Estudo sobre Suplementação de Berberina, Treino Intervalado de Sprint e Função Imunológica

Comparador Ativo: Grupo Apenas Berberina (BO)

Os participantes no BO consumirão um suplemento de Berberina comercialmente disponível (500mg, 3x por dia com as refeições) durante 2 semanas, armazenado em cápsulas veganas idênticas, e serão instruídos a manter as atividades e dietas diárias.

Suplemento dietético: Berberina

Consumo de um suplemento de Berberina comercialmente disponível numa dosagem de 500mg, três vezes por dia com as refeições, para uma dosagem total de 1500mg/dia.

Outros nomes:

• Cloridrato de Berberina

Comparador de Placebo: Grupo de Placebo Apenas (PO)

Os participantes no PO consumirão cápsulas de placebo (farinha de arroz, 3x por dia com as refeições) armazenadas em cápsulas veganas idênticas durante 2 semanas e serão instruídos a manter as atividades e dietas diárias.

Outro: Placebo

Consumo de cápsulas de placebo compostas por farinha de arroz com uma dosagem de 3 cápsulas por dia, às refeições.

Comparador Ativo: Grupo de Treino Intervalado de Sprint + Berberina (SB)

Os participantes no SB irão consumir um suplemento de Berberina disponível comercialmente (500mg, 3x ao dia com as refeições) armazenado em cápsulas veganas idênticas e irão realizar 6 sessões de Treino Intervalado de Sprint durante 2 semanas.

Suplemento dietético: Berberina

Consumo de um suplemento de Berberina comercialmente disponível numa dosagem de 500mg, três vezes por dia com as refeições, para uma dosagem total de 1500mg/dia.

Outros nomes:

• Cloridrato de Berberina

Outro: Treino Intervalado de Sprint

Múltiplas séries de sprints de 30 segundos com esforço máximo, intercaladas com 4 minutos de descanso/recuperação ativa, no cicloergómetro ao longo de 6 sessões durante a intervenção de 2 semanas.
A resistência para cada série é calculada a 7,5% da massa corporal do participante.
As séries para cada sessão são as seguintes: (1) 4 séries, (2) 5 séries, (3) 6 séries, (4) 6 séries, (5) 7 séries, (6) 4 séries.

Outros nomes:

• SENTAR

Comparador de Placebo: Grupo de Treino Intervalado de Sprint + Placebo (SP)

Os participantes no SP irão consumir cápsulas de placebo (farinha de arroz, 3x por dia com as refeições) armazenadas em cápsulas veganas idênticas e realizarão 6 sessões de Treino Intervalado de Sprint durante 2 semanas.

Outro: Placebo

Consumo de cápsulas de placebo compostas por farinha de arroz com uma dosagem de 3 cápsulas por dia, às refeições.

Outro: Treino Intervalado de Sprint

Múltiplas séries de sprints de 30 segundos com esforço máximo, intercaladas com 4 minutos de descanso/recuperação ativa, no cicloergómetro ao longo de 6 sessões durante a intervenção de 2 semanas.
A resistência para cada série é calculada a 7,5% da massa corporal do participante.
As séries para cada sessão são as seguintes: (1) 4 séries, (2) 5 séries, (3) 6 séries, (4) 6 séries, (5) 7 séries, (6) 4 séries.

Outros nomes:

• SENTAR

Número de Monócitos

Uma suspensão de células únicas de sangue total, 200 μL, será corada para CD14 (anti-humano CD14-FITC) e CD16 (anti-humano CD16-APC) (BioLegend, San Diego CA) após a lise dos glóbulos vermelhos com Tampão de Lise de Glóbulos Vermelhos 1X (BioLegend, San Diego CA) e o bloqueio dos recetores Fc com Bloqueador de Fc (BioLegend, San Diego CA). As amostras preparadas serão analisadas num citómetro de fluxo Attune NxT (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) após fixação e permeabilização.

