Estudio de Suplementación de Berberina, Entrenamiento por Intervalos de Sprint y Función Inmunológica

Comparador activo: Grupo Solo Berberina (BO)

Los participantes en BO consumirán un suplemento de Berberina disponible comercialmente (500 mg, 3 veces al día con las comidas) durante 2 semanas, almacenado en cápsulas veganas idénticas, y se les indicará que mantengan sus actividades y dietas diarias.

Suplemento dietético: Berberina

Consumo de un suplemento de Berberina disponible comercialmente a una dosis de 500 mg, tres veces al día con las comidas, para una dosis total de 1500 mg/día.

Otros nombres:

• Clorhidrato de berberina

Comparador de placebos: Grupo con Placebo Únicamente (PO)

Los participantes en el grupo PO consumirán cápsulas de placebo (harina de arroz, 3 veces al día con las comidas) almacenadas en cápsulas veganas idénticas durante 2 semanas y se les indicará que mantengan sus actividades y dietas diarias.

Otro: Placebo

Consumo de cápsulas de placebo compuestas de harina de arroz con una dosificación de 3 cápsulas al día con las comidas.

Comparador activo: Grupo de Entrenamiento por Intervalos de Sprint + Berberina (SB)

Los participantes en SB consumirán un suplemento de Berberina de venta comercial (500 mg, 3 veces al día con las comidas) almacenado en cápsulas veganas idénticas y se someterán a 6 sesiones de Entrenamiento de Intervalos de Sprint durante 2 semanas.

Suplemento dietético: Berberina

Consumo de un suplemento de Berberina disponible comercialmente a una dosis de 500 mg, tres veces al día con las comidas, para una dosis total de 1500 mg/día.

Otros nombres:

• Clorhidrato de berberina

Otro: Entrenamiento de Intervalos de Sprint

Múltiples series de sprints de 30 segundos con esfuerzo máximo, intercalados con 4 minutos de descanso/recuperación activa, en el cicloergómetro a lo largo de 6 sesiones durante la intervención de 2 semanas. La resistencia para cada serie se calcula al 7.5% de la masa corporal del participante. Las series para cada sesión son las siguientes: (1) 4 series, (2) 5 series, (3) 6 series, (4) 6 series, (5) 7 series, (6) 4 series.

Otros nombres:

• SENTARSE

Comparador de placebos: Grupo de Entrenamiento por Intervalos de Sprint + Placebo (SP)

Los participantes en SP consumirán cápsulas de placebo (harina de arroz, 3 veces al día con las comidas) almacenadas en cápsulas veganas idénticas y realizarán 6 sesiones de Entrenamiento de Intervalos de Sprint durante 2 semanas.

Otro: Placebo

Consumo de cápsulas de placebo compuestas de harina de arroz con una dosificación de 3 cápsulas al día con las comidas.

Otro: Entrenamiento de Intervalos de Sprint

Múltiples series de sprints de 30 segundos con esfuerzo máximo, intercalados con 4 minutos de descanso/recuperación activa, en el cicloergómetro a lo largo de 6 sesiones durante la intervención de 2 semanas. La resistencia para cada serie se calcula al 7.5% de la masa corporal del participante. Las series para cada sesión son las siguientes: (1) 4 series, (2) 5 series, (3) 6 series, (4) 6 series, (5) 7 series, (6) 4 series.

Otros nombres:

• SENTARSE

Número de Monocitos

Una suspensión de células individuales de sangre completa, 200 µL, se teñirá para CD14 (anti-humano CD14-FITC) y CD16 (anti-humano CD16-APC) (BioLegend, San Diego, CA) tras la lisis de glóbulos rojos con 1X Buffer de Lisis de Glóbulos Rojos (BioLegend, San Diego, CA) y el bloqueo de receptores Fc con Bloqueador de Fc (BioLegend, San Diego, CA). Las muestras preparadas se analizarán en un citómetro de flujo Attune NxT (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) tras la fijación y permeabilización.

