Biomarcadores ópticos y bioquímicos en el cáncer de páncreas temprano

La recolección de jugo pancreático se realiza mediante una inyección intravenosa de secretina humana sintética aprobada por la FDA (ChiRhoClin Inc., Burtonsville, MD) a una dosis de 0,2 µg/kg mientras se coloca el endoscopio en la segunda porción del duodeno. Desde dentro del duodeno y sin canulación de la papila de Vater, se pasará un catéter de aspiración de plástico de 2,3 mm (Olympus, Tokio, Japón) a través del canal de biopsia del endoscopio hasta que sea visible en la pantalla del monitor endoscópico. Una vez iniciada la secreción visible activa a través de la papila, se aspiran los primeros 10 ml de jugo pancreático. Todo este proceso, desde la inyección de secretina hasta la recolección de la muestra, toma un promedio de 5 minutos. Luego, la muestra se divide en alícuotas en ampollas de 2 ml, que se congelan instantáneamente en nitrógeno líquido (o en un congelador portátil de congelación rápida) y se almacenan en el congelador hasta que se realicen los ensayos. En este estudio se evaluarán los 10 principales marcadores candidatos del descubrimiento y la validación en tejido (AUC > 0,95) y de la prueba piloto de jugo pancreático (AUC > 0,9). Tras la extracción de un equivalente de 0,4 ml de jugo pancreático, el ADN se tratará con bisulfito utilizando métodos optimizados. Luego, se realizará un ensayo de metilación aberrante en los genes objetivo utilizando la técnica QuARTS. Los resultados se normalizarán a un marcador de ADN humano (p. ej., beta-actina) o un marcador de ADN metilado identificado para el epitelio pancreático normal.