Studie om Berberintilskudd, Sprintintervalltrening og immunfunksjon

Aktiv komparator: Berberin Kun-gruppe (BO)

Deltakere i BO vil innta et kommersielt tilgjengelig Berberin-tilskudd (500 mg, 3 ganger daglig sammen med måltider) i 2 uker, oppbevart i identiske veganske kapsler, og vil få beskjed om å opprettholde daglige aktiviteter og kosthold.

Kosttilskudd: Berberin

Inntak av et kommersielt tilgjengelig Berberin-tilskudd i en dosering på 500 mg, tre ganger per dag sammen med måltider, for en total dosering på 1500 mg/dag.

Andre navn:

• Berberinhydroklorid

Placebo komparator: Kun Placebo-gruppe (PO)

Deltakere i PO vil konsumere placebo-kapsler (ris-mel, 3x daglig med måltider) oppbevart i identiske veganske kapsler i 2 uker, og blir instruert til å opprettholde daglige aktiviteter og kosthold.

Annen: Placebo

Inntak av placebo-kapsler bestående av rismel med en dosering på 3 kapsler per dag sammen med måltider.

Aktiv komparator: Sprintintervalltrening + Berberin-gruppe (SB)

Deltakere i SB vil innta et kommersielt tilgjengelig Berberin-kosttilskudd (500mg, 3 ganger daglig sammen med måltider) oppbevart i identiske veganske kapsler og vil gjennomgå 6 Sprint Intervall Treningsøkter over 2 uker.

Kosttilskudd: Berberin

Inntak av et kommersielt tilgjengelig Berberin-tilskudd i en dosering på 500 mg, tre ganger per dag sammen med måltider, for en total dosering på 1500 mg/dag.

Andre navn:

• Berberinhydroklorid

Annen: Sprintintervalltrening

Flere sett med maksimale 30-sekunders sprintløp, med 4 minutters hvile/aktiv gjenoppretting mellom hvert sett, på sykkelergometeret over 6 økter i løpet av den 2-ukers intervensjonen. Motstanden for hvert sett beregnes til 7,5 % av deltakerens kroppsvekt. Antall sett for hver økt er som følger: (1) 4 sett, (2) 5 sett, (3) 6 sett, (4) 6 sett, (5) 7 sett, (6) 4 sett.

Andre navn:

• SIT

Placebo komparator: Sprint Intervalltrening + Placebo Gruppe (SP)

Deltakere i SP vil innta placebo-kapsler (ris-mel, 3x daglig med måltider) oppbevart i identiske veganske kapsler og vil gjennomgå 6 Sprint Intervall Treningsøkter over 2 uker.

Annen: Placebo

Inntak av placebo-kapsler bestående av rismel med en dosering på 3 kapsler per dag sammen med måltider.

Annen: Sprintintervalltrening

Flere sett med maksimale 30-sekunders sprintløp, med 4 minutters hvile/aktiv gjenoppretting mellom hvert sett, på sykkelergometeret over 6 økter i løpet av den 2-ukers intervensjonen. Motstanden for hvert sett beregnes til 7,5 % av deltakerens kroppsvekt. Antall sett for hver økt er som følger: (1) 4 sett, (2) 5 sett, (3) 6 sett, (4) 6 sett, (5) 7 sett, (6) 4 sett.

Andre navn:

• SIT

Monosytta

Helblod enkeltcelleoppløsning, 200 µL, vil bli farget for CD14 (anti-human CD14-FITC) og CD16 (anti-human CD16-APC) (BioLegend, San Diego CA) etter lytse av røde blodceller med 1X Red Blood Cell Lysis Buffer (BioLegend, San Diego CA) og blokkering av Fc-reseptorer med Fc-Blocker (BioLegend, San Diego CA). Forberedte prøver vil bli kjørt på en Attune NxT flow cytometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) etter fiksering og permeabilisering.