Produção Monocítica de IL-6 Intracelular

100 µL de células serão alíquotados em tubos de 12 x 75 mm juntamente com 150 µL de Cyto-Fast™ Fix/Perm Solution (BioLegend, San Diego CA), depois incubados durante 20 minutos à temperatura ambiente. Depois, será adicionado 1 mL de 1X Cyto-Fast™ Perm Wash Solution (BioLegend, San Diego CA), centrifugado a 350xg durante 5 minutos e o sobrenadante descartado, repetido duas vezes. As células serão então coradas com concentrações ótimas de anticorpo PE anti-humano IL-6 (BioLegend, San Diego CA) preparado como uma mistura principal de 100 µL com 1X Cyto-Fast™ Perm Wash, depois incubadas durante 20 minutos à temperatura ambiente no escuro. Depois, as células serão lavadas com 1 mL de 1X Cyto-Fast™ Perm Wash, depois centrifugadas a 350xg durante 5 minutos. Descartar o sobrenadante, adicionar 1 mL de Cell Staining Buffer (BioLegend, San Diego CA), depois centrifugar a 350xg durante 5 minutos. Descartar o sobrenadante, ressuspender as células em 600 uL de Cell Staining Buffer (BioLegend, San Diego CA) e correr no Attune NxT (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA).

Proteína C-Reativa

Serão recolhidos aproximadamente 60 mL de sangue total em tubos separadores de soro (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, EUA), que serão deixados coagular durante 30 minutos à temperatura ambiente e, em seguida, centrifugados a 2000 RPM durante 15 minutos. O soro será pipetado para tubos de microcentrífuga de 1,5 mL (Eppendorf AG, Hamburgo, Alemanha) e imediatamente armazenado num congelador a -80 °C. As concentrações séricas de PCR serão determinadas com um ensaio de imunoabsorção enzimática disponível comercialmente (ALPCO Diagnostics, Salem, NH, EUA). As microplacas serão lidas com um leitor de microplacas ELx800 BioTek (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, EUA) no comprimento de onda recomendado de 450 nanómetros.

Interleucina-6 (IL-6)

Serão recolhidos aproximadamente 60 mL de sangue total em tubos separadores de soro (Beckton Dickinson, East Rutherford, NJ, EUA), deixando coagular durante 30 minutos à temperatura ambiente, e depois centrifugados a 2000 RPM durante 15 minutos. O soro será pipetado para tubos de microcentrífuga de 1,5 mL (Eppendorf AG, Hamburgo, Alemanha) e imediatamente armazenado num congelador a -80 °C. As concentrações séricas de IL-6 serão determinadas com um ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) comercialmente disponível (BioLegend, San Diego, CA, EUA). As microplacas serão lidas com um leitor de microplacas ELx800 BioTek (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, EUA) no comprimento de onda recomendado de 450 nanómetros.

Potência Anaeróbia

Os participantes irão realizar uma avaliação da capacidade anaeróbica utilizando o teste de potência anaeróbica Wingate num cicloergómetro (Monark Ergomedic 894E, Monark, Varberg, Suécia). Os participantes farão um aquecimento entre 60-75 rotações por minuto (RPM) com uma resistência escolhida por si durante 5 minutos. Após a conclusão do aquecimento, a resistência será reduzida para 0, e o participante será instruído a começar a pedalar à sua cadência máxima. Quando os participantes atingirem a sua cadência máxima de pedalada, 7,5% da massa corporal do participante será adicionada ao cicloergómetro, e o teste começará. Os participantes irão pedalar durante um total de 30 segundos com uma resistência de 7,5% da massa corporal. No final dos 30 segundos de teste máximo, os participantes irão pedalar durante mais 5 minutos com uma resistência escolhida por si para o seu período de arrefecimento. Serão registadas medições de potência anaeróbica de pico, potência anaeróbica média, potência anaeróbica de pico relativa, trabalho total, índice de fadiga e frequência cardíaca máxima.

