Исследование влияния добавок берберина, интервальных спринтерских тренировок и функции иммунной системы

Активный компаратор: Группа только берберина (БО)

Участники исследования BO будут принимать коммерчески доступную добавку берберина (500 мг, 3 раза в день во время еды) в течение 2 недель, хранящуюся в идентичных веганских капсулах, и им будет рекомендовано сохранять свои обычные повседневные активности и рацион питания.

Диетическая добавка: Берберин

Приём коммерчески доступной добавки Берберина в дозировке 500 мг три раза в день во время еды, что составляет общую дозировку 1500 мг/сутки.

Другие имена:

• Берберина гидрохлорид

Плацебо Компаратор: Группа только с плацебо (PO)

Участники в группе плацебо будут принимать капсулы плацебо (рисовую муку, 3 раза в день во время еды), хранящиеся в идентичных веганских капсулах, в течение 2 недель, и им будет дано указание сохранять повседневную активность и рацион питания.

Другой: Плацебо

Прием плацебо-капсул, состоящих из рисовой муки, в дозировке 3 капсулы в день во время еды.

Активный компаратор: Группа спринтерского интервального тренинга + берберин (SB)

Участники в группе SB будут принимать коммерчески доступную добавку берберина (500 мг, 3 раза в день во время еды), хранящуюся в идентичных веганских капсулах, и пройдут 6 сеансов спринтерского интервального тренинга в течение 2 недель.

Диетическая добавка: Берберин

Приём коммерчески доступной добавки Берберина в дозировке 500 мг три раза в день во время еды, что составляет общую дозировку 1500 мг/сутки.

Другие имена:

• Берберина гидрохлорид

Другой: Спринтерский интервальный тренинг

Множественные подходы максимально интенсивных 30-секундных спринтов, разделенные 4 минутами отдыха/активного восстановления, на велоэргометре в течение 6 сессий во время 2-недельного вмешательства.
Сопротивление для каждого подхода рассчитывается как 7,5% от массы тела участника.
Подходы для каждой сессии следующие: (1) 4 подхода, (2) 5 подходов, (3) 6 подходов, (4) 6 подходов, (5) 7 подходов, (6) 4 подхода.

Другие имена:

• СИДЕТЬ

Плацебо Компаратор: Группа спринтерского интервального тренинга + плацебо (SP)

Участники в группе SP будут принимать капсулы плацебо (рисовой муки, 3 раза в день во время еды), хранящиеся в идентичных веганских капсулах, и пройдут 6 сессий спринтерского интервального тренинга в течение 2 недель.

Другой: Плацебо

Прием плацебо-капсул, состоящих из рисовой муки, в дозировке 3 капсулы в день во время еды.

Другой: Спринтерский интервальный тренинг

Множественные подходы максимально интенсивных 30-секундных спринтов, разделенные 4 минутами отдыха/активного восстановления, на велоэргометре в течение 6 сессий во время 2-недельного вмешательства.
Сопротивление для каждого подхода рассчитывается как 7,5% от массы тела участника.
Подходы для каждой сессии следующие: (1) 4 подхода, (2) 5 подходов, (3) 6 подходов, (4) 6 подходов, (5) 7 подходов, (6) 4 подхода.

Другие имена:

• СИДЕТЬ

Количество моноцитов

Цельная кровь в виде суспензии отдельных клеток, объемом 200 мкл, будет окрашена на CD14 (анти-человеческий CD14-FITC) и CD16 (анти-человеческий CD16-APC) (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния) после лизиса эритроцитов с использованием 1X буфера для лизиса эритроцитов (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния) и блокирования Fc-рецепторов с помощью Fc-блокатора (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния). Подготовленные образцы будут проанализированы на проточном цитометре Attune NxT (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс) после фиксации и пермеабилизации.