Monosyttproduksjon av intracellulær IL-6

100 µL celler vil bli aliquotert inn i 12 x 75 mm rør sammen med 150 µL Cyto-Fast™ Fix/Perm Solution (BioLegend, San Diego CA), deretter inkubert i 20 minutter ved romtemperatur. Deretter vil 1 mL av 1X Cyto-Fast™ Perm Wash Solution (BioLegend, San Diego CA) bli tilsatt, deretter sentrifugert ved 350xg i 5 minutter og supernatanten fjernet, gjentatt to ganger. Celler vil deretter bli farget med optimale konsentrasjoner av PE anti-human IL-6 antistoff (BioLegend, San Diego CA) tilberedt som en masterblanding på 100 µL med 1X Cyto-Fast™ Perm Wash, deretter inkubert i 20 minutter ved romtemperatur i mørke. Deretter vil cellene bli vasket med 1 mL av 1X Cyto-Fast™ Perm Wash, deretter sentrifugert ved 350xg i 5 minutter. Fjern supernatant, tilsett 1 mL Cell Staining Buffer (BioLegend, San Diego CA), deretter sentrifuger ved 350xg i 5 minutter. Fjern supernatant, resuspendér celler i 600 µL Cell Staining Buffer (BioLegend, San Diego CA) og kjør på Attune NxT (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA).

C-reaktivt protein

Omtrent 60 mL helblod vil bli samlet i serumseparatorrør (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, USA), latt koagulere i 30 minutter ved romtemperatur, deretter sentrifugert ved 2000 RPM i 15 minutter. Serumet vil bli pipettert inn i 1,5 mL mikro-sentrifugerør (Eppendorf AG, Hamburg, Tyskland) og umiddelbart lagret i en -80 °C fryser. Serumkonsentrasjoner av CRP vil bli bestemt med en kommersielt tilgjengelig enzymimmunologisk test (ALPCO Diagnostics, Salem, NH, USA). Mikroplatene vil bli avlest med en ELx800 BioTek mikroplateleder (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA) ved den anbefalte bølgelengden på 450 nanometer.

Interleukin-6 (IL-6)

Omtrent 60 mL helblod vil bli samlet inn i serumseparatorrør (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, USA), latt stivne i 30 minutter ved romtemperatur, deretter sentrifugert ved 2000 RPM i 15 minutter. Serumet vil bli pipettert inn i 1,5 mL mikro-sentrifugerør (Eppendorf AG, Hamburg, Tyskland) og umiddelbart lagret i en -80 °C fryser. Serumkonsentrasjoner av IL-6 vil bli bestemt med et kommersielt tilgjengelig enzymkoblet immunosorbent assay (BioLegend, San Diego CA). Mikroplater vil bli avlest med en ELx800 BioTek mikroplateleser (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA) ved den anbefalte bølgelengden på 450 nanometer.

Anaerob kraft

Deltakerne vil gjennomføre en test for anaerob kapasitet ved hjelp av Wingate-anaerob-krafttesten på en sykkelergometer (Monark Ergomedic 894E, Monark, Varberg, Sverige). Deltakerne vil varme opp mellom 60-75 omdreininger per minutt (RPM) med en selvvalgt motstand i 5 minutter. Etter oppvarmingen vil motstanden reduseres til 0, og deltakeren vil deretter bli instruert til å begynne å tråkke med maksimal kadens. Når deltakerne når sin maksimale tråkkadens, vil 7,5 % av deltakerens kroppsmasse legges til sykkelergometeret, og testen vil begynne. Deltakerne vil sykle i totalt 30 sekunder med en motstand på 7,5 % av kroppsvekten. Etter den 30 sekunders maksimale testen vil deltakerne sykle i ytterligere 5 minutter med en selvvalgt motstand for avkjøling. Målinger av topp anaerob kraft, gjennomsnittlig anaerob kraft, relativ topp anaerob kraft, totalt arbeid, utmattelsesindeks og maksimal hjertefrekvens vil bli registrert.