Producción de IL-6 Intracelular por Monocitos

Se alícuotarán 100 µL de células en tubos de 12 x 75 mm junto con 150 µL de Cyto-Fast™ Fix/Perm Solution (BioLegend, San Diego CA), luego se incubarán durante 20 minutos a temperatura ambiente. Después, se añadirá 1 mL de 1X Cyto-Fast™ Perm Wash Solution (BioLegend, San Diego CA), luego se centrifugará a 350xg durante 5 minutos y se descartará el sobrenadante, repitiéndose dos veces. Las células se teñirán entonces con concentraciones óptimas de anticuerpo PE anti-IL-6 humano (BioLegend, San Diego CA) preparado como una mezcla maestra de 100 µL con 1X Cyto-Fast™ Perm Wash, luego se incubarán durante 20 minutos a temperatura ambiente en la oscuridad. Después, las células se lavarán con 1 mL de 1X Cyto-Fast™ Perm Wash, luego se centrifugarán a 350xg durante 5 minutos. Descartar el sobrenadante, añadir 1 mL de Cell Staining Buffer (BioLegend, San Diego CA), luego centrifugar a 350xg durante 5 minutos. Descartar el sobrenadante, resuspender las células en 600 uL de Cell Staining Buffer (BioLegend, San Diego CA) y ejecutar en Attune NxT (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA).

Proteína C Reactiva

Se recogerán aproximadamente 60 mL de sangre total en tubos separadores de suero (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, EE. UU.), se dejarán coagular durante 30 minutos a temperatura ambiente y luego se centrifugarán a 2000 RPM durante 15 minutos. El suero se pipeteará en tubos de microcentrífuga de 1,5 mL (Eppendorf AG, Hamburgo, Alemania) y se almacenará inmediatamente en un congelador a -80 °C. Las concentraciones séricas de PCR se determinarán con un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas disponible comercialmente (ALPCO Diagnostics, Salem, NH, EE. UU.). Las microplacas se leerán con un lector de microplacas ELx800 BioTek (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, EE. UU.) a la longitud de onda recomendada de 450 nanómetros.

Interleucina-6 (IL-6)

Se recolectarán aproximadamente 60 mL de sangre total en tubos separadores de suero (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, EE. UU.), se dejarán coagular durante 30 minutos a temperatura ambiente y luego se centrifugarán a 2000 RPM durante 15 minutos. El suero se pipeteará en tubos de microcentrífuga de 1,5 mL (Eppendorf AG, Hamburgo, Alemania) y se almacenará inmediatamente en un congelador a -80 °C. Las concentraciones séricas de IL-6 se determinarán mediante un ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas disponible comercialmente (BioLegend, San Diego, CA, EE. UU.). Las microplacas se leerán con un lector de microplacas ELx800 BioTek (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, EE. UU.) a la longitud de onda recomendada de 450 nanómetros.

Potencia Anaeróbica

Los participantes completarán una medida de aptitud anaeróbica utilizando la prueba de potencia anaeróbica Wingate en un ergómetro de ciclo (Monark Ergomedic 894E, Monark, Varberg, Suecia). Los participantes realizarán un calentamiento entre 60 y 75 revoluciones por minuto (RPM) a una resistencia auto-seleccionada durante 5 minutos. Al completar el calentamiento, la resistencia se reducirá a 0, y se indicará al participante que comience a pedalear a su cadencia máxima. Una vez que los participantes alcancen su cadencia máxima de pedaleo, se añadirá el 7.5% de la masa corporal del participante al ergómetro de ciclo, y la prueba comenzará. Los participantes pedalearán durante un total de 30 segundos a una resistencia del 7.5% de la masa corporal. Al finalizar la prueba máxima de 30 segundos, los participantes pedalearán durante 5 minutos adicionales a una resistencia auto-seleccionada para su enfriamiento. Se registrarán las mediciones de potencia anaeróbica máxima, potencia anaeróbica media, potencia anaeróbica máxima relativa, trabajo total, índice de fatiga y frecuencia cardíaca máxima.

