Biomarkery optyczne i biochemiczne we wczesnym raku trzustki

Pobieranie soku trzustkowego przeprowadza się przez dożylne wstrzyknięcie zatwierdzonej przez FDA syntetycznej sekretyny ludzkiej (ChiRhoClin Inc., Burtonsville, MD) w dawce 0,2 ug/kg, podczas gdy endoskop umieszcza się w drugiej części dwunastnicy. Z wnętrza dwunastnicy i bez kaniulacji brodawki Vatera, przez kanał biopsyjny endoskopu zostanie wprowadzony plastikowy cewnik aspiracyjny o średnicy 2,3 mm (Olympus, Tokio, Japonia), aż będzie widoczny na ekranie monitora endoskopowego. Po rozpoczęciu aktywnego widocznego wydzielania przez brodawkę, pierwsze 10 ml soku trzustkowego zostanie pobrane przez odessanie. Cały ten proces od wstrzyknięcia sekretyny do pobrania próbki zajmuje średnio 5 minut. Następnie próbkę rozdziela się na porcje do 2 ml ampułek, które szybko zamraża się w ciekłym azocie (lub przenośnej zamrażarce do szybkiego zamrażania) i przechowuje w zamrażarce do czasu wykonania testów. W tym badaniu zostanie ocenionych 10 najlepszych kandydujących markerów z odkrycia i walidacji na tkance (AUC > 0,95) oraz z pilotażowego badania soku trzustkowego (AUC > 0,9). Po ekstrakcji z ekwiwalentu 0,4 ml soku trzustkowego DNA zostanie poddane obróbce wodorosiarczynem przy użyciu zoptymalizowanych metod. Następnie zostanie przeprowadzony test nieprawidłowej metylacji genów docelowych przy użyciu techniki QuARTS. Wyniki zostaną znormalizowane do markera ludzkiego DNA (np. beta-aktyny) lub markera metylowanego DNA zidentyfikowanego dla prawidłowego nabłonka trzustki.