Depresjons-, angst- og stressskalaer (DASS-21)

Deltakerne vil bli bedt om å fylle ut en papirversjon av 21-spørsmålsskalaen for depresjon, angst og stress (DASS-21). DASS-21 består av 21 spørsmål som bruker en 0-3 Likert-skala for å vurdere deltakerens subjektive mentale helse og stresstilstand, der "0" indikerer "Passet ikke på meg i det hele tatt" og "3" indikerer "Passet på meg veldig mye eller mesteparten av tiden." DASS-21 inneholder 3 underskalaer som vurderer depresjon, angst og stress, med 7 spørsmål for hver underskala, der en høy score på 28+ indikerer "Ekstremt alvorlige" nivåer av depresjon, en høy score på 20+ indikerer "Ekstremt alvorlige" nivåer av angst, og en høy score på 34+ indikerer "Ekstremt alvorlige" nivåer av stress, mens lave score på 0-9 indikerer "Normale" nivåer av depresjon, score på 0-7 indikerer "Normale" nivåer av angst, og score på 0-14 indikerer "Normale" nivåer av stress.

Mager kroppsmasse

Mager kroppsmasse (LBM) vil bli evaluert ved hjelp av luftfortrengningspletysmografi med en kalibrert BODPOD (COSMED USA Inc., Concord, CA). Deltakere vil bli bedt om å fjerne sko, sokker, smykker og alt tilleggsklær utenom bunnlaget. Deltakere vil deretter få en svømmelue å bruke, og kroppssammensetningsanalysen vil bli utført i henhold til produsentens retningslinjer.

Kroppsfettprosent

Kroppsfettprosent (BF%) vil bli evaluert ved hjelp av luftfortrengningspletysmografi med en kalibrert BODPOD (COSMED USA Inc., Concord, CA). Deltakerne vil bli instruert til å fjerne sko, sokker, smykker og alt tilleggstøy annet enn basislaget. Deltakerne vil deretter få en svømmelue å bruke, og kroppssammensetningsanalysen vil bli utført i henhold til produsentens retningslinjer.

Psykologisk velvære-skala (PWB)

Deltakere vil bli bedt om å fylle ut en nettbasert versjon av den psykologiske velvære-skalaen (PWB). PWB er en 18-spørsmål, 6-minutters måling av seks underkategorier av velvære og lykke: Autonomi, Kontroll over omgivelsene, Personlig vekst, Positive relasjoner med andre, Mening i livet og Selvaksept. De vil bli instruert til å vurdere hvor sterkt de er uenig eller enig med hver underkategori på en 7-punkts Likert-skala, hvor poengsum 1 indikerer "sterkt enig" og poengsum 7 indikerer "sterkt uenig". Underskala-poengsummene for Autonomi, Kontroll over omgivelsene, Personlig vekst, Positive relasjoner med andre, Mening i livet og Selvaksept legges sammen, der høyere poengsummer indikerer høyere nivåer av psykologisk velvære i hver kategori, selv om det ikke gis noen klassifiseringer mellom poengsummene.

Piper Fatigue Scale (PFS)

Deltakerne vil bli bedt om å fylle ut den elektroniske versjonen av Piper Fatigue Scale (PFS). PFS er et 22-spørsmåls utmattelsesscreeningverktøy som bruker en visuell analog skala fra 0 til 10, hvor en score på 0 indikerer «lite til ingen utmattelse» og en score på 10 indikerer «maksimal utmattelse»-symptomer, med 5 tilleggsspørsmål for kvalitativ karakterisering av utmattelsessymptomer og årsaker. Spørreskjemaet er delt inn i 4 subskalaer: atferd (6 elementer), affekt (5 elementer), sensorisk (5 elementer) og kognisjon/humør (6 elementer). Subskala-scorer oppnås ved å dele poengene fra subskala-elementene på antall elementer i subskalaen. Samme metode brukes for å beregne totalscore, hvor høyere score indikerer mer utmattelse.

Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI)

Deltakerne vil bli bedt om å fylle ut en onlineversjon av Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI). PSQI er et selvrapportert verktøy for søvnkvalitet med 19 spørsmål, delt inn i 7 underkategorier for scoring, som subjektiv søvnkvalitet, søvnlatens, søvnduration, vanlig søvneffektivitet, søvnforstyrrelser, bruk av sovemedisin og dagtid dysfunksjon. Scoring for hver underseksjon er som følger: Søvnduration (0 = bedre, 3 = verre), Søvnforstyrrelser (0 = bedre, 3 = verre), Søvnlatens (0 = bedre, 3 = verre), Dagtid Dysfunksjon (0 = bedre, 3 = verre), Søvneffektivitet (0 = bedre, 3 = verre), Søvnkvalitet (0 = bedre, 3 = verre), Søvnmedisiner (0 = bedre, 3 = verre). For totalscoring legges summen av hver underseksjons score sammen, hvor totalscore ≤ 5 er assosiert med "god søvnkvalitet," mens score ≥ 5 er assosiert med "dårlig søvnkvalitet."

Spørreskjema for immunstatus (ISQ)

Deltakerne vil bli bedt om å fylle ut en nettbasert versjon av Immune Status Questionnaire (ISQ). ISQ består av 7 punkter som vurderer respondentens immunstatus det siste året, ved å spørre om forekomsten av spesifikke immunrelaterte plager. ISQ bidrar til å fastslå deltakerens opplevde immunstyrke basert på forekomsten av sykdomssymptomer de siste 12 månedene. ISQ bruker en Likert-skala fra 0 til 4 for å vurdere forekomsten av disse symptomene, hvor 0 indikerer "Aldri" og 4 indikerer "Alltid (nesten)." Råskårene blir lagt sammen og konvertert til en endelig score hvor en endelig score på 0 indikerer "svært dårlig opplevd immunstatus," mens en endelig score på 10 indikerer "utmerket opplevd immunstatus." Endelige scorer under 6 vil bli klassifisert som redusert opplevd immunfunksjon.

Spørreskjema for gastrointestinale symptomer (GSQ)

Deltakerne vil bli bedt om å fullføre en nettbasert versjon av Gastrointestinal Symptoms Questionnaire (GSQ). GSQ er et selvrapporteringsverktøy med 29 spørsmål for screening av gastrointestinale (GI) symptomer, som er delt inn i to underkategorier for poengberegning: én for GI-symptomene de har opplevd i dag og en annen for GI-symptomene de har opplevd de siste 2 ukene. Det er også to åpne spørsmål på slutten av undersøkelsen: ett som beskriver eventuelle andre GI-symptomer som ikke er dekket i spørreskjemaet, og et annet som omhandler vanlig matinntak. Poengberegningen av forekomsten av GI-symptomer er basert på en 4-punkts Likert-skala, der en poengsum på 0 indikerer "fraværende" symptomer, mens en poengsum på 3 indikerer "alvorlig" forekomst og hyppighet av symptomer. Denne undersøkelsen vil bli brukt til å karakterisere hyppigheten og alvorlighetsgraden av vanlige GI-symptomer.

Spørreskjema for voksnes spiseatferd (AEBQ)

Deltakerne vil bli bedt om å fylle ut en nettbasert versjon av Spørreskjemaet for voksnes spiseatferd (AEBQ) (Hunot et al., 2016). AEBQ er et selvrapporteringsverktøy med 35 punkter som er designet for å vurdere individuelle forskjeller i spiseatferd innenfor åtte ulike appetitttrekk: Glede av mat, Følelsesmessig overspising, Følelsesmessig underspising, Kresenhet på mat, Matresponsivitet, Treghet i spising, Sult, Metthetsresponsivitet. Hvert punkt vurderes på en 5-punkts Likert-skala der en poengsum på 1 indikerer "sterkt uenig" og en poengsum på 5 indikerer "sterkt enig", med høyere poengsummer som indikerer dårligere spisevaner (representert ved følelsesmessig overspising og følelsesmessig underspising) eller bedre kostholdsvaner (representert ved matresponsivitet, glede av mat, metthetsresponsivitet, kresenhet på mat og treghet i spising).