Продукция моноцитами внутриклеточного ИЛ-6

100 мкл клеток будет разлито в пробирки 12 x 75 мм вместе с 150 мкл Cyto-Fast™ Fix/Perm Solution (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния), затем инкубировано в течение 20 минут при комнатной температуре. Затем будет добавлен 1 мл 1X Cyto-Fast™ Perm Wash Solution (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния), затем центрифугировано при 350xg в течение 5 минут и супернатант удален, повторено дважды. Затем клетки будут окрашены оптимальными концентрациями PE антитела к человеческому IL-6 (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния), приготовленными как мастер-микс из 100 мкл с 1X Cyto-Fast™ Perm Wash, затем инкубированы в течение 20 минут при комнатной температуре в темноте. Затем клетки будут промыты 1 мл 1X Cyto-Fast™ Perm Wash, затем центрифугированы при 350xg в течение 5 минут. Удалить супернатант, добавить 1 мл Cell Staining Buffer (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния), затем центрифугировать при 350xg в течение 5 минут. Удалить супернатант, ресуспендировать клетки в 600 мкл Cell Staining Buffer (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния) и запустить на Attune NxT (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс).

C-реактивный белок

Приблизительно 60 мл цельной крови будет собрано в пробирки для разделения сыворотки (Beckton Dickinson, Ист-Ратерфорд, Нью-Джерси, США), оставлено для свертывания в течение 30 минут при комнатной температуре, затем центрифугировано при 2000 об/мин в течение 15 минут. Сыворотка будет перенесена пипеткой в микропробирки объемом 1,5 мл (Eppendorf AG, Гамбург, Германия) и немедленно помещена в морозильную камеру при -80 °C. Концентрация CRP в сыворотке будет определена с помощью коммерчески доступного иммуноферментного анализа (ALPCO Diagnostics, Сейлем, Нью-Гэмпшир, США). Микропланшеты будут прочитаны с помощью микропланшетного ридера ELx800 BioTek (BioTek Instruments, Inc., Уиноски, Вермонт, США) на рекомендуемой длине волны 450 нанометров.

Интерлейкин-6 (IL-6)

Приблизительно 60 мл цельной крови будет собрано в пробирки для отделения сыворотки (Beckton Dickinson, Ист-Ратерфорд, Нью-Джерси, США), оставлено для свертывания в течение 30 минут при комнатной температуре, а затем центрифугировано при 2000 об/мин в течение 15 минут. Сыворотка будет перенесена пипеткой в микроцентрифужные пробирки объемом 1,5 мл (Eppendorf AG, Гамбург, Германия) и немедленно помещена в морозильную камеру при температуре -80 °C. Концентрации IL-6 в сыворотке будут определены с помощью коммерчески доступного иммуноферментного анализа (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния, США). Микропланшеты будут прочитаны с помощью микропланшетного ридера ELx800 BioTek (BioTek Instruments, Inc., Уинуски, Вермонт, США) на рекомендуемой длине волны 450 нанометров.

Анаэробная мощность

Участники пройдут тест на анаэробную выносливость с использованием теста Вингейта на велоэргометре (Monark Ergomedic 894E, Monark, Varberg, Швеция). Участники проведут разминку при 60-75 оборотах в минуту (RPM) с самостоятельно выбранным сопротивлением в течение 5 минут. После завершения разминки сопротивление будет снижено до 0, и участнику будет дана инструкция начать педалирование с максимальной частотой. Как только участники достигнут максимальной частоты педалирования, к велоэргометру будет добавлена нагрузка, равная 7,5% массы тела участника, и тест начнется. Участники будут крутить педали в течение 30 секунд с сопротивлением, равным 7,5% массы тела. По завершении 30-секундного максимального теста участники продолжат крутить педали в течение дополнительных 5 минут с самостоятельно выбранным сопротивлением для заминки. Будут зарегистрированы измерения пиковой анаэробной мощности, средней анаэробной мощности, относительной пиковой анаэробной мощности, общей работы, индекса утомления и максимальной частоты сердечных сокращений.