Escalas de Depresión, Ansiedad y Estrés (DASS-21)

Se pedirá a los participantes que completen una versión en papel de la Escala de Depresión, Ansiedad y Estrés de 21 ítems (DASS-21). La DASS-21 consta de 21 preguntas que utilizan una escala de Likert de 0 a 3 para evaluar el estado de salud mental subjetivo y el estrés del participante, donde un "0" indica "No se aplicó a mí en absoluto" y un "3" indica "Se aplicó a mí mucho o la mayor parte del tiempo". La DASS-21 contiene 3 subescalas que evalúan Depresión, Ansiedad y Estrés, cada una compuesta por 7 preguntas, donde una puntuación alta de 28+ indica niveles "Extremadamente Severos" de Depresión, una puntuación alta de 20+ indica niveles "Extremadamente Severos" de Ansiedad y una puntuación alta de 34+ indica niveles "Extremadamente Severos" de Estrés, mientras que puntuaciones bajas de 0-9 indican niveles "Normales" de Depresión, puntuaciones de 0-7 indican niveles "Normales" de Ansiedad y puntuaciones de 0-14 indican niveles "Normales" de Estrés.

Masa Corporal Magra

La masa corporal magra (MCM) se evaluará mediante pletismografía por desplazamiento de aire utilizando un BODPOD calibrado (COSMED USA Inc., Concord, CA). Se indicará a los participantes que se quiten los zapatos, los calcetines, las joyas y toda la ropa adicional aparte de su capa base. A continuación, se les dará un gorro de natación para que lo usen y se realizará el análisis de composición corporal según las directrices del fabricante.

Porcentaje de Grasa Corporal

El porcentaje de grasa corporal (BF%) se evaluará mediante pletismografía por desplazamiento de aire utilizando un BODPOD calibrado (COSMED USA Inc., Concord, CA).
Se indicará a los participantes que se quiten los zapatos, calcetines, joyas y toda la ropa adicional que no sea su capa base.
Posteriormente, se les dará un gorro de baño para que lo usen y se realizará el análisis de composición corporal según las directrices del fabricante.

Escala de Bienestar Psicológico (PWB)

Se pedirá a los participantes que completen una versión en línea de la escala de bienestar psicológico (PWB). La PWB es una medida de 18 ítems y 6 minutos de seis subescalas de bienestar y felicidad: Autonomía, Dominio Ambiental, Crecimiento Personal, Relaciones Positivas con los Demás, Propósito en la Vida y Autoaceptación. Se les indicará que califiquen cuánto están en desacuerdo o de acuerdo con cada subescala en una escala Likert de 7 puntos, donde las puntuaciones de 1 indican "totalmente de acuerdo" y las puntuaciones de 7 indican "totalmente en desacuerdo". Las puntuaciones de las subescalas de Autonomía, Dominio Ambiental, Crecimiento Personal, Relaciones Positivas con los Demás, Propósito en la Vida y Autoaceptación se suman, y las puntuaciones más altas indican niveles más altos de bienestar psicológico en cada categoría, aunque no se proporcionan clasificaciones entre las puntuaciones.

Escala de Fatiga de Piper (PFS)

Se pedirá a los participantes que completen la versión en línea de la Escala de Fatiga de Piper (PFS). La PFS es una herramienta de detección de fatiga de 22 preguntas que utiliza una escala analógica visual de 0 a 10, donde las puntuaciones de 0 indican "poca o ninguna fatiga" y las puntuaciones de 10 indican síntomas de "fatiga máxima", con 5 preguntas adicionales para la caracterización cualitativa de los síntomas y las causas de la fatiga. El cuestionario se divide en 4 subescalas: conductual (6 ítems), afectiva (5 ítems), sensorial (5 ítems) y cognitiva/de estado de ánimo (6 ítems). Las puntuaciones de las subescalas se obtienen dividiendo las puntuaciones de los ítems de la subescala por el número de ítems de la subescala. Se utiliza el mismo método para calcular la puntuación total, donde puntuaciones más altas indican mayor fatiga.