Escalas de Depressão, Ansiedade e Stress (DASS-21)

Os participantes serão convidados a preencher uma versão em papel da Escala de Depressão, Ansiedade e Stress de 21 itens (DASS-21). A DASS-21 consiste em 21 perguntas que utilizam uma escala de Likert de 0-3 para avaliar o estado mental subjectivo e de stress do participante, onde um "0" indica "Não se aplicou a mim de todo" e um "3" indica "Aplicou-se a mim muito ou na maioria das vezes." A DASS-21 contém 3 subescalas que avaliam Depressão, Ansiedade e Stress, consistindo cada uma em 7 perguntas, onde uma pontuação elevada de 28+ indica níveis "Extremamente Graves" de Depressão, uma pontuação elevada de 20+ indica níveis "Extremamente Graves" de Ansiedade, e uma pontuação elevada de 34+ indica níveis "Extremamente Graves" de Stress, enquanto pontuações baixas de 0-9 indicam níveis "Normais" de Depressão, pontuações de 0-7 indicam níveis "Normais" de Ansiedade, e pontuações de 0-14 indicam níveis "Normais" de Stress.

Massa Corporal Magra

A massa corporal magra (MCM) será avaliada através de pletismografia por deslocamento de ar utilizando um BODPOD calibrado (COSMED USA Inc., Concord, CA). Os participantes serão instruídos a remover os sapatos, meias, joias e toda a roupa adicional para além da camada base. Será então fornecido aos participantes um barrete de natação para usar e a análise da composição corporal será realizada de acordo com as diretrizes do fabricante.

Percentagem de Gordura Corporal

A percentagem de gordura corporal (BF%) será avaliada através de pletismografia por deslocamento de ar utilizando um BODPOD calibrado (COSMED USA Inc., Concord, CA).
Os participantes serão instruídos a retirar os sapatos, as meias, as joias e toda a roupa adicional, exceto a camada base.
Será então fornecido aos participantes um barrete de natação para usar e a análise da composição corporal será realizada de acordo com as diretrizes do fabricante.

Escala de Bem-Estar Psicológico (PWB)

Aos participantes será pedido que preencham uma versão online da escala de bem-estar psicológico (PWB). A PWB é uma medição de 18 itens e 6 minutos de seis subescalas de bem-estar e felicidade: Autonomia, Domínio Ambiental, Crescimento Pessoal, Relações Positivas com Outros, Propósito na Vida e Autoaceitação. Serão instruídos a avaliar o quanto discordam ou concordam com cada subescala numa escala de Likert de 7 pontos, em que pontuações de 1 indicam "discordo totalmente" e pontuações de 7 indicam "concordo totalmente". As pontuações das subescalas para Autonomia, Domínio Ambiental, Crescimento Pessoal, Relações Positivas com Outros, Propósito na Vida e Autoaceitação são somadas, com pontuações mais altas a indicar níveis mais elevados de bem-estar psicológico em cada categoria, embora não sejam fornecidas classificações entre as pontuações.

Escala de Fadiga de Piper (PFS)

Aos participantes será pedido que preencham a versão online da Escala de Fadiga de Piper (EFP). A EFP é uma ferramenta de rastreio de fadiga com 22 perguntas, utilizando uma escala visual analógica de 0-10, em que pontuações de 0 indicam "pouca ou nenhuma fadiga" e pontuações de 10 indicam sintomas de "fadiga máxima", com 5 perguntas adicionais para a caracterização qualitativa dos sintomas e causas da fadiga. O questionário está dividido em 4 subescalas: comportamento (6 itens), afeto (5 itens), sensorial (5 itens) e cognição/humor (6 itens). As pontuações das subescalas são obtidas dividindo as pontuações dos itens da subescala pelo número de itens na subescala. O mesmo método é utilizado para calcular a pontuação total, sendo que pontuações mais elevadas indicam maior fadiga.