Шкалы депрессии, тревоги и стресса (DASS-21)

Участникам будет предложено заполнить бумажную версию 21-пунктной шкалы депрессии, тревоги и стресса (DASS-21). DASS-21 состоит из 21 вопроса, использующего шкалу Лайкерта от 0 до 3, оценивающую субъективное психическое здоровье и состояние стресса участника, где «0» означает «Совсем не относилось ко мне», а «3» — «Относилось ко мне очень сильно или большую часть времени». DASS-21 содержит 3 субшкалы, оценивающие депрессию, тревогу и стресс, каждая из которых состоит из 7 вопросов, где высокий балл 28+ указывает на «Чрезвычайно тяжелый» уровень депрессии, высокий балл 20+ указывает на «Чрезвычайно тяжелый» уровень тревоги, а высокий балл 34+ указывает на «Чрезвычайно тяжелый» уровень стресса, в то время как низкие баллы 0-9 указывают на «Нормальный» уровень депрессии, баллы 0-7 указывают на «Нормальный» уровень тревоги, а баллы 0-14 указывают на «Нормальный» уровень стресса.

Масса безжировой ткани

Масса безжировой ткани (МБТ) будет оцениваться с помощью плетизмографии с вытеснением воздуха с использованием калиброванного BODPOD (COSMED USA Inc., Конкорд, Калифорния). Участникам будет предложено снять обувь, носки, украшения и всю дополнительную одежду, кроме базового слоя. Затем участникам выдадут шапочку для плавания, и анализ состава тела будет проведен в соответствии с рекомендациями производителя.

Процент жира в организме

Процент жира в организме (ПЖТ) будет оцениваться с помощью воздушно-дисперсионной плетизмографии с использованием калиброванного BODPOD (COSMED USA Inc., Конкорд, Калифорния, США). Участникам будет предложено снять обувь, носки, украшения и всю дополнительную одежду, кроме базового слоя. Затем участникам выдадут плавательную шапочку, и анализ состава тела будет проведен в соответствии с рекомендациями производителя.

Шкала психологического благополучия (PWB)

Участникам будет предложено заполнить онлайн-версию шкалы психологического благополучия (ШПБ). ШПБ представляет собой 18-пунктовое, 6-минутное измерение шести субшкал благополучия и счастья: Автономия, Овладение средой, Личностный рост, Позитивные отношения с другими, Цель в жизни и Самопринятие. Им будет предложено оценить, насколько сильно они не согласны или согласны с каждым утверждением по 7-балльной шкале Лайкерта, где 1 балл означает «полностью согласен», а 7 баллов — «полностью не согласен». Баллы по субшкалам Автономия, Овладение средой, Личностный рост, Позитивные отношения с другими, Цель в жизни и Самопринятие суммируются, причём более высокие баллы указывают на более высокий уровень психологического благополучия в каждой категории, хотя классификация между баллами не предоставляется.

Шкала усталости Пайпера (PFS)

Участникам будет предложено заполнить онлайн-версию Шкалы усталости Пайпера (PFS). PFS представляет собой инструмент скрининга усталости, состоящий из 22 вопросов, использующий визуальную аналоговую шкалу от 0 до 10, где 0 баллов означают «незначительную усталость или её отсутствие», а 10 баллов — «максимальную усталость», с 5 дополнительными вопросами для качественной характеристики симптомов и причин усталости. Опросник разделен на 4 подшкалы: поведенческая (6 пунктов), эмоциональная (5 пунктов), сенсорная (5 пунктов) и когнитивная/настроения (6 пунктов). Баллы по подшкалам рассчитываются путем деления суммы баллов по пунктам подшкалы на количество пунктов в подшкале. Такой же метод используется для расчета общего балла, причем более высокие баллы указывают на большую усталость.