Índice de Calidad del Sueño de Pittsburgh (PSQI)

Se pedirá a los participantes que completen una versión en línea del Índice de Calidad del Sueño de Pittsburgh (PSQI). El PSQI es una herramienta de autoinforme de calidad del sueño de 19 preguntas dividida en 7 subcategorías para puntuación, como calidad subjetiva del sueño, latencia del sueño, duración del sueño, eficiencia habitual del sueño, alteraciones del sueño, uso de medicación para dormir y disfunción diurna. La puntuación de cada subsección es la siguiente: Duración del Sueño (0 = mejor, 3 = peor), Alteraciones del Sueño (0 = mejor, 3 = peor), Latencia del Sueño (0 = mejor, 3 = peor), Disfunción Diurna (0 = mejor, 3 = peor), Eficiencia del Sueño (0 = mejor, 3 = peor), Calidad del Sueño (0 = mejor, 3 = peor), Medicamentos para Dormir (0 = mejor, 3 = peor). Para la puntuación total, se suman las puntuaciones de cada subsección, donde las puntuaciones totales ≤ 5 se asocian con "buena calidad del sueño", mientras que las puntuaciones ≥ 5 se asocian con "mala calidad del sueño".

Cuestionario del Estado Inmunitario (ISQ)

Se pedirá a los participantes que completen una versión en línea del Cuestionario sobre el Estado Inmunitario (ISQ). El ISQ consta de 7 ítems que evalúan el estado inmunitario del encuestado en el último año, indagando sobre la incidencia de quejas específicas relacionadas con el sistema inmunitario. El ISQ ayuda a establecer la percepción de la condición inmunitaria del participante basándose en la incidencia de síntomas de enfermedad en los 12 meses anteriores. El ISQ utiliza una escala Likert de 0 a 4 para evaluar la incidencia de estos síntomas, donde 0 indica "Nunca" y 4 indica "Siempre (Casi siempre)". Las puntuaciones brutas se suman y se convierten en una puntuación final, donde una puntuación final de 0 indica "percepción de estado inmunitario muy deficiente", mientras que una puntuación final de 10 indica "percepción de estado inmunitario excelente". Las puntuaciones finales inferiores a 6 se clasificarán como percepción de función inmunitaria reducida.

Cuestionario de Síntomas Gastrointestinales (GSQ)

Se pedirá a los participantes que completen una versión en línea del Cuestionario de Síntomas Gastrointestinales (GSQ). El GSQ es una herramienta de detección gastrointestinal (GI) autodeclarada de 29 preguntas dividida en dos subcategorías para la puntuación: una para los síntomas GI experimentados hoy y otra para los síntomas GI experimentados en las últimas 2 semanas. También hay dos preguntas abiertas al final de la encuesta: una que describe cualquier otro síntoma GI no abordado en el cuestionario y otra que aborda el consumo normal de alimentos. La puntuación de la incidencia de síntomas GI se basa en una escala Likert de 4 puntos, donde las puntuaciones de 0 indican síntomas "ausentes", mientras que las puntuaciones de 3 indican una presencia y frecuencia "severas" de los síntomas. Esta encuesta se utilizará para caracterizar la frecuencia y la gravedad de los síntomas GI comunes.

Cuestionario de Conducta Alimentaria del Adulto (AEBQ)

Se pedirá a los participantes que completen una versión en línea del Cuestionario de Conducta Alimentaria en Adultos (AEBQ) (Hunot et al., 2016). El AEBQ es una herramienta de autoinforme de 35 ítems diseñada para evaluar las diferencias individuales en la conducta alimentaria en ocho rasgos de apetito distintos: Disfrute de la comida, Alimentación emocional excesiva, Alimentación emocional insuficiente, Exigencia con la comida, Respuesta a la comida, Lentitud al comer, Hambre, Respuesta a la saciedad. Cada ítem se califica en una escala Likert de 5 puntos, donde una puntuación de 1 indica "totalmente en desacuerdo" y una puntuación de 5 indica "totalmente de acuerdo". Las puntuaciones más altas indican peores hábitos alimentarios (representados por la alimentación emocional excesiva y la alimentación emocional insuficiente) o mejores hábitos dietéticos (representados por la respuesta a la comida, el disfrute de la comida, la respuesta a la saciedad, la exigencia con la comida y la lentitud al comer).