Índice de Qualidade do Sono de Pittsburgh (PSQI)

Os participantes serão convidados a preencher uma versão online do Índice de Qualidade do Sono de Pittsburgh (PSQI). O PSQI é uma ferramenta de autoavaliação da qualidade do sono composta por 19 perguntas, divididas em 7 subcategorias para pontuação, tais como qualidade subjetiva do sono, latência do sono, duração do sono, eficiência habitual do sono, perturbações do sono, uso de medicação para dormir e disfunção diurna. A pontuação para cada subsecção é a seguinte: Duração do Sono (0 = melhor, 3 = pior), Perturbações do Sono (0 = melhor, 3 = pior), Latência do Sono (0 = melhor, 3 = pior), Disfunção Diurna (0 = melhor, 3 = pior), Eficiência do Sono (0 = melhor, 3 = pior), Qualidade do Sono (0 = melhor, 3 = pior), Medicamentos para Dormir (0 = melhor, 3 = pior). Para a pontuação total, as pontuações de cada subsecção são somadas, sendo que pontuações totais ≤ 5 estão associadas a "boa qualidade do sono", enquanto pontuações ≥ 5 estão associadas a "má qualidade do sono".

Questionário do Estado Imunitário (ISQ)

Os participantes serão convidados a preencher uma versão online do Questionário de Estado Imunitário (ISQ). O ISQ consiste em 7 itens que avaliam o estado imunitário do respondente no último ano, perguntando sobre a incidência de queixas específicas relacionadas com o sistema imunitário. O ISQ ajuda a estabelecer a perceção de aptidão imunitária do participante com base na incidência de sintomas de doença nos 12 meses anteriores. O ISQ utiliza uma escala Likert de 0-4 para avaliar a incidência destes sintomas, em que 0 indica "Nunca" e 4 indica "Sempre (Quase sempre)". As pontuações brutas são somadas e convertidas numa pontuação final, em que uma pontuação final de 0 indica "perceção de estado imunitário muito pobre", enquanto uma pontuação final de 10 indica "perceção de estado imunitário excelente". Pontuações finais inferiores a 6 serão classificadas como perceção de função imunitária reduzida.

Questionário de Sintomas Gastrointestinais (GSQ)

Os participantes serão convidados a preencher uma versão online do Questionário de Sintomas Gastrointestinais (GSQ). O GSQ é uma ferramenta de rastreio gastrointestinal (GI) auto-reportada com 29 perguntas, dividida em duas subcategorias para pontuação: uma para os seus sintomas GI experienciados hoje e outra para os seus sintomas GI experienciados nas últimas 2 semanas. Existem também duas perguntas abertas no final do questionário, uma descrevendo quaisquer outros sintomas GI não abordados no questionário e outra abordando o consumo normal de alimentos. A pontuação da incidência de sintomas GI baseia-se numa escala de Likert de 4 pontos, com pontuações de 0 indicando sintomas "ausentes", enquanto pontuações de 3 indicam presença e frequência "severas" dos sintomas. Este questionário será utilizado para caracterizar a frequência e gravidade dos sintomas GI comuns.

Questionário de Comportamento Alimentar do Adulto (AEBQ)

Os participantes serão convidados a preencher uma versão online do Questionário de Comportamento Alimentar de Adultos (AEBQ) (Hunot et al., 2016). O AEBQ é uma ferramenta de autorrelato com 35 itens, concebida para avaliar diferenças individuais no comportamento alimentar em oito traços de apetite distintos: Prazer pela comida, Excesso alimentar emocional, Subalimentação emocional, Exigência alimentar, Resposta alimentar, Lentidão na alimentação, Fome, Resposta à saciedade. Cada item é avaliado numa escala de Likert de 5 pontos, em que a pontuação 1 indica "discordo totalmente" e a pontuação 5 indica "concordo totalmente", com pontuações mais elevadas a indicarem piores hábitos alimentares (representados pelo excesso alimentar emocional e pela subalimentação emocional) ou melhores hábitos alimentares (representados pela resposta alimentar, prazer pela comida, resposta à saciedade, exigência alimentar e lentidão na alimentação).