Biomarqueurs optiques et biochimiques dans le cancer du pancréas précoce

La collecte de suc pancréatique est réalisée par injection intraveineuse de sécrétine humaine synthétique approuvée par la FDA (ChiRhoClin Inc., Burtonsville, MD) à une dose de 0,2 µg/kg qui sera administrée pendant que l'endoscope est positionné dans la deuxième partie du duodénum. De l'intérieur du duodénum et sans canulation de la papille de Vater, un cathéter d'aspiration en plastique de 2,3 mm (Olympus, Tokyo, Japon) sera passé à travers le canal de biopsie de l'endoscope jusqu'à ce qu'il soit visible à l'écran dans le moniteur endoscopique. Une fois que la sécrétion visible active via la papille a commencé, les 10 premiers ml de suc pancréatique seront collectés par aspiration. L'ensemble de ce processus, de l'injection de sécrétine à la collecte d'échantillons, prend en moyenne 5 minutes. L'échantillon est ensuite aliquoté dans des ampoules de 2 ml, qui sont congelées instantanément dans de l'azote liquide (ou un congélateur portable à congélation rapide) et conservées au congélateur jusqu'à ce que les tests soient effectués. Les 10 meilleurs marqueurs candidats issus de la découverte et de la validation sur tissu (AUC> 0,95) et des tests pilotes de jus pancréatique (AUC> 0,9) seront évalués dans cette étude. Après extraction d'un équivalent de 0,4 ml de suc pancréatique, l'ADN sera traité au bisulfite en utilisant des méthodes optimisées. Ensuite, un dosage de la méthylation aberrante sur les gènes cibles sera réalisé à l'aide de la technique QuARTS. Les résultats seront normalisés à un marqueur d'ADN humain (par exemple, la bêta-actine) ou un marqueur d'ADN méthylé identifié pour l'épithélium pancréatique normal.