Питтсбургский индекс качества сна (PSQI)

Участникам будет предложено заполнить онлайн-версию Питтсбургского индекса качества сна (PSQI). PSQI — это инструмент для самооценки качества сна, состоящий из 19 вопросов, разбитых на 7 подкатегорий для оценки, таких как субъективное качество сна, латентность сна, продолжительность сна, привычная эффективность сна, нарушения сна, использование снотворных препаратов и дневная дисфункция. Оценка для каждой подкатегории следующая: Продолжительность сна (0 = лучше, 3 = хуже), Нарушения сна (0 = лучше, 3 = хуже), Латентность сна (0 = лучше, 3 = хуже), Дневная дисфункция (0 = лучше, 3 = хуже), Эффективность сна (0 = лучше, 3 = хуже), Качество сна (0 = лучше, 3 = хуже), Снотворные препараты (0 = лучше, 3 = хуже). Для общей оценки баллы каждой подкатегории суммируются, где общий балл ≤ 5 соответствует «хорошему качеству сна», а балл ≥ 5 — «плохому качеству сна».

Опросник иммунного статуса (ISQ)

Участникам будет предложено заполнить онлайн-версию Опросника иммунного статуса (ОИС). ОИС состоит из 7 пунктов, оценивающих иммунный статус респондента за прошедший год, путём опроса о частоте возникновения конкретных жалоб, связанных с иммунитетом. ОИС помогает установить воспринимаемую иммунную устойчивость участника на основе частоты возникновения симптомов заболеваний за предыдущие 12 месяцев. ОИС использует шкалу Лайкерта от 0 до 4 для оценки частоты этих симптомов, где 0 означает «Никогда», а 4 — «Всегда (Почти всегда)». Сырые баллы суммируются и преобразуются в итоговый балл, где итоговый балл 0 означает «очень плохое воспринимаемое иммунное состояние», а итоговый балл 10 означает «отличное воспринимаемое иммунное состояние». Итоговые баллы менее 6 будут классифицированы как сниженная воспринимаемая иммунная функция.

Опросник желудочно-кишечных симптомов (GSQ)

Участникам будет предложено заполнить онлайн-версию Анкеты желудочно-кишечных симптомов (GSQ). GSQ — это инструмент самодиагностики желудочно-кишечных (ЖКТ) симптомов, состоящий из 29 вопросов и разделённый на две подкатегории для оценки: одна касается ЖКТ-симптомов, испытанных сегодня, а другая — ЖКТ-симптомов, испытанных за последние 2 недели. В конце анкеты также есть два открытых вопроса: один описывает любые другие ЖКТ-симптомы, не затронутые в анкете, а другой касается обычного потребления пищи. Оценка частоты ЖКТ-симптомов основана на 4-балльной шкале Лайкерта, где 0 баллов указывает на «отсутствие» симптомов, а 3 балла — на «тяжёлое» проявление и частоту симптомов. Этот опрос будет использован для характеристики частоты и тяжести распространённых ЖКТ-симптомов.

Опросник пищевого поведения взрослых (AEBQ)

Участникам будет предложено заполнить онлайн-версию Опросника пищевого поведения для взрослых (AEBQ) (Hunot et al., 2016). AEBQ — это инструмент самоотчёта из 35 пунктов, предназначенный для оценки индивидуальных различий в пищевом поведении по восьми различным аппетитным чертам: удовольствие от еды, эмоциональное переедание, эмоциональное недоедание, привередливость в еде, реакция на еду, медлительность в еде, голод, реакция на насыщение. Каждый пункт оценивается по 5-балльной шкале Лайкерта, где оценка 1 означает «категорически не согласен», а оценка 5 — «полностью согласен», причём более высокие баллы указывают на худшие пищевые привычки (представленные эмоциональным перееданием и эмоциональным недоеданием) или лучшие пищевые привычки (представленные реакцией на еду, удовольствием от еды, реакцией на насыщение, привередливостью в еде и медлительностью в еде).