ. Deltagarna kommer sedan att få en baddrättsmössa att bära och kroppssammansättningsanalys kommer att utföras enligt tillverkarens riktlinjer.

Skala för Psykiskt Välbefinnande (PWB)

Deltagarna kommer att ombes att fylla i en onlineversion av den psykologiska välbefinnandeskalan (PWB). PWB är ett 18-frågeformulär som tar 6 minuter och mäter sex delskalor av välbefinnande och lycka: Autonomi, Miljömästerskap, Personlig Tillväxt, Positiva Relationer med Andra, Syfte i Livet och Självacceptans. De kommer att få instruktioner att bedöma hur starkt de inte håller med eller håller med med varje delskala på en 7-gradig Likert-skala, där poäng på 1 indikerar "instämmer helt" och poäng på 7 indikerar "instämmer inte alls". Poängen för delskalorna Autonomi, Miljömästerskap, Personlig Tillväxt, Positiva Relationer med Andra, Syfte i Livet och Självacceptans läggs ihop, där högre poäng indikerar högre nivåer av psykologiskt välbefinnande inom varje kategori, även om inga klassificeringar mellan poängen tillhandahålls.

Piper Fatigue Scale (PFS)

Deltagarna kommer att ombedjas att fylla i den webbaserade versionen av Piper Fatigue Scale (PFS). PFS är ett 22-frågor långt utmattningsscreeningverktyg som använder en visuell analog skala från 0 till 10, där poängen 0 indikerar "lite eller ingen utmattning" och poängen 10 indikerar "maximal utmattning" som symptom, med ytterligare 5 frågor för kvalitativ karakterisering av utmattningssymptom och orsaker. Frågeformuläret är uppdelat i 4 subskalor: beteende (6 frågor), affekt (5 frågor), sensoriskt (5 frågor) och kognition/stämning (6 frågor). Subskalapoäng erhålls genom att dela poängen från subskalafrågorna med antalet frågor i subskalan. Samma metod används för att beräkna det totala poängvärdet där högre poäng indikerar mer utmattning.

Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI)

Deltagarna kommer att ombeds att fylla i en onlineversion av Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI). PSQI är ett självrapporterat verktyg för sömnkvalitet med 19 frågor uppdelat i 7 underkategorier för poängsättning, såsom subjektiv sömnkvalitet, sömnlatens, sömnlängd, vanemässig sömn effektivitet, sömnstörningar, användning av sömnmedel och dagtid dysfunktion. Poängsättning för varje underavsnitt är som följer: Sömnlängd (0 = bättre, 3 = sämre), Sömnstörningar (0 = bättre, 3 = sämre), Sömnlatens (0 = bättre, 3 = sämre), Dagtid dysfunktion (0 = bättre, 3 = sämre), Sömneffektivitet (0 = bättre, 3 = sämre), Sömnkvalitet (0 = bättre, 3 = sämre), Sömnmedel (0 = bättre, 3 = sämre). För totalpoäng läggs summan av varje underavsnitts poäng ihop, där totalpoäng ≤ 5 förknippas med "god sömnkvalitet," medan poäng ≥ 5 förknippas med "dålig sömnkvalitet."

Immunstatusfrågeformulär (ISQ)

Deltagarna kommer att ombes att fylla i en onlineversion av Immune Status Questionnaire (ISQ). ISQ består av 7 frågor som bedömer respondentens immunstatus under det senaste året genom att fråga om förekomsten av specifika immunrelaterade besvär. ISQ hjälper till att fastställa deltagarens upplevda immunhälsa baserat på förekomsten av sjukdomssymptom under de senaste 12 månaderna. ISQ använder en Likert-skala från 0 till 4 för att utvärdera förekomsten av dessa symptom där 0 indikerar "Aldrig" och 4 indikerar "Alltid (Nästan)". De råa poängen summeras och omvandlas till ett slutpoäng där ett slutpoäng på 0 indikerar "mycket dålig upplevd immunstatus", medan ett slutpoäng på 10 indikerar "utmärkt upplevd immunstatus". Slutpoäng lägre än 6 kommer att klassificeras som nedsatt upplevd immunfunktion.

Gastrointestinala Symptom Frågeformulär (GSQ)

Deltagarna kommer att ombes att fylla i en onlineversion av Gastrointestinal Symptoms Questionnaire (GSQ). GSQ är ett självrapporterat screeningverktyg för gastrointestinala (GI) symtom med 29 frågor, uppdelat i två underkategorier för poängsättning: en för deras GI-symtom som upplevts idag och den andra för deras GI-symtom som upplevts under de senaste 2 veckorna. Det finns också två öppna frågor i slutet av enkäten, en som beskriver eventuella andra GI-symtom som inte tas upp i frågeformuläret och en annan som behandlar normal matkonsumtion. Poängsättning av förekomst av GI-symtom baseras på en 4-gradig Likert-skala där poäng på 0 indikerar "frånvarande" symtom medan poäng på 3 indikerar "allvarlig" förekomst och frekvens av symtom. Denna enkät kommer att användas för att karakterisera frekvensen och svårighetsgraden av vanliga GI-symtom.

Frågeformulär för vuxnas ätbeteende (AEBQ)

Deltagarna kommer att ombes att fylla i en onlineversion av Adult Eating Behavior Questionnaire (AEBQ) (Hunot et al., 2016). AEBQ är ett självrapporterat verktyg med 35 frågor som är utformat för att bedöma individuella skillnader i ätbeteende över åtta distinkta aptitdrag: Glädje av mat, Känslomässig överätning, Känslomässig underätning, Matkräsenhet, Matresponsivitet, Långsamhet i ätande, Hunger, Mättnadsresponsivitet. Varje fråga bedöms på en 5-gradig Likertskala där poäng på 1 indikerar "instämmer helt inte" och poäng på 5 indikerar "instämmer helt" med högre poäng som indikerar sämre ätbeteende (representerat av känslomässig överätning och känslomässig underätning) eller bättre kostvanor (representerat av matresponsivitet, glädje av mat, mättnadsresponsivitet, matkräsenhet och långsamhet i